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文档简介

1、课题1:果酒和果醋的制作【知识点背诵检测】:(一)果酒制作1原理:菌种 ,属于 核生物,新陈代谢类型 ,生殖方式 ,有氧时,呼吸的反应式为: ;无氧时,呼吸的反应式为: 。2条件:影响酒精发酵的主要环境条件有 、 、 繁殖最适温度 ,酒精发酵一般控制在 。酒精发酵过程中,要保持缺氧、酸性环境。3菌种来源:4实验设计流程图挑选葡萄冲洗_ _ _ _ _ _ 果酒 果醋5、充气口是在 时连接 ;排气口是在 时用来排出 ;出料口是用来 。排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身相连接,其目的是 。开口向下的目的是 使用该装置制酒时,应该 ;制 时,应该充气口连接气泵,输入氧气。6实验结果分析与评价:可通

2、过 和 初步鉴定,并用_ 检验酒精存在。在 条件下, 与酒精反应呈现 色。思考1为什么在酒精发酵过程中往往“先通气后密封”?思考2酒精发酵过程中发生“先来水后来酒”现象,其原因是什么?思考3葡萄酒呈现深红色的原因?思考4酵母菌是如何进行生殖的?7、你认为应该从哪些方面防止发酵液被污染?(二)果醋的制作:1原理:菌种_ _,属于_ _核生物,新陈代谢类型为_ _,生殖方式 。当氧气和糖源都充足时,将糖分解形成 ;当缺少糖源时,可将乙醇转变成 ,并进一步转变成 。醋酸生成反应式是_ 。2条件:最适合温度为_ _,需要充足的_ _。3设计实验流程及操作步骤:果酒制成以后,在发酵液中加入_ _或醋曲,

3、然后将装置转移至_ _0C条件下发酵,适时向发酵液中_ _。如果没有充气装置,可以 ,以减少空气中尘土污染。4、结果分析与评价果醋可以通过观察 的形成, 和 进行初步鉴定,再通过检测和比较发酵前后的 进行进一步的鉴定。此外,还可以通过在显微镜下观察发酵液中是否有 ,并统计其 作进步的鉴定。思考5影响醋酸发酵的环境因素还有哪些?思考6醋瓶子、未喝干的啤酒瓶子放置久了,在醋和啤酒表面形成一层“白膜”。它是怎样形成的?课题1:果酒和果醋的制作参考答案(一)1、酵母菌 真 异养兼性厌氧型 适宜条件下出芽生殖 C6H12O66O26CO26H2OC6H12O62C2H5OH2CO22、温度、氧气和pH

4、20左右 18253、附着在葡萄皮表面的野生型酵母菌 人工培养的优良酵母菌种  4、榨汁 酒精发酵 醋酸发酵5、充气口是在醋酸发酵时连接充气泵进行充气用的;排气口是在酒精发酵时用来排出 CO2或残余气体 的;出料口是取样检查和放出发酵液。排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身相连接,其目的是防止空气中微生物的污染。开口向下的目的是有利于二氧化碳的排出。使用该装置制酒时,应该关闭充气口;制醋时,应该充气口连接气泵,输入氧气。6、嗅觉 品尝 重铬酸钾 酸性 重铬酸钾 灰绿色思考1为什么在酒精发酵过程中往往“先通气后密封”?“通气”的目的是使酵母菌进行有氧呼吸大量繁殖 。“密封”的

5、目的是使酵母菌进行无氧呼吸产生酒精 。思考2酒精发酵过程中发生“先来水后来酒”现象,其原因是什么?酵母菌首先进行有氧呼吸产生了水,然后进行无氧呼吸才产生酒精。思考3葡萄酒呈现深红色的原因?在发酵过程中葡萄皮的色素进入到发酵液中。思考4酵母菌是如何进行生殖的?酵母菌在环境适宜时进行出芽生殖,环境不适宜时产生孢子进入休眠状态7、1、榨汁机要清洗干净 2、发酵瓶要清洗干净,用体积分数为70%的酒精消毒,或用洗洁精洗涤 3、装入葡萄汁后,封闭充气口。其它例如,榨汁机、发酵装置要清洗干净;每次排气时只需拧松瓶盖、不要完全揭开瓶盖等。(二)果醋的制作:1、原理醋酸菌 ,原 异养需氧型。 二分裂 醋酸 乙醛

6、 醋酸 C2H5OHO2CH3COOHH2O2、3035 氧气3、酸酸菌 3035 充入无菌空气或氧气 将瓶盖打开,在瓶口上盖上纱布4、菌膜 嗅味 品尝 PH值 醋酸菌 数量思考5影响醋酸发酵的环境因素还有哪些?氧气和pH。思考6醋瓶子、未喝干的啤酒瓶子放置久了,在醋和啤酒表面形成一层“白膜”。它是怎样形成的?醋酸菌大量繁殖形成的。课题2:腐乳的制作【知识点背诵检测】:1 原理(1)腐乳的发酵有多种微生物的协同作用,如 、 、 、 等,其中起主要作用的是 ,它是一种 核生物,新陈代谢类型是 。(2)等微生物产生的 酶可以将豆腐中的分解成小分子的 和 ;脂肪酶可以将水解成和。(3)自然条件下毛霉

7、来自空气中的 ;现代的腐乳生产是在严格的条件下,将优良菌种直接接种在豆腐上,这样可以避免 ,保证。2实验设计完成以下实验流程图: 让豆腐长出毛霉21 毛霉的生长毛霉生长的适宜条件:温度 ,保持一定的 。自然条件下毛霉来自空气中的 ;在工厂化生产中毛霉来自 条件下的 。22 加盐腌制在长满毛霉的豆腐块上加盐的目的是 。23 配制卤汤卤汤是由 及 配制而成的。卤汤中酒的含量一般控制在 。卤汤的作用是调节腐乳的 ,并可以抑制 。3发酵操作阅读“操作提示”,完成相关问题。31控制好材料的用量一是控制好 的用量:过多影响口味,过少容易 。二是控制卤汤中 含量在12左右:过高会延长腐乳的 ,过低可能导致

8、。2防止杂菌感染防止杂菌感染的措施有:玻璃瓶用 消毒;装瓶过程中操作要 ;装瓶后用胶带密封;密封后用 消灭瓶口杂菌。【补充】腐乳发酵:前期发酵:一是毛霉生长,分泌以蛋白质酶为主的各种酶,使蛋白质水解成氨基酸;二是毛霉形成菌膜包住豆腐使之成形。后期发酵:酶与微生物协同参与生化反应。腌制处理:各种辅料及酶的缓慢作用,使腐乳生成香气。【合作探究,问题解决】(1)你能利用所学的生物学知识,解释豆腐长白毛是怎么一回事吗?(2)王致和为什么要撒许多盐,将长毛的豆腐腌起来?(3)你能总结王致和做腐乳的方法吗?(4)我们平常吃的豆腐,哪种适合用来做腐乳?为什么?(5)腐乳外部有一层致密的“皮”,这层“皮”是怎

9、样形成的呢?它对人体有害吗?它的作用是什么?(6)腌制腐乳时,为什么要随着豆腐层的加高而增加盐的用量?为什么在接近瓶口的表面要将盐铺厚一些?(7)加盐为什么能防止食品腐败?(8)卤汤中的哪些成分具有防腐杀菌作用?(9)影响腐乳品质的条件有哪些? (10)在整个制作过程中,还有哪些防止杂菌感染的措施?(11)思考10制作腐乳的配方有 和 等。红色腐乳是由于制作中利用了 而使腐乳呈现红色。糟方因加入 而糟香扑鼻,青方因 ,用豆腐本身渗出的水加盐腌制而成,绵软油滑,异香奇臭。(12)用盐量对腐乳制作有哪些影响? (13)发酵温度对腐乳制作有什么影响?(14)发酵时间对腐乳制作有什么影响?课题2:腐乳

10、的制作参考答案【知识点背诵检测】1、(1)青霉、酵母、曲霉、毛霉 毛霉 真 异养需氧型 (2)毛霉 蛋白酶 蛋白质 肽 氨基酸 脂肪 甘油 脂肪酸(3)空气中的毛霉孢子无菌 毛霉 其他菌种污染2加盐腌制 加卤汤装瓶 密封腌制2.1 1518 湿度 毛霉孢子 ;严格无菌 直接接种优良菌种 。2.2析出豆腐中的水分使之变硬和抑制微生物的生长避免腐败变质 。调味23 酒 各种香辛料 12% 色、香、味 微生物的生长3、3.1盐 腐败变质 酒 成熟时间 豆腐腐败。3.2沸水 迅速小心 酒精灯【合作探究,问题解决】(1)你能利用所学的生物学知识,解释豆腐长白毛是怎么一回事吗?豆腐上生长的白毛是毛霉的白色

11、菌丝。严格地说是直立菌丝,在豆腐中还有匍匐菌丝。(2)王致和为什么要撒许多盐,将长毛的豆腐腌起来?1盐能防止杂菌污染,避免豆腐腐败。(3)你能总结王致和做腐乳的方法吗?让豆腐上长出毛霉加盐腌制加卤汤装瓶密封腌制 (4)我们平常吃的豆腐,哪种适合用来做腐乳?为什么?含水量为70%左右的豆腐适于作腐乳。用含水量过高的豆腐制腐乳,不易成形。(5)腐乳外部有一层致密的“皮”,这层“皮”是怎样形成的呢?它对人体有害吗?它的作用是什么?:“皮”是前期发酵时在豆腐表面上生长的菌丝(匍匐菌丝),它能形成腐乳的“体”,使腐乳成形。“皮”对人体无害。(6)腌制腐乳时,为什么要随着豆腐层的加高而增加盐的用量?为什么

12、在接近瓶口的表面要将盐铺厚一些?越接近瓶口,杂菌污染的可能性越大,因此要随着豆腐层的加高增加盐的用量,在接近瓶口的表面,盐要铺厚一些,以有效防止杂菌污染。(7)加盐为什么能防止食品腐败?高浓度盐溶液能有效抑制微生物的生长(8)卤汤中的哪些成分具有防腐杀菌作用?酒精和香辛料(9)影响腐乳品质的条件有哪些? 菌种和杂菌: 菌种是生产发酵的关键,如果菌种退化则表现出生化功能的变化,如水解速率、代谢产物等都会发生变化,从而影响品质;如有杂菌污染则直接影响产品的色、香、味。温度:适宜温度:1518温度过高,其他微生物生长,可能导致豆腐腐败,过低,腐乳成熟时间延长。 发酵时间 发酵时间影响生化反应度及生化

13、产物的量。酒的用量 酒精含量的高低与腐乳后期发酵时间的长短有很大关系。酒精含量越高,对蛋白酶的抑制作用也越大,使腐乳成熟期延长;酒精含量过低,蛋白酶的活性高,加快蛋白质的水解,杂菌繁殖快,豆腐易腐败,难以成块。盐的用量盐可抑制其他杂菌的生长,但盐过多,太咸,也会影响腐乳的品质。豆腐的含水量含水量过高,影响毛霉的有养呼吸;含水量过低,不利于毛霉的的代谢。(10)在整个制作过程中,还有哪些防止杂菌感染的措施?加盐腌制、卤汤中的酒精和香辛料等。玻璃瓶用沸水消毒装瓶过程中操作要迅速小心; 装瓶后用胶带密封;密封后用酒精灯消灭瓶口杂菌.(11)思考10制作腐乳的配方有 红 方、 槽 方和 青 方等。红色

14、腐乳是由于制作中利用了 红曲 而使腐乳呈现红色。糟方因加入 酒糟而糟香扑鼻,青方因 不加辅料,用豆腐本身渗出的水加盐腌制而成,绵软油滑,异香奇臭。(12)用盐量对腐乳制作有哪些影响?调节口味、杀菌、脱水等。(13)发酵温度对腐乳制作有什么影响?温度过低或过高会影响毛霉的生长和酶的作用,从而影响发酵的进程和发酵质量。(14)发酵时间对腐乳制作有什么影响?时间过短,发酵不充分;时间过程,豆腐会软化不易成型,从而影响腐乳的口味。课题3 制作泡菜并检测亚硝酸盐的含量【知识点背诵检测】:一、乳酸菌发酵1)泡菜的制作离不开_,其新陈代谢类型是:_。常见的类型有 和 ,常用于制作酸奶的是 ,它们都属于 细胞

15、。分裂方式为 。2)原理:在 条件下,将葡萄糖分解为 。反应式为 。二、关于亚硝酸盐(1)物理性质:_色粉末,易溶于_。(2)用途:_摄入总量达到_g 中毒一般_人体健康引起引起摄入总量达到_g 中毒(3)危害特定条件下:亚硝酸盐 _(致癌物)绝大多数随_排出(4)在人体内的代谢过程转变肉制品_mg/kg酱腌菜中_mg/kg(5)卫生标准(残留量)婴儿奶粉中_ mg/kg原理:_条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生_反应后,与N-1萘基乙二胺盐酸盐结合形成_色染料。将其与已知浓度的标准显色液进行目测比较,可大致估算出亚硝酸盐的含量。(6)测定测定含量的操作:配制溶液 制备_ 制备_ 比色二、试验

16、设计1、泡菜坛的选择泡菜坛的选择标准是 、 、 、 、 ,否则容易引起 。2、制作过程(1)配制盐水:清水与盐比例为_,_后备用。(2)装坛:蔬菜装至_时加入_,继续装至_,注入_,使_,盖好坛盖。(3)密封:坛盖边沿水槽中_,保证_环境。时间3、腌制条件温度(1)条件食盐用量(2)腌制时间与亚硝酸盐含量关系一般腌制_后,亚硝酸盐含量_。4、试验流程三、结果分析与评价:1亚硝酸盐含量在 天达到最高峰,在腌制 天后亚硝酸盐含量开始明显降低。2亚硝酸盐含量升高是因为蔬菜组织和细菌内硝酸还原酶将硝酸盐还原为亚硝酸。亚硝酸盐含量降低的原因是硝酸还原酶活性减弱,亚硝酸盐还原减少并且被微生物利用。【合作探

17、究,问题解决】1、含抗生素牛奶不能生产酸奶的原因是 抗生素杀死乳酸菌 。2、日常生活中不宜食用放置时间过长和变质蔬菜的原因是什么?亚硝酸盐含量较高。3、在哪些操作过程中会感染乳酸菌?原料加工和装瓶4、泡菜坛内的“白膜”是怎样形成的? 产膜酵母繁殖5、导致细菌大量繁殖,亚硝酸盐含量增加的因素有食 盐用量不足10 和 腌制时间过长 。一般在腌制 10 天后亚硝酸盐含量开始降低。6、在酸奶制作过程 会 (不会、会)产生亚硝酸盐。7、哪些溶液需要避光保存?提取剂的成分有哪些?答:对氨基苯磺酸溶液和N1萘基乙二胺盐酸盐溶液需要避光保存,提取剂是氯化镉、氯化钡的水溶液。8、加入白酒有什么作用?白酒可抑制泡

18、菜表面杂菌的生长,它也是一种调味剂,可增加醇香感。9、用水封闭坛口起什么作用?不封闭有什么结果?水封闭坛口起着使坛内与坛外空气隔绝的作用,空气中21是氧气,这是最简易的造成无氧环境的方法。这样,坛内可利用蔬菜中天然存在的乳酸菌进行乳酸发酵。如不封闭,则会有许多需氧菌生长,蔬菜会腐烂。课题3 制作泡菜并检测亚硝酸盐的含量参考答案一、乳酸菌发酵1)乳酸菌 异养厌氧型 乳酸链球菌 和 乳酸杆菌 , 乳酸杆菌 。原核 二分裂2)无氧 乳酸 C6H12O62C3H5O3能量二、亚硝酸盐1)白 水 2)食品添加剂 3)不会危害 0.3-0.5g 3g4)尿 亚硝胺 5)30mg/kg 20mg/kg 2m

19、g/lg6)盐酸 重氮化 玫瑰红 标准显色液 样品处理液 二、试验设计1、火候好、无裂纹、无砂眼、坛沿深、盖子吻合好 , 引起蔬菜腐烂 2、(1)4:1 煮沸冷却(2)半坛 蒜瓣、生姜、香辛料及其他香辛料 八成满 配制好的盐水 盐水浸没全部菜料 注满水 坛内乳酸菌发酵所需的无氧环境。3、(1)过短 过高 过低 细菌大量繁殖 亚硝酸盐含量增加 (2)10d 开始下降三、结果分析与评价: 1)前6天 10天课题4:微生物的实验室培养【知识点背诵检测】一、培养基1概念:人们按照微生物对 的不同需求,配制出供其 的营养基质叫培养基。可分为 培养基和 培养基。 2营养构成:各种培养基一般都含有 、 、

20、和 ,此外还要满足微生物生长对 、 以及 的要求。 3培养乳酸杆菌时需在培养基中添加 、培养霉菌时需将培养基PH调至 、培养细菌时需将PH调至 、培养厌氧微生物则需提供 条件。二、无菌技术(一)获得纯净培养物的关键是: ,具体操作如下: 1对实验操作的 、操作者的 和 进行 。 2将用于微生物培养的 、 和 等器具进行 。 3为避免周围环境中微生物的污染,实验操作应在 附近进行。4实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与 相接触。 (二)消毒和灭菌1消毒是指 。常用的方法有 、 、 消毒法。2灭菌是指 。常用的方法有: 、 、 灭菌。三、实验操作-大肠杆菌的纯化培养本实验所用的培养基是 ,本实

21、验可分成 和 两个阶段进行。(一)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基1制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作步骤是: 、 、 、 、 。2 倒平板:待培养基冷却至 左右时在酒精灯火焰附近操作进行。其过程是:在火焰旁右手拿 ,左手 ;使锥形瓶的瓶口 ;左手将培养皿 ,右手 ,立刻盖上皿盖。待平板冷却凝固后,将平板 。(二)纯化大肠杆菌微生物接种:最常用的是 法和 法。另外还有穿刺接种和斜面接种等。 1平板划线法是 的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。其操作步骤是:将 在酒精灯火焰上灼烧直至 。在酒精灯火焰旁冷却接种环,并打开大肠杆菌的菌种试管的棉塞。将菌种试管口通过火焰达到 的目的。将冷却的接种环

22、伸入到 。将菌种试管口再次通过火焰后塞上棉塞。将皿盖打开一条缝隙,把接种环 ,盖上皿盖,不要划破培养基。灼烧接种环,冷却后从 划线。重复上述过程,完成三、四、五区域内划线。注意不要将 相连。将平板 培养。2稀释涂布平板法则是将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将 进行培养。当稀释倍数足够高时,即可获得单个细菌形成的标准菌落。系列稀释操作:取盛有 mL水的无菌试管6支 ,编号101、102、103、104、105、106。用灼烧冷却的移液管吸取 mL菌液注入编号为101试管中,并吹打3次使之混匀。从101倍液中吸取 mL菌液注入到编号为102试管内吹打均匀,获得102倍液。依此类推。【合作探究,问题

23、解决】一、培养基标准培养基类型配制特点主要应用物理性质固体培养基加入琼脂较多菌种分离,鉴定,计数半固体培养基加入琼脂较少菌种保存液体培养基不加入琼脂工业生产,连续培养化学组成合成培养基由已知成分配制而成,培养基成分明确菌种分类、鉴定天然培养基由天然成分配制而成,培养基成分不明确工业生,产降低成本目的用途鉴别培养基添加某种指示剂或化学药剂菌种的鉴别选择培养基添加(或缺少)某种化学成分菌种的分离思考1从细胞的化学元素组成来看,培养基中为什么都含有这些营养成分?来源:Z#xx#k.Com二、无菌技术常用方法使用范围举例微生物的消灭程度消毒巴氏消毒法煮沸消毒法化学试剂消毒法氯气消毒:酒精消毒:紫外线消

24、毒灭菌灼烧灭菌干热灭菌高压蒸汽灭菌思考2无菌技术除了防止培养物被污染外,还具有的目的是什么?思考3利用干热灭菌箱对玻璃器皿灭菌时物品不能摆得太挤,目的是什么?思考4物品装入高压蒸汽灭菌锅灭菌后,要首先打开排气阀,煮沸并排除锅内冷空气,其目的是 ;随后关闭排气阀继续加热,气压升至 ,温度为 ,并维持 min;最后切断热源,使温度自然降温,气压务必降至 时打开锅盖,其目的是防止 。三、实验操作-大肠杆菌的纯化培养思考5在制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的称量操作中,动作要迅速,原因是什么?溶化操作中需要不断用玻璃棒搅拌的目的是什么?思考6牛肉膏和蛋白胨主要为微生物提供什么营养物质?【要点归纳,反思总结】

25、1.培养基:人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质,是进行微生物培养的物质基础。2.培养基的化学成分包括 水 、 无机盐 、 碳源 、 氮源 、生长因子等。培养基还要满足微生物生长对PH、特殊营养物质以及氧气的要求。例如,培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素,培养霉菌时须将培养基的pH调至酸性,培养细菌是需要将pH调至中性或微碱性,培养厌氧型微生物是则需要提供无氧的条件。3.无菌技术·获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵,要注意以下几个方面:对实验操作的空间、操作者的衣着和手,进行清洁和消毒。将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌。为避

26、免周围环境中微生物的污染,实验操作应在酒精灯火焰附近进行。实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。4.消毒与灭菌的区别消毒指使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子)。消毒方法常用煮沸消毒法,巴氏消毒法(对于一些不耐高温的液体)还有化学药剂(如酒精、氯气、石炭酸等)消毒、紫外线消毒。灭菌则是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子。灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌。5.制作牛肉膏蛋白胨固体培养基 方法步骤:计算、称量、溶化、灭菌、倒平板。6.纯化大肠杆菌(1)微生物接种的方法最常用的是平板划线法和

27、稀释涂布平板法。(2)用平板划线法和稀释涂布平板法接种的目的是:使聚集在一起的微生物分散成单个细胞,从而能在培养基表面形成单个的菌落,以便于纯化菌种。7.菌种的保存(1)对于频繁使用的菌种,可以采用临时保藏的方法。临时保藏方法将菌种接种到试管的固体斜面培养基上,在合适的温度下培养。当菌落长成后,将试管放入4的冰箱中保藏。以后每36个月,都要重新将菌种从旧的培养基上转移到新鲜的培养基上。(2)长期保存菌种,可以采用甘油管藏的方法。在3mL的甘油瓶中,装入1mL甘油后灭菌。将1mL培养的菌液转移到甘油瓶中,与甘油充分混匀后,放在20的冷冻箱中保存。 参考答案【知识点背诵检测】一、1.营养物质 生长

28、繁殖 液体 固体 2水.碳源 氮源 无机盐 PH 特殊营养物质 氧气 3维生素,酸性,中性或微碱性,无氧二 (一)杂菌 1.空间 衣着 手,清洁和消毒 2.器皿 接种用具,培养基,灭菌 3. 酒精灯火焰 4.周围的物品 (二)1.略 巴氏消 酒精 2.略 灼烧 干热 高压蒸气三 实验操作、(一)1.计算称量溶化灭菌倒平板 2. 50,锥形瓶,拔出棉塞,迅速通过火焰,打开一条缝隙,将培养基倒入培养皿,倒过来放置(二)平板划线 .稀释涂布平板1通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线,接种环,烧红。,消灭试管口杂菌。 菌液中取出一环菌种。,伸入平板内划35条平行线,第一区划线末端开始向第二区域内,第

29、五区的划线与第一区划线,倒置放在培养箱中:Z,xx,k.Com2不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,9mL,灭菌。,1。,1【合作探究,问题解决】思考1:C、H、O、N、P、S是构成细胞原生质的基本元素,约占原生质总量的97以上。思考2:防止感染实验操作者 。思考3避免妨碍热空气流通。思考4有利于锅内温度升高,100k Pa,121,1530,零,容器中的液体暴沸,思考5防止牛肉膏吸收空气中水分。防止琼脂糊底而导致烧杯破裂。思考6糖 维生素 和 有机氮课题5:土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 【知识点背诵检测】:一、理论基础1、尿素是一种重要的 肥,农作物 (能,不能)直接吸收利用

30、,而是首先通过土壤中的细菌将尿素分解为 ,这是因为细菌能合成 。2、筛选菌株(1)实验室中微生物筛选的原理:人为提供有利于 生长的条件(包括营养、温度、pH等),同时 或 其他微生物生长。 (2)选择培养基:在微生物学中,将允许 种类的微生物生长,同时 和 其他种类微生物生长的培养基,称作选择培养基。(3)配制选择培养基的依据根据选择培养的菌种的生理代谢特点加入某种物质以达到选择的目的。例如,培养基中不加入有机物可以选择培养 微生物;培养基中不加入氮元素,可以选择培养 的微生物,加入高浓度的食盐可选择培养金黄色葡萄球菌等。3、统计菌落数目(1)测定微生物数量的常用方法有 和 。(2)稀释涂布平

31、板法统计样品中活菌的数目的原理当样品的 足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个 。通过统计平板上的菌落数,就能推测出样品中大约含有多少活菌。为了保证结果准确,一般选择菌落数在 的平板进行计数。此外,测定微生物数量的常用方法还有 直接计数。(3)计算公式:每克样品中的菌株数= C代表某一稀释度下平板上生长的 。V代表涂布平板时所用的稀释液的 (mL)M:代表 。(4)注意事项为了保证结果准确,一般设置 个平板,选择菌落数在 的平板进行计数,并求取平均值。统计的菌落数比活菌的实际数目 。这是因为当两个或多个细胞在一起时,平板上观察到的只是 菌落。因此,统计结果一般用 来表示。

32、4、设置对照设置对照的主要目的是排除实验组中 对实验结果的影响,提高实验结果的 。例如为了排除培养基是否被杂菌污染了,需以培养 的培养基作为 。二、实验设计关于土壤中某样品细菌的分离与计数实验操作步骤如下: 1 取样:从肥沃、湿润的土壤中取样。应先 3 cm左右,再取样,将样品装入事先准备好的 中。 2制备 :准备牛肉膏蛋白胨培养基和选择培养基,将菌液稀释相同的倍数,在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落数目应明显 选择培养基上的数目,因此,牛肉膏蛋白胨培养基可以作为 ,用来判断选择培养基是否起到了选择作用。 3微生物的 与观察 将10g土样加入盛有90 mL无菌生理盐水的锥形瓶中(体积为250 m

33、L),充分摇匀,吸取上清液 ,转移至盛有 的生理盐水的无菌大试管中,将土样以1、101、102 依次等比稀释至107稀释度,并按照由107103稀释度的顺序分别吸取 进行平板涂布操作。每个稀释度下需要3个选择培养基、1个牛肉膏蛋白胨培养基。 将涂布好的培养皿放在30温度下培养,及时观察和记录。 挑选选择培养基中不同形态的菌落接入含 培养基的斜面中,观察能否产生如教材中图2-lO的颜色反应。 4细菌的计数当菌落数目稳定时,选取菌落数在 的平板进行计数。在同一稀释度下,至少对3个平板进行重复计数,然后求出 ,并根据平板所对应的稀释度计算出样品中细菌的数目。三、操作提示1、无菌操作(1)取样的用具在

34、使用前都需要 。(2)应在 旁称取土样,并在 附近将称好的土样倒入锥形瓶中,塞好棉塞。(3)在 土壤溶液的过程中,每一步都要在 旁操作。2、菌种鉴定细菌合成的 将尿素分解成氨,使培养基的碱性 。在以 为唯一氮源的培养基中加入 指示剂,培养某种细菌后,若指示剂变 ,可初步鉴定该种细菌能够分解尿素。 思考测定饮水中大肠杆菌数量的方法是将一定体积的水用细菌过滤器过滤后,将滤膜放到 培养基上培养,大肠杆菌菌落呈现 色,通过记述得出水样中大肠杆菌的数量。(三)课堂总结、点评实验方案土壤中尿素分解菌的分离与计数分离筛选微生物的原理有利于 生长抑制或阻止 生长人为条件微生物计数方法与原理 法 计数对照设置与

35、重复设置实验设计实验操作结果与分析三:思考与讨论1、P22在该培养基的配方中,为微生物的生长提供碳源和氮源的分别是什么物质?答案:提供碳源的是 葡萄糖 ,提供氮源的的是 尿素。2、P22这种培养基对微生物是否具有选择作用?如果有,又是如何进行选择的?答案:具有 只有能够以尿素作为氮源的微生物才能在该培养基上生长 。3、P23你认为哪位同学的结果接近真实值?你认为这两位同学的实验需要改进吗?如果需要,如何改进?答案:第 二 位同学的结果接近真实值 改进的操作是第一位同学需设置重复实验组;第二位同学统计的三个菌落数相差太大,说明操作有误,需重新实验。4、P23你能通过设置对照,帮助A同学排除上述两

36、个可能影响实验结果的因素吗?答案:方案1:其他同学用A同学的土样进行实验。方案2:A同学以不接种的培养基作为空白对照。课题5:土壤中分解尿素的细菌的分离与计数参考答案:【预习检测】理论基础1氮 不能 氨 脲酶2.(1)目的菌珠 抑制 阻止 (2)特定 抑制 阻止(3)自养 能固氮的微生物;3.(1)有稀释涂布平板法 显微镜直接计数 (2)稀释度 细菌 30-300 显微镜 (3)见课本(4)3 30-300 低 一个 活菌4. 非测试因素 可信度 该种微生物的无杂菌污染的无菌 空白对照二、实验设计1. 土壤,铲去表层土 信封 2. 培养基 多于 对照 3.培养 1ml 9ml 0.1mL 酚红

37、指示剂 4.30-300 平均数三、1.灭菌 火焰 火焰 稀释 火焰 2.脲酶 增强 尿素 酚红 红 伊红美蓝 黑课题6:分解纤维素的微生物的分离 【知识点背诵检测】一、纤维素与纤维素酶1.纤维素的元素组成: 2.纤维素是一种由 首尾相连而成的 化合物,是含量最丰富的多糖类物质。纤维素能被土壤中某些微生物分解利用,这是因为它们能够产生 。延伸1:草食性动物是怎样消化食物中纤维素的?3 是自然界中纤维素含量最高的天然产物。纤维素的分解需要在 酶的催化作用下完成,请完成下列过程:C1酶、Cx酶葡萄糖苷酶延伸2:1个酶活力单位是指在温度为 ,其它反应条件最适宜情况下,在 min内转化 的底物所需要的

38、酶量。二、纤维素分解菌的筛选1筛选纤维素分解菌的方法是 。该方法可以通过 反应直接对微生物进行筛选。2其原理是:刚果红可以与纤维素形成 ,当纤维素被 _分解后,红色复合物无法形成,出现以 为中心的 ,我们可以通过是否产生 来筛选纤维素分解菌。三、实验设计完成实验方案流程图,微生物培养土壤取样纯化培养1纤维素分解菌大多分布在 的环境中。2.刚果红染色法种类:一种是 ,另一种是 。四、课题延伸1为了确定分离得到的是纤维素分解菌,还需要进行 实验,纤维素酶的发酵方法有 发酵和 发酵。2纤维素酶测定方法是对纤维素酶分解滤纸等纤维素所产生的 _ _ 进行定量测定。思考1为什么对分离的纤维素分解菌作进一步

39、的鉴定?(三)课堂小结、点评纤维素分解微生物的分离纤维素酶种类、作用、最适pH、催化活力 染色筛选原理实验设计土壤取样选择培养涂布培养纯化培养前置染色法后置染色法富含 土壤增大 染色鉴别分离出分解菌课本思考题答案:(1)分离分解纤维素的微生物的实验流程与稀释液的取样培养流程图有何异同?它们的区别是:稀释液的取样流程图是将土样制成的菌悬液直接涂布在以尿素为唯一氮源的选择性培养基上,直接分离得到菌落。分离分解纤维素的微生物的实验流程通过选择培养,使纤维素分解菌得到增殖后,再将菌液涂布在选择培养基上。其他步骤基本相同。(2)为什么要在富含纤维素的环境中寻找纤维素分解菌?由于生物与环境的相互依存关系,

40、在富含纤维素的环境中,纤维素分解菌的含量相对提高,因此从这种土样中获得目的微生物的几率要高于普通环境。(3)将滤纸埋在土壤中有什么作用?你认为滤纸应该埋进土壤多深?将滤纸埋在土壤中能使纤维素分解菌相对聚集,实际上是人工设置纤维素分解菌生存的适宜环境。一般应将纸埋于深约10cm左右腐殖土壤中。(4)两种刚果红染色法的比较染色法优点缺点方法一方法二产生淀粉酶的微生物也产生模糊透明圈,有些微生物能降解色素,形成明显的透明圈。(5)为什么选择培养能够“浓缩”所需的微生物?在选择培养的条件下,可以使那些能够适应这种营养条件的微生物得到迅速繁殖,而那些不适应这种营养条件的微生物的繁殖被抑制,因此可以起到“

41、浓缩”的作用。课题2-3:分解纤维素的微生物的分离参考答案:一1.C、H、O 2.葡萄糖 高分子 纤维素酶 延伸1答案:反刍动物的瘤胃中生活着大量的可以分解纤维素的微生物。微生物能够产生纤维素酶,最终将纤维素分解成葡萄糖。3. 棉花 纤维素 纤维素 纤维二糖 葡萄糖 延伸2、25 1 1mmol二、1、刚果红染色法 颜色 2、红色复合物 纤维素酶 纤维素分解菌 透明圈 透明圈3、 选择培养 梯度稀释 涂布到鉴别纤维素分解菌培养基上 挑选菌株1、 富含纤维素 2、先培养微生物,再加入刚果红进行颜色反应; 在倒平板时就加入刚果红四、1、发酵产纤维素酶的;液体;固体;2、葡萄糖【思考1】提示:产生透

42、明圈的菌落可能是能产生淀粉酶的微生物,也可能是能降解刚果红的菌种,所以需要进一步鉴定。 (3) 、刚果红;纤维素;纤维素分解菌的浓度(4)、染色法优点缺点方法一颜色反应基本上是纤维素分解菌的作用操作繁琐刚果红会使菌落之间发生混杂方法二操作简便不存在菌落混杂问题产生淀粉酶的微生物也产生模糊透明圈,有些微生物能降解色素,形成明显的透明圈。课题7:菊花的组织培养 【基础知识检测】一、基础知识(一)植物组织培养的基本过程1.细胞分化(1)概念:在个体发育中,相同细胞的后代在_、_、_上发生稳定性差异的过程,叫做细胞分化。(2)过程:如:受精卵增殖生长分化形成组织、器官、系统。(3)特点: :是一种持久性的变化,它发生在生物体的整个生命过程中,在_期达到最大限度。 :生物界普遍存在,是个体发育的基础 。一般来说,已分化的细胞不会再变回原来的状态。(4)原因:2. 细胞的全能性(1)定义:(2)原理:(3)实例:已分化的植物细胞,仍具有全能性。高度特化的动物细胞,从整个细胞来说,全能性受到限制。但它的细胞核仍然保持着全能性,这是因为_。(4)全能性的比较: 受精卵>生殖细胞>体细胞。植物细胞>动物

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