毕业论文(设计)答辩PPT

1、欢迎各位老师和同欢迎各位老师和同学参加我的毕业论学参加我的毕业论文作品答辩文作品答辩壳寡糖对番茄灰霉病菌抑制作用的研究 指导教师 顾丽嫱老师 姓 名 李红晓 学 号 091200141065 主要内容 番茄灰霉病是由灰葡萄孢菌番茄灰霉病是由灰葡萄孢菌( Botrytis Cinerea ( Botrytis Cinerea Pers) Pers) 侵染引起的病害侵染引起的病害, , 主要为害果实和叶片主要为害果实和叶片, , 引起引起果实腐烂，近年来，该病的发生日趋严重果实腐烂，近年来，该病的发生日趋严重, , 已成为保已成为保护地番茄生产上最严重的病害之一。护地番茄生产上最严重的病害之一。

2、为了有效的控制番茄灰霉病菌引起的病害，本试为了有效的控制番茄灰霉病菌引起的病害，本试验研究了壳寡糖对番茄灰霉病菌的抑制作用，分别测验研究了壳寡糖对番茄灰霉病菌的抑制作用，分别测量在不同浓度梯度下处理的灰霉病菌的菌落直径、菌量在不同浓度梯度下处理的灰霉病菌的菌落直径、菌丝形态、产孢量、孢子萌发率和菌丝电导率丝形态、产孢量、孢子萌发率和菌丝电导率5 5项指标，项指标，然后向喷施相应壳寡糖溶液的叶片上接种菌饼，计算然后向喷施相应壳寡糖溶液的叶片上接种菌饼，计算叶片的病情指数和诱抗效果。叶片的病情指数和诱抗效果。1 材料与方法 1.1试验材料 番茄品种：巨丰番茄（唐山市农业科学研究院科技开发中心） 壳

3、寡糖：分子量3000，脱乙酰度（DD）为85%（浙江澳兴科技生物有限公司）1.2材料培养 选取饱满一致的番茄种子，用蒸馏水冲洗干净。在培养皿内试纸上28温箱催芽，每天用清水沾湿试纸，防止干燥，45d后挑选发芽一致的种子播种于塑料盆（基质为V(沙土)V(蛭石) = 32）中，入土1cm,每盆播种12颗，普通温室内培养，待幼苗长至4-5片复叶时，作处理。2 实验方法2.1 壳寡糖对番茄灰霉病菌菌丝生长抑制率和产孢量影响的测定 制备含壳寡糖浓度为300、600、900、1200、1500mg/L的含药平板，用打孔法反接5mm的灰霉菌菌饼。22培养箱培养，每天测量菌落直径，记录数据，待对照组菌落长满整

4、个培养皿为止，计算菌丝生长抑制率。 然后12h/12h光暗交替条件下继续培养产孢，计算产孢量。2.2 壳寡糖对番茄灰霉病菌孢子萌发率影响的测定 灰霉病菌培养9-10d后使其产孢，加无菌水稀释至40下每视野20-30个，用凹玻片加不同浓度的壳寡糖24黑暗培养24h后，计算孢子萌发率。 孢子萌发率=萌发孢子数/视野下总孢子数100%2.3 壳寡糖对番茄灰霉病菌菌丝形态影响的观察 在PDA平板上反接灰霉病菌2d后在菌落边缘加0.2mL的不同浓度的壳寡糖溶液后竖插盖玻片，对照组加等量无菌水，待菌丝长到盖玻片上取出直接观察菌丝形态进行比较。2.4 壳寡糖对番茄灰霉病菌菌丝电导率影响的测定 在生长7d后的

5、平板上收集菌丝，称取0.1g，加入20ml 无菌水加各浓度梯度的药液分别于0、 30 、60 、90、 120、 150 、180、 210 min 测电导率，最后沸水10min。 相对渗透率=（CtC0）/（CkC0）100% Ct为处理一定时间的电导率 Ck为杀死处理后的电导率 C0为起始电导率2.5 壳寡糖对番茄幼苗抗灰霉病的诱抗效果研究 在处理前24h和12h对处理番茄幼苗叶面喷施两次不同浓度的壳寡糖溶液，叶面、叶背均匀喷洒，使溶液附于叶面但不下滴，对照组用等量蒸馏水喷施。然后选取每株幼苗的第2、3片复叶的顶端叶片接种直径为5mm的菌饼，每组选5棵，共10组重复，试验期间室内温度最低9

6、，最高26，平均18。保湿处理，14d后计算各处理病情指数和抗诱效果。 病情指数 = (各级病叶片数 相对级数值)/（调查总叶片数 最高级别数） 100% 诱抗效果 = (对照病情指数 - 处理病情指数) /对照病情指数 100 %3 结果与分析3.1 壳寡糖对番茄灰霉病菌生长的抑制作用由图中可以看出，与对照组相比，不同浓度梯度的处理对灰霉病菌都有一定的抑制作用，浓度越大时间越长抑制作用越大，300mg/L抑制率比对照组高33.12%，1500mg/L的处理在第5d高出66.6%。3.2 壳寡糖对番茄灰霉病菌孢子产生及萌发的抑制作用处理浓度处理浓度（mg/Lmg/L）孢子产量孢子产量（4 4*

7、 *106106）产孢抑制率产孢抑制率（% %）孢子萌发孢子萌发量量(%)(%)孢子萌发抑制孢子萌发抑制率率(%)(%)0 013.6013.6074.0074.003003009.009.0033.8033.8060.4060.4018.4018.406006006.806.8050.0050.0056.5056.5023.6023.609009004.604.6066.2066.2052.7052.7028.8028.80120012003.603.6073.0573.0544.6044.6039.7039.70150015002.202.2083.8083.8036.8036.8050.

8、3050.301500mg/L的条件下与对照组相比，产孢量减少5.36*107个，抑制率高达83.80%。孢子萌发量减少37.20%，孢子萌发率达到了50.30%。3.3壳寡糖对番茄灰霉病菌的菌丝形态的影响观察壳寡糖对番茄灰霉病菌的菌丝形态的影响观察 经过显微照相可以明显看出，对照组菌丝细长、细胞壁光滑，而加有不同浓度梯度的壳寡糖溶液的处理组菌丝则出现不同程度的肿胀、菌丝变粗、结节增多、分支增多的现象900mg/L对照3.4 壳寡糖对番茄灰霉病菌菌丝电导率影响的测定测定 对于相同的时间间隔内，随着壳寡糖浓度的增加，电对于相同的时间间隔内，随着壳寡糖浓度的增加，电导率呈现出增加的趋势，最小的电导

9、率为导率呈现出增加的趋势，最小的电导率为624624s ，处理，处理组最大电导率达到组最大电导率达到962962s，比对照组高，比对照组高350350s。叶片病斑的病情指数随着处理浓度的递增而降低，1500mg/L的处理组病情指数最低，比对照组低52，抗诱效果最大，比对照组高出61.9%，最小浓度的抗诱效果也达到了14.3%。3.5 壳寡糖对番茄幼苗病情指数及抗诱效果的测定处理浓度（处理浓度（mg/Lmg/L） 病情指数病情指数抗诱效果（抗诱效果（% %）对照对照84848.397*30030072726.0134*14.3014.30600600585810.3251*31.0031.009

10、0090054546.092*35.7035.701200120034343.8194*59.5059.501500150032321.5497*61.9061.90 壳寡糖具有有效的抗菌活性、良好的生物相容性、无毒性和可生物降解等特性，壳聚糖低聚体具有最大的抗菌效果，而且其抗菌活性随着分子量的下降而增强。一方面由于壳低聚糖的多聚阳离子特性，易于病原菌细胞表面带负离子的集团作用而改变细胞膜的结构和功能，从而抑制病原菌的生长；另一方面壳低聚糖可在病原菌的细胞壁表面堆积，阻止营养物质通过细胞壁进入细胞，使病原菌的代谢受到抑制。 4 4 结论结论 本试验从壳寡糖对灰霉病菌的菌丝生长、产孢、孢子萌发、菌丝形态及电导率5个指标分析其对灰霉病菌的影响，得出了壳寡糖确实能抑制番茄灰霉病菌的生长、产孢及孢子的萌发，同时菌丝体发生明显畸形的现象，电导率的增加表明壳寡糖导致了菌体细胞内含物