实验四 维生素B12注射液检验(吸收系数法和标准曲线法)实验五 药用辅料苯甲酸钠的质量分析

1、掌握维生素掌握维生素B12注射液的紫外分光光度法鉴注射液的紫外分光光度法鉴别及含量测定别及含量测定 掌握吸收系数法定量测定的计算公式。掌握吸收系数法定量测定的计算公式。 一、实验目的一、实验目的实验八实验八 维生素维生素B12注射液检验注射液检验 二、实验内容二、实验内容（一）鉴别（一）鉴别 2 2方法：方法： 取针剂一支取针剂一支（规格（规格0.5mg/mL)25.00mL，得，得20gmL-1 水水测测A278 ，A361， A550（以蒸馏水为空白）（以蒸馏水为空白）计算计算A361/ A278， A361/ A550 1 1原理：原理： 维生素维生素B12分子结构中有共轭体系，具有紫分

2、子结构中有共轭体系，具有紫外吸收，故可采用紫外分光光度法鉴别。外吸收，故可采用紫外分光光度法鉴别。 药典规定：药典规定：A361/ A278 = 1.701.88， A361/ A550 = 3.153.45 。 二、实验内容二、实验内容（二）含量测定（二）含量测定 1 1吸光系数法：吸光系数法： 测得测得A361 ，E11cm=207 C、标示量标示量%稀释倍数标示量标示量标示量实测100C100CEACA=E11cm L C 25 2 2标准曲线法：标准曲线法： （1 1）配制标准系列：）配制标准系列： 分别量取分别量取0.1 mgmL-1VB12标液标液1.0、2.0、3.0、4.0 m

3、L于于水水10.00mL（2）测）测A361（以蒸馏水为空白）（以蒸馏水为空白）稀释倍数标示量标示量供标示量实测100CCCC（3）制作标准曲线，求）制作标准曲线，求C供供AC (mg/mL)A供供C供供 掌握苯甲酸类药物三氯化铁鉴别反应的实验掌握苯甲酸类药物三氯化铁鉴别反应的实验原理。原理。掌握双相滴定法测定苯甲酸钠含量的基本原掌握双相滴定法测定苯甲酸钠含量的基本原理。理。掌握双相滴定法的基本操作和实验技巧。掌握双相滴定法的基本操作和实验技巧。 一、实验目的一、实验目的实验五实验五 药用辅料苯甲酸钠的质量分析药用辅料苯甲酸钠的质量分析 二、实验内容二、实验内容（一）鉴别（一）鉴别 (2) (

4、2)方法：方法： 1与与FeCl3反应反应 苯甲酸的碱性或中性溶液可与三氯化铁苯甲酸的碱性或中性溶液可与三氯化铁反应，生成反应，生成赭色赭色的碱式苯甲酸铁盐沉淀。的碱式苯甲酸铁盐沉淀。 (1) (1)原理原理: : 0.5g本品本品 （约半勺（约半勺)10mL水水赭色赭色滴加滴加FeCl3白色白色（苯甲酸）（苯甲酸）HCl 2分解产物反应分解产物反应 (1) (1)原理原理: : 苯甲酸盐加热分解，生成苯甲酸升华物。苯甲酸盐加热分解，生成苯甲酸升华物。 (2) (2)方法方法： 0.5g本品本品 （约半勺（约半勺)浓浓H2SO4滴加滴加白色白色（苯甲酸）（苯甲酸） 并试管内壁凝并试管内壁凝结白

5、色升华物结白色升华物干燥干燥二、实验内容二、实验内容（二）含量测定（二）含量测定 1 1原理：原理： Kb=1.6110-10 10-8COONa采用采用双相滴定法双相滴定法： 在水相中加入与水不相混溶的有机溶剂乙醚，在水相中加入与水不相混溶的有机溶剂乙醚，置于分液漏斗中进行滴定，则滴定过程产生的苯置于分液漏斗中进行滴定，则滴定过程产生的苯甲酸不断萃取入乙醚层中，减少苯甲酸在水中的甲酸不断萃取入乙醚层中，减少苯甲酸在水中的浓度，使滴定反应进行完全，终点清晰。浓度，使滴定反应进行完全，终点清晰。 COONa+ HClCOOH+ NaCl 不能直接用不能直接用HCl准确滴定准确滴定,且滴定产物为苯

6、甲酸且滴定产物为苯甲酸,不溶于水，影响终点观察。不溶于水，影响终点观察。二、实验内容二、实验内容（二）含量测定（二）含量测定 2 2方法：方法： 0.1molmL-1 HCl约约0.3g样品样品滴定滴定水层显橙红色水层显橙红色15mL水水30mL乙醚乙醚12d甲基橙甲基橙 乙醚层乙醚层 5mL水洗涤，洗涤液并入一下水层水洗涤，洗涤液并入一下水层 水层水层 0.1molmL-1 HCl 20mL乙醚乙醚滴定滴定水层显持续水层显持续橙红色橙红色二、实验内容二、实验内容（二）含量测定（二）含量测定 3 3含量计算：含量计算： T：滴定度：滴定度 14.41 mg/mL %100VF%WT含量HClHClCFC定实际规 1 mL盐酸滴定液（盐酸滴定液（0.1 molL-1）相当于）相当于14.41 mg C7H5NaO2。 F：HCl浓度校正因子浓度校正因子 药典规定含量药典规定含量99.0% F：0.9825 实验二、实验二、特殊杂质检查特殊杂质检查实验十、实验十、气相色谱法测定藿香正气气相色谱法测定藿香正气 水中乙醇的含量水中乙醇的含量三、下次实验三、下次实验 为什么终点颜色是橙红色？而不是橙色？为