徒手切片法2013

1、基础生物学技术（基础生物学技术（2013）植物学部分）植物学部分 实验大纲实验大纲l实验一实验一 植物细胞及细胞内容物的形态结构观察（涂片法）l实验二实验二 植物组织及叶的解剖结构观察（徒手切片法）l实验三实验三 植物根和茎形态结构的解剖与观察（徒手切片法）l实验四实验四 植物花粉形态和气孔器构造的观察（整体封片法）l实验五实验五 花的形态和结构实验一、植物细胞及细胞内容物的形实验一、植物细胞及细胞内容物的形态结构观察（涂片法）态结构观察（涂片法）（一）石细胞形态结构观察（一）石细胞形态结构观察l取梨肉一小块，置载玻片上用镊子压碎，0.1%番红染液染色，盖上盖玻片。 5分钟后，置显微镜下观察。

2、l注意石细胞的形态特征、纹孔的特点。番红是从藏红花柱头中提取的一种天然染色剂，为橙红色粉末。是植物组织学实验中最常用的染色剂之一。可溶解于水和乙醇。通常配成1%水溶液染植物的木质部，也可以按照以下配方配成苯胺番红液对组织进行块染：番红5g，95%乙醇50mL，苯胺20mL，蒸馏水450mL。番红能够对植物的木质化、栓质化和胶质化部分进行染色，染色后的部分为红色。染色时间一般为224hrs，常与固绿等进行合作染色。（二）淀粉粒观察（二）淀粉粒观察l在马铃薯切口刮取少量白色浆液，蒸馏水装片。置显微镜下观察（光线调暗）。注意淀粉粒的形态特征：卵圆形或椭圆形颗粒，有脐、偏心轮纹。l然后在盖玻片的一侧滴

3、一滴碘碘化钾，调亮视野，观察淀粉粒颜色的变化（原因是什么）。实验二实验二 植物组织及叶的解剖结构观察植物组织及叶的解剖结构观察（徒手切片法）（徒手切片法）（一）徒手切片法（一）徒手切片法特点特点l不需要机械设备，能保持活体的情况。主要用在组织化学、生药鉴定、石蜡切片选材等。 方法要领方法要领l切片最要紧是平而薄，无需切成完整的。例如茎的横切面，无须切成整圆形，只需一角就足够了。 步骤步骤一般用左手的大拇指、食指和中指这三个手指拿住材料，使材料突出在指尖上面，使刀片不会割伤它们。用右手拿刀片。两只手应该可以自由活动，不要使它们靠紧身体，或压在桌子上。刀片刀口放在切面上，从刀片刀口下方起，斜向后拉

4、切，切时要用臂力，不用腕力。不必太用力，否则就不易切薄。步骤步骤连续切几片后，取下切片，转移到载玻片上的一滴水中，放在低倍显微镜下检查。假如切片充分透明，细胞重叠不明显，就可使用。否则得重切。过于柔嫩的植物器官，如叶片，难以直接拿住，可以用坚固而易切的材料夹后再切，如胡萝卜片。作临时观察的话，直接用水或甘油封片就行。如果要更清楚地显示细胞结构及其化学成分，则可以进一步染色。 （二）叶片的解剖结构观察（二）叶片的解剖结构观察l（1）切片操作）切片操作将夹竹桃叶片切成长和宽约将夹竹桃叶片切成长和宽约1厘米小片厘米小片;把材料夹在两片各长把材料夹在两片各长2厘米、宽厘米、宽1厘米和厚厘米和厚0.3厘

5、米的胡萝卜片间，厘米的胡萝卜片间，作横切。作横切。l（2）染色和观察）染色和观察用镊子选取薄而均匀的切片，置载片上；用镊子选取薄而均匀的切片，置载片上；（用吸水纸吸取水液，加一滴0.01%亚甲蓝水溶液染色5分钟；95%乙醇洗涤后）加一滴甘油，再加盖片；）加一滴甘油，再加盖片；在显微镜下观察。在显微镜下观察。l注意观察夹竹桃叶的一般结构（如两面叶，叶肉组织有栅栏组织和注意观察夹竹桃叶的一般结构（如两面叶，叶肉组织有栅栏组织和海绵组织之分；复表皮等）及其特有的气孔窝；同时注意不同组织海绵组织之分；复表皮等）及其特有的气孔窝；同时注意不同组织在叶片中的位置及承担的功能。在叶片中的位置及承担的功能。 （三）厚角组织的观察（芹菜叶柄）（三）厚角组织的观察（芹菜叶柄）l（1）切片操作）切片操作取新鲜的芹菜叶柄，作横切。取新鲜的芹菜叶柄，作横切。l（2）染色和观察）染色和观察用镊子选取薄而均匀的切片，置载片上；用镊子选取薄而均匀的切片，置载片上；用吸水纸吸取水液，加一滴用吸水纸吸取水液，加一滴0.01%亚甲蓝水溶液染色亚甲蓝水溶液染色5分分