第二章中药制剂的鉴别

1、中药制剂的鉴别药物分析教研室1第二章中药制剂的鉴别n定义定义中药制剂鉴别是利用一定的分析方法和技术来确定中药制剂中药制剂的真伪真伪。n内容内容 性状鉴别 显微鉴别 理化鉴别2n定义定义 中药制剂的性状中药制剂的性状是对药品颜色和外表的感官描述，包括形状、大小、色泽、表面特征、质地、形状、大小、色泽、表面特征、质地、气味气味等方面。 性状与投料的原料质量及工艺有关 初步反映中药制剂质量状况中药制剂的鉴别性状鉴别黄连上清丸：黄连上清丸： “本品为本品为黑褐黑褐色色的大蜜的大蜜丸丸；气气芳香，芳香，味味苦。苦。”3n内容内容颜色颜色：与所含成分、制备工艺有关 复方制剂考虑到贮存期间颜色会变深形态形态

2、：不同剂型，形态不一形状形状：与设备模具有关（栓剂）气气：香、芳香、清香、腥、臭、特异等 不明显用气微，香气浓厚时用芳香浓郁味味：甜、酸、苦、涩、辛、凉、咸、辣、麻等中药制剂的鉴别性状鉴别4n注意注意1.制剂的性状指成品成品的颜色、形态、气味等2.有包衣的丸剂、片剂应描述除去包衣后的片心、片心、 丸心的颜色及气味丸心的颜色及气味3.硬胶囊应写明除去胶囊后内容物的性状内容物的性状4.制剂色泽有两种色调组合，描写时以后者为主后者为主，如棕红色中药制剂的鉴别性状鉴别56789中药制剂的鉴别n物理常数测定物理常数测定折光率、旋光度、比旋度、凝点、熔点、相对密度 定性鉴别的一种手段性状鉴别10n局限性局

3、限性中药种类繁多，品种复杂。中成药而言，包括“丸、散、膏、丹、片”等多种剂型，仅靠传统的性状鉴定方法不能识别出其中的方药组成和药材的真伪。中药制剂的鉴别丸散膏丹、神仙难辨丸散膏丹、神仙难辨性状鉴别11n发展发展 我国著名生药学家徐国钧教授，开创了中药制剂显微鉴定，从实际上解决了中药材粉末和含有中药原粉的中成药制剂的真伪鉴定问题。在我国历版药典中均有很大部分的中成药采用显微方法鉴定。 中药制剂的鉴别显微鉴别12n定义定义 利用显微镜显微镜来观察中药制剂中原料药材原料药材的组组织碎片、细胞或内含物织碎片、细胞或内含物等微观特征，从而鉴别制剂的处方组成。 中药制剂的鉴别显微鉴别13n使用范围使用范围

4、 以药材粉碎成细粉后直接制成制剂或添加有部分药材粉末药材粉末的制剂，原药材的显微特征仍保留。 蛇胆川贝散：川贝母仅用淀粉粒淀粉粒作为指标 牛黄解毒片：大黄用草酸钙簇晶草酸钙簇晶作为鉴别特征中药制剂的鉴别显微鉴别1415n制片方法制片方法 显微鉴定，制作良好的切片切片或标准片标准片是关键。把切片或粉末标准片用适当的试液进行处理和封藏，试液的选择必须具有合理性合理性。 中药制剂的鉴别显微鉴别16n制片方法制片方法试液的选择试液的选择1.水或稀甘油水或稀甘油：细胞壁颜色及淀粉粒、油滴、树脂2.水合氯醛：水合氯醛：组织构造和细胞形状及叶片、花和花粉粒，尤其适于观察草酸钙结晶3. 5%氢氧化钾液：氢氧化

5、钾液：可溶解糊粉粒、淀粉粒及蛋白质，使细胞壁膨胀，从而增强透明度4.氯化碱液：氯化碱液：试剂可漂白切片及除去叶绿素5. 1:1乙醚乙醇液：乙醚乙醇液：用于脱去种子类药材切片中的脂类及挥发油类成分 中药制剂的鉴别显微鉴别17n制片方法制片方法中药制剂的鉴别散剂、胶囊剂：粉末粉末+ +载玻片载玻片+ +适当的试液适当的试液 显微观察显微观察片剂：正中切开，由切开面由外至内刮取少量样品装片；粉末粉末+ +载玻片载玻片+ +适当的试液适当的试液 显微观察显微观察丸剂、颗粒剂：研成粉末，装片粉末粉末+ +载玻片载玻片+ +适当的试液适当的试液 显微观察显微观察显微鉴别18中药制剂的鉴别1. 5%氢氧化钾

6、液适量蜜丸+试管中+ 5%氢氧化钾液 加热至玻璃棒挤压能离散为止，倾出碱液+水洗涤，取出少量+试液处理 观察蜜丸：正中切开，由切开面由外至内刮去少量样品，装片；或切碎除蜜蜜丸除蜜方法显微鉴别19中药制剂的鉴别2.氯酸钾法：适量蜜丸+试管中+ 硝酸溶液及氯酸钾少量缓缓加热至产生的气泡渐少时+氯酸钾少量玻璃棒挤压能离散为止，倾出酸液+水洗涤，取出少量+试液处理 观察显微鉴别20蜜丸切碎+水洗涤 离心管中离心分离沉淀（多次）取出少量+试液处理 观察中药制剂的鉴别4.离心分离法：适量蜜丸+试管中+硝铬酸液 放置 玻璃棒挤压能离散为止，倾出酸液+水洗涤，取出少量+试液处理 观察3.硝铬酸法：显微鉴别21

7、n例中药制剂的鉴别显微鉴别22n例中药制剂的鉴别显微鉴别山药山药茯苓茯苓熟地黄熟地黄牡丹皮牡丹皮山茱萸山茱萸泽泻泽泻23n局限性局限性1.药材粉末特征间的交叉干扰；交叉干扰；2.经过提取的药材经过提取的药材，其化学成分已被浸出，但仍然保持着原来的细胞形态特征，所以仅通过显微观察不能完全解决内在的质量问题；不能完全解决内在的质量问题；3.一种药材具有多种植物来源，通常粉末的特征各不相同；4.药材在处方中所占的比例小(如贵重药、剧毒药)专属性特征出现的几率更小；有的粉末粒度过细(如水飞法制得的矿物药粉末)，使特征变得不明显。中药制剂的鉴别显微鉴别24n定义定义 利用物理的、化学的或物理化学的方法物

8、理的、化学的或物理化学的方法对制剂中所含的化学成分进行定性鉴别定性鉴别，从而判断制剂的真伪。中药制剂的鉴别理化鉴别n方法方法化学反应法、显微化学法 、光谱法 、色谱法、色谱法、指纹图谱鉴别法、特征图谱鉴别法25n 化学反应法 中药制剂的鉴别中药制剂化学中药制剂化学成分的性质成分的性质+合适的提取溶剂合适的提取溶剂提取待检测成分提取待检测成分排除其他成分干扰排除其他成分干扰理化鉴别26n 化学反应法注意事项注意事项 1.避免附加成分的干扰：如注射剂、颗粒剂及糖浆剂2.慎重使用专属性不好的分析反应：如泡沫反应、三氯化铁显色反应3.对样品进行分离、精制：除去干扰分析反应的物质，借此改善鉴别方法的专属

9、性4.采用阴性及阳性对照方式，对拟定的鉴别方法进行反复验证：防止出现假阳性 中药制剂的鉴别27n 化学反应法例 中药制剂的鉴别 牛黄解毒片中大黄、黄芩的定性鉴别反应牛黄解毒片中大黄、黄芩的定性鉴别反应取本品取本品6 片片(包衣者除去包衣包衣者除去包衣)，研细，加乙醇，研细，加乙醇1O ml， 温热温热10分钟，过滤，滤液作如下反应分钟，过滤，滤液作如下反应(1) 取滤液取滤液5ml，加镁粉少量与盐酸，加镁粉少量与盐酸0.5ml，加热，即，加热，即显红色。显红色。(2) 另取滤液另取滤液4ml，加氢氧化钠试液，即显红色，再，加氢氧化钠试液，即显红色，再加加30%过氧化氢溶液，加热，红色不消失，加

10、酸或酸过氧化氢溶液，加热，红色不消失，加酸或酸性时，则红色变为黄色。性时，则红色变为黄色。28z定义定义：将具有升华性质的成分，在一定的温度下从制剂中分离出来，并以升华物所具有的某些理化性质作为制剂鉴定的依据。z制剂中若有2种以上的药味都含有升华物，升华升华的温度的温度不同，可控制加热的温度分段收集升华物，分别进行鉴定。中药制剂的鉴别n升华法 理化鉴别29中药制剂的鉴别n光谱法 荧光法可见紫外分光光度法红外分光光度法理化鉴别30n光谱法荧光法 有些中药材中含有能产生荧光的化学成分：在可见光 or 紫外光照射下发出荧光，有的须经试剂处理后发出荧光。含有这类药材的中药制剂:荧光法鉴别操作方法:取制

11、剂的提取液点在滤纸上或试纸上，置紫外光灯下(365nm or 254nm)观察，有时则是加一定的试剂后再进行观察。中药制剂的鉴别理化鉴别31n光谱法紫外可见分光光度法 中药材有些化学成分在紫外可见光区有选择性吸收，显示特征吸收光谱。不同的药材所含的成分不同，在一定条件下吸收光谱的特征可用于鉴别药材，因此该法也可用于中药制剂的鉴别。中药制剂的鉴别理化鉴别32n光谱法紫外可见分光光度法 中药制剂成分复杂，具吸收的加和性，样品不纯化，所得光谱为混合光谱，专属性差。 样品纯化后测定吸收光谱，常见方法： 1.规定吸收波长法 2.对照品对比法 3.规定吸收波长和吸收度法 4.规定吸收波长和吸收度比值法 5

12、.多溶剂光谱法中药制剂的鉴别理化鉴别33n1.规定吸收波长法：规定吸收波长法：样品经适当处理后，测定吸收光谱，在一定波长处有最大吸收。 中药制剂的鉴别复方丹参片紫外光谱图复方丹参片紫外光谱图 283nm理化鉴别n2.对照品对比法：对照品对比法：取对照品或对照药材及供试品经处理后，制成对照品及供试品溶液，分别测定吸收光谱，比较二者吸收光谱的一致性。 样品与对照品在样品与对照品在2802nm处皆有最大吸收，处皆有最大吸收，在在2544nm处皆有最小吸收。处皆有最小吸收。 例：大山馇丸的紫外光谱鉴定例：大山馇丸的紫外光谱鉴定34n3.规定吸收波长和吸收度法规定吸收波长和吸收度法：样品经处理后，在规定

13、波长下，应有若干个吸收峰，并有相应的吸收度值。 中药制剂的鉴别n4.规定吸收波长和吸收度比值法规定吸收波长和吸收度比值法：样品在一定波长下应产生相应的吸收峰，并且吸收度与对照峰吸收度比值应在一定的范围内。需有对照品或参照物。 理化鉴别35n光谱法红外分光光度法对于中药材的真伪鉴别及掺杂检查可提供有价值的信息。 主要成分的质和量大致相同，而且基本恒定，所得红外光谱也呈现很好的相似性，可重复，因而可作真伪鉴别依据：1. 不太复杂的混合体系，图谱有特征性 2. 统一分离提取方法，图谱特征强重复性好 中药制剂的鉴别理化鉴别36例1：熊胆、牛胆、猪胆的红外图谱比较 中药制剂的鉴别在特征区和指纹区三者则有

14、明显的差别在特征区和指纹区三者则有明显的差别理化鉴别37n色谱法 纸色谱纸色谱 TLC法法 GC法法 HPLC法法 中药制剂的鉴别理化鉴别38n色谱法纸色谱法 载体：纸 固定相：纸上所含水分或其他物质 展开剂 供试品、对照品、对照药材 中药制剂的鉴别理化鉴别39n色谱法TLC法中药制剂的鉴别理化鉴别l定义：定义： 将适宜的吸附剂或载体涂布于玻璃板、塑料或铝基片上，成一均匀薄层。待点样、展开后，与适宜的对照物按同法在同板上所得的色谱图对比，并可用薄层扫描仪扫描，用于中药制剂的鉴定。40中药制剂的鉴别理化鉴别 供试品溶液的制备供试品溶液的制备 薄层板的制备薄层板的制备 点样点样 展开展开 显色与检

15、视显色与检视 l操作步骤操作步骤41n色谱法TLC法 中药制剂的鉴别理化鉴别 单一溶剂萃取法单一溶剂萃取法：采用单一溶剂萃取出样品中待采用单一溶剂萃取出样品中待测成分，舍弃其他成分测成分，舍弃其他成分 分段萃取法分段萃取法 液液萃取法液液萃取法 固液萃取法固液萃取法l供试品溶液的制备：供试品溶液的制备：42中药制剂的鉴别理化鉴别lTLCTLC法使用的材料：法使用的材料： 薄层板 涂布器 点样器材 层析缸 显色与检测仪器n色谱法TLC法 43中药制剂的鉴别理化鉴别 手工自制板：手工自制板： 玻璃：玻璃：12mm优质平板玻璃优质平板玻璃 洗净至不挂水珠，晾干洗净至不挂水珠，晾干 吸附剂或载体吸附剂

16、或载体 预制板：预制板：普通薄层板和高效薄层板普通薄层板和高效薄层板lTLC法使用的材料薄层板薄层板44中药制剂的鉴别理化鉴别市售薄层板：市售薄层板：临用前，临用前，110110活化活化30min30min 聚酰胺薄膜不用活化聚酰胺薄膜不用活化 自制薄层板自制薄层板 1份份固定相固定相+3份份水（水（or含粘合剂的水溶液），在研钵中向同含粘合剂的水溶液），在研钵中向同一方向研磨混匀，驱除气泡，铺板（一方向研磨混匀，驱除气泡，铺板（0.20.3mm)。置水平台。置水平台上室温晾干，上室温晾干，110 活化活化30min，置有干燥剂的干燥箱中备用。，置有干燥剂的干燥箱中备用。使用前检验均匀度、麻点

17、、气泡、有无污染使用前检验均匀度、麻点、气泡、有无污染l操作方法薄层板的制备45中药制剂的鉴别理化鉴别手工、半自动、全自动；固定厚度或可调节厚度手工、半自动、全自动；固定厚度或可调节厚度lTLC法使用的材料涂布器定量点样毛细管：定量点样毛细管：0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、10l 微量注射器（针尖平头）微量注射器（针尖平头） 半自动、自动点样器半自动、自动点样器lTLC法使用的材料点样器材46中药制剂的鉴别理化鉴别注意：点样时勿注意：点样时勿损伤薄层表面损伤薄层表面l操作方法点样（1 1）器具：毛细管、微量注射器）器具：毛细管、微量注射器（2 2）点样方法：垂直方向，成圆点状

18、）点样方法：垂直方向，成圆点状( (斑点直径斑点直径3 3 mm)ormm)or窄细的条带状（增大上样量）窄细的条带状（增大上样量）1cm1cm1cm10cm47中药制剂的鉴别理化鉴别 展开剂的制备：新鲜配制展开剂的制备：新鲜配制 展开：点样后的薄层板放入加有展开剂的层析缸展开：点样后的薄层板放入加有展开剂的层析缸中，密闭，一般上行展开，中，密闭，一般上行展开，薄层板浸入展开剂深度薄层板浸入展开剂深度一般要求溶剂最初的前沿距原点约一般要求溶剂最初的前沿距原点约5mm5mm，展开至规定展开至规定展距后立即将薄层板取出，晾干，以备检测。展距后立即将薄层板取出，晾干，以备检测。 展距：展距：一般一般

19、8 815cm15cm，高效板，高效板5 58cm8cml操作方法展开48中药制剂的鉴别理化鉴别lTLC法使用的材料显色与检测仪器 49中药制剂的鉴别理化鉴别照相照相扫描图谱扫描图谱描画描画l记录与保存记录与保存50中药制剂的鉴别理化鉴别1.样品的预处理及供试液的制备样品的预处理及供试液的制备2.薄层色谱的点样技术薄层色谱的点样技术3.吸附剂的活性与相对湿度的影响吸附剂的活性与相对湿度的影响4.空气温度、湿度的影响空气温度、湿度的影响n色谱法TLC法l主要影响因素主要影响因素51中药制剂的鉴别理化鉴别1. 样品的预处理及供试液的制备：样品的预处理及供试液的制备： 制备样品供试液的溶剂要求制备样

20、品供试液的溶剂要求:溶解度不宜太大，粘度不易溶解度不宜太大，粘度不易太高（如正丁醇）太高（如正丁醇）or太低（如乙醚），沸点适中太低（如乙醚），沸点适中 供试液净化处理相当重要供试液净化处理相当重要 2. 薄层色谱的点样技术：薄层色谱的点样技术： 点样量不宜过大，最好控制在点样量不宜过大，最好控制在10l以下以下 不要破坏薄层板不要破坏薄层板52中药制剂的鉴别理化鉴别3.吸附剂的活性与相对湿度的影响吸附剂的活性与相对湿度的影响 吸附剂的活性取决于吸附剂的活性取决于实验室环境实验室环境的相对湿度。控制展开的相对湿度。控制展开时的相对湿度：时的相对湿度： 在双槽展开箱的一侧用一定浓度的在双槽展开箱的一侧用一定浓度的硫酸溶液硫酸溶液，密闭放置，密闭放置一定时间，再加入展开剂于另一侧展开一定时间