利巴韦林注射液的细菌内毒素检查

1、利巴韦林注射液的细菌内毒素检查一、试剂和样品：蠻试剂（批号：0508031, 灵敏度：0. 25eu/ml湛江i専康海洋生物有限公司生 产）细菌内毒素工作标准品（内毒素工作标准品2005-6, 100eu/支，中国约品生物 制品检定所提供）利巴韦林注射液（规格：100mg/ml,批号：050302生产厂家：广东南国药业有 限公司）二、灵敏度复核：2-1、标准品的准备取细菌内毒索工作标准品一支，轻弹瓶壁，使粉末落入瓶底，然后用砂轮在 瓶颈上部轻轻划痕，用75%酒精棉球擦拭后启开，启开过程应防止玻璃屑落入瓶内。 根据蛍试剂灵敏度的标示值（025eu/ml）,将细菌内毒素工作标准品2005-6用细

2、菌内毒素检查用水ind溶解，在旋涡混合器上混匀15分钟，然后通过稀释制备成 0. 50eu/ml. 0. 25eu/ml> 0. 125eu/ml 和 0. 06eu/ml 四个浓度的内毒素标准溶液， 每稀释一步均应在旋涡混合器上混匀30秒钟。得 10 eu/ml；得 l oeu/ml；得 0.50eu/ml；得 0,25eu/ml；得 0.125eu/ml； 、取51细菌内毒素检查用水溶解工作标准晶，得1 ooeu/ml； 、取第步溶液0. 2m 1+细菌内毒素检查用水1.8 ml, 、取第步溶液0. 2ml+细菌内毒素检查用水1.8 ml, 、取第步溶液l.omr细菌内毒素检查用水1

3、.0 ml, 、取第步溶液1. 0ml. +细菌内毒索检查用水1.0 ml, 、取第步溶液1.0ml +细菌内毒素检查用水1.0 ml,、取第步溶液ml+细菌内毒素检查用水ml,得eu/ml；、取第步溶液011+细菌内毒素检查用水ml,得eu/ml；、取第步溶液ml+细菌内毒索检查用水ml,得eu/ml；2-2、待复核蛍试剂的准备、取第步溶液0. 5ml+细菌内毒素检查用水0. 5 ml,得 0.06eu/ml；取规格为0. 1ml/支的蛍试剂18支，放在试管架上，排成5列，其中4列4支, 1列2支。轻弹瓶壁使粉末落入瓶底，用75%酒精棉球擦拭后启开备用，防止玻璃 屑落入瓶内。每支加入0. l

4、nil检查用水溶解，轻轻转动瓶壁，使内容物充分溶解。2-4、加样4 支 4 列每列分别加入 0. 1ml 的 0. 5eu/ml> 0. 25eu/ml、0. 125eu/ml 和 0. 06eu/ml的内毒索标准溶液，另2支加入0. 1ml的检查用水作为阴性对照。加样 结束后，将蛍试剂用医用胶布封口，轻轻振动混匀，连同试管架放入37°c水浴或 适宜恒温器中，试管架保持水平状态，保温60分钟。2-5.结果记录及计算方法内毒索浓度0. 50.250. 1250. 06c反应终点平1行2管3数4xc=lg-1(ex/4)二 lg_1(lg + lg + lg + lg )/4)二e

5、u/ml三、样品常规检查1、限值l=0. 15eu/mg （中国药典 2005 版）。2、计算ivdmvd=cl/ 入=100x0. 15h-0. 25=603、供试品溶液的制备将样品利巴韦林注射液稀释到30倍和60倍备用。 、取原溶液0. 2ml+细菌内毒素检查用水1. 8 ml,得10倍; 、取第步溶液0. 5ml+细菌内毒素检查用水1.0ml,得型倍； 、取第步溶液1. 0ml+细菌内毒素检查用水1.0ml,得阻倍；4、蛍试剂的准备取规格为0. 1ml/支的蛍试剂8支，放在试管架上，排成4列，每列2支。轻 弹瓶壁使粉末落入瓶底，用75%酒精棉球擦拭后启开备用，防止玻璃屑落入瓶内。 每支加入0. lnil检查用水溶解，轻轻转动瓶壁，使内容物充分溶解。4、操作加样4-1.样品阳性对照：（做2管）取利巴韦林注射液的30倍稀释液和浓度为1. oeu/ml的内毒素稀释液各0. 3ml混 合均匀,取该混合液0. bnl加入已经复溶好的蛍试剂（x =0. 25eu/ml）中即可。4-2、阳性对照:（做2管）取0. lml浓度为0. 5eu/ml的内毒素稀释液加入已经复溶好的蛍试剂（入二0. 25eu/ml） 中即可。4-3、样品检查：（做2管）取利巴韦林注射液的60倍稀释液加入已经复溶好的崔试剂（入二025eu/nil）中即