BD流式细胞仪

1、 34DNA 56.6.7.7.8HLA-B278.9AIDS.9/10. 10- BDFACSCalibur.11.1215BD公司全球及中国业务介绍BD公司流式细胞仪培训计划BD公司推荐配置单BD公司仪器与其他厂家仪器比较表简介流式细胞仪FlowCytometry FCM DNARNA FCM肿瘤学、血液学、免疫学、药理学、遗传学及临床检验学等，在各学科领域发挥着重要的作用。（二）原理待测样本的细胞悬液，在鞘液的包围和约束下，细胞排成单列高速由流动室喷嘴喷出，形成细胞液柱。当液柱通过检测区，在入射的激光束照射下产生前向散射光（ FSC）和侧向散射光（ SSC），它们分别反映细胞大小和颗粒度

2、，根据这些特性可以将细胞分类。经一种或几种特殊荧光标记的样本，在激光束的激发下所产生的特定荧光，可被光学系统检测并输送到计算机进行分析，得到细胞相应的各种特性。（三）流式细胞仪检测的细胞特性细胞结构组成细胞功能大小细胞表面、胞浆、核特异性抗原粒度细胞活性DNA、 RNA含量胞内细胞因子蛋白质含量激素结合位点钙离子、 pH 值、膜电位酶活性二、流式细胞仪的临床检验项目目前在国内最常见的临床应用有两大类：一为肿瘤细胞的DNA含量析；另一为细胞表面的表型测定，包括淋巴细胞亚型分析、免疫功能监测、白血病和淋巴瘤免疫分型、残余白血病检测、以及 HLA-B27组织抗原检测等等。1、淋巴细胞亚群分析淋巴细胞

3、亚群分析可以通过相对计数、绝对计数与率的变化监控疾病状态下的免疫状况（如肿瘤、感染性疾病、免疫性疾病等），以此辅助诊断、追踪病情发展及决定用药时机。检测原理：利用各种单克隆抗体与淋巴细胞表面的抗原结合，再配合多色荧光染料，即可以把各种不同功能的淋巴亚群区分开来，进而得到各亚群的相对比例。最常检测的亚群包括 T 细胞（ CD3）、 B 细胞（ CD19）、 NK细胞（ CD16+56）、辅助性 T 细胞（ CD3+CD4+）和抑制性 T 细胞（ CD3+CD8+）等。应用实例：Si mul SET 系统利用 CD14/ CD45 设门技术精确检测淋巴细胞亚群比例 。* 其中绿色细胞群体为淋巴细胞

4、，红色为单核细胞，蓝色为粒细胞。2、DNA分析肿瘤细胞的 DNA倍体分析是流式技术另一重要应用，临床上可对一些恶性肿瘤进行早期诊断，跟踪随访和早期治疗，大大提高一些肿瘤的治愈率和生存率。检测原理：正常人体细胞的 DNA含量是二倍体，细胞群体具有特定的增殖比例。通过检测细胞的 DNA含量和增殖比例，可以了解细胞群体的倍体性和增殖能力。具体操作时，先将实体组织制备成单细胞悬液，用固定或去污剂在细胞膜上打孔，使 DNA特异的荧光染料如 PI （碘化丙啶）导入细胞核， PI 和DNA缄基对特异结合后上机检测 PI 的荧光强度，并进行数据分析。应用实例：乳腺癌病人的手术标本分析图。* 其中红色群体为二倍

5、体，黄色群体为异倍体。3、白血病和淋巴瘤免疫分型正常白细胞在其分化过程中，随着系列的不同、成熟阶段的差异，会在细胞膜表面表达不同的分化抗原。白血病细胞则在癌变的过程中，丧失了正常细胞底系列专一性和分化阶段规律性，在本质上有别于正常骨髓细胞。应用此特点可进行免疫表型分析，以鉴别各种白血病和淋巴瘤，辅助临床诊断、评估疗效和预后。常用的抗原包括： CD3、CD5、CD7、CD19、CD20、CD22、CD10、HLA-DR、CD13、CD14、CD33、CD34、GLY-A、 MPO等等。应用实例：利用 CD45三色分析急性髓性白血病。* 左图为正常骨髓，绿色为正常淋巴细胞，深红为单核细胞，玫瑰红为

6、成熟粒细胞，浅蓝为有核红细胞，深蓝为未成熟细胞；右图为急性髓性白血病图形，可见与正常明显的差别。4、残余白血病检测残余白血病是指经过适当的治疗、疾病缓解后仍残留在病人血中的极少量白血病细胞。通常白血病病人经过化疗后的疾病复发率为 60-80%，经过自体或异体骨髓移植后的复发率仍偏高（ 20-50%）。所以如果能早期检测到复发的迹象，即白血病细胞的再增生，则可以提前给予病人及时恰当的治疗。依照不同的白血病，选用不同的抗体组合（如下表）来检测残余白血病。流式细胞术可在一万个骨髓细胞中检测到一个白血病细胞；尤其是 TdT 的应用大大提高了检测灵敏度。白血病种类可选择的抗体组合T-ALLcytoCD3

7、/TdTB-ALLCD13/TdT， CD33/TdTPre-B-ALLcyto /TdTAMLCD13/TdT， CD33/TdT，CD7/TdT5、网织红细胞分析网织红细胞计数是骨髓红细胞造血功能的重要指标。传统手工计数耗时耗力，缺乏准确性。流式细胞仪网织红细胞计数系统由于采用系统试剂与全自动软件，可在短时内分析大量细胞，低水平网织红细胞也可达到统计分析精度，省时省力，结果正确可靠。* 左图中红色群体为红细胞，右图利用RNA染料噻唑橙（ TO）区分成熟红细胞和网织红细胞。6、造血干祖细胞检测在治疗恶性血液病时，大剂量化疗或放疗摧毁有病的骨髓后，干细胞移植保证了健康的干祖细胞重建骨髓，产生正

8、常的血细胞，实体肿瘤病人亦可通过干细胞移植抗衡大剂量化疗导致的致死性血液毒性。与大剂量化疗相配合的干细胞移植已在临床大大提高了某些肿瘤病人的长期存活率，如乳腺癌、儿童神经母细胞瘤、卵巢癌等。另外，干细胞移植与再生障碍想贫血、免疫缺隐、血红蛋白病等非恶性造血系统疾病治疗的相关性也正在研究中。* 上图中红色群体是经过多参数设门后精确设定的CD34阳性细胞群体，绿色部分是进行定量计数的标准微球。7、血小板疾病及活化血小板检测通过血小板膜糖蛋白的检测可以诊断先天性或获得性血小板疾病如 Bernard-Soulier 合征（ CD42b-42a），血小板无力症（ CD41-CD61），免疫性血小板减少等

9、等。综评价血小板活化程度的应用领域包括：缺血性冠状动脉疾病如心绞痛、心肌梗死、血管成形术、心肺旁路术等；缺血性脑血管病如脑梗塞、TIA、脑动脉硬化等；糖尿病；恶性肿瘤；高血压病；高脂蛋白血症；高粘滞血症；抗血小板药物机制研究与疗效监测；吸烟；情绪性应急等。应用实例： CD61/CD62P/PAC-1三色标记分析血小板活化。8、HLA-B27检测由流行病学统计结果显示， HLA-B27基因型阳性的人患数个遗传性免疫疾病的机率，比一般人要高很多，以强直性脊柱炎为例，约为 87 倍。因此 HLA-B27检测可以有效帮助临床鉴别诊断强直性脊柱炎等血清阴性骨关节疾病。其他相关性疾病有：遗传性关节炎如 R

10、eiter s综合征 ,反应性关节炎，肠性关节炎等。检测时选用 CD3/HLA-B27双标记抗体，圈定 T 淋巴细胞亚群，再分析其细胞表面是否表现 HLA-B27组织抗原。因为 T 细胞表面只表达 Class 型 HLA抗原，可避免 Class 型HLA抗原引起的误差。应用此法无需分离细胞，比传统的微量细胞毒实验节约时间，且检测结果更敏感、客观、容易判读。9、器官移植的配型及免疫状态监控以流式细胞仪进行器官移植前配对（ FlowCytometryCrossMatch ，FCCM）的优势在于抗体检测的特异性、敏感度以及检测结果和手术成功率之相关一致性。利用多参数测定，可了解受者血中是否有抗供者抗

11、体，此抗体与供者的哪种白细胞反应，以及该抗体是否会造成细胞毒性。移植前的评估包括 HLA配型及混合淋巴细胞反应，移植后的评估包括外周血淋巴细胞亚群测定、抗供者抗体检测等等。移植后定期检查外周血淋巴细胞亚群，可以预估排异反应，以及病毒感染等问题。10、AIDS 诊断及治疗监控由于特定细胞群体的绝对计数在临床诊断与治疗上具有极大意义，如 CD4+细胞绝对计数可辅助 HIV 监控治疗，也可通过定量标准微球得到亚群的绝对数值。应用实例：检测艾滋病人血中辅助T 细胞和抑制 T 细胞的比例及绝对数。三、流式细胞仪的临床 / 医学研究流式细胞仪应用的灵活性允许临床医生科学家们充分发挥想象，满足他们的临床研究

12、需要：细胞免疫功能、细胞凋亡、胞内细胞因子、胞内 Ca2+及 PH值、多药耐药性、寄生虫、细菌、病毒、环境科学等等。流式细胞仪多参数分析配合细胞分选，可以提供样本的更多有效信息。细胞分选是确认细胞形态、进行后续分子生物学研究 ( 如 FISH、PCR等) 或细胞功能性研究的理想手段。四、流式细胞技术应用的发展及国内现况从 1930 年， Caspersson 和 Thorell 以细胞的计数开始，试图寻找研究细胞的新工具，到 1973 年， BD公司与美国斯坦福大学合作，研制开发并生产了世界第一台商用流式细胞仪FACSI，流式细胞术进入了一个空前飞速发展的时代。进入九十年代，流式细胞术作为一门

13、生物检测技术已经日臻完善，仪器的硬件平台也已达到稳定的技术状态，科学家们、仪器制造商们又纷纷将研究焦点转向荧光染料的开发、单克隆抗体技术、细胞的制备方法和提高电子信号的处理能力上来，以拓展日趋广泛的应用领域。流式细胞技术的强大生命力植根于生物学、医学的各个领域，正是无数日新月异、变化多样的应用项目在全球范围内推动了流式细胞技术的发展。自 1981 年，北京师范大学生物系引进中国第一台流式细胞仪（FACS， BDIS）至今，各种型号的流式细胞仪在国内安装使用已超过300 台，其中 BD公司的流式细胞仪近230 台（ FACSCalibur 已超过 140 台，详见附录 2“BD公司国内流式细胞仪

14、用户名单”）。从仪器引入中国二十年的发展历史来看，最早的流式细胞仪大都应用在纯科研领域。随着流式技术的发展，方法学的成熟，尤其是越来越多的用于临床的试剂推出，流式细胞仪已成为国内各大教学医院和医学中心重要的诊断工具，被广泛地应用于新的临床实验上。五、建议流式细胞仪之机型 -BD公司 FACSCalibur：FDA通过的世界唯一全自动四色台式分选机FACSCalibur 集分析和分选功能为一身，配置灵活，结合自动化的样本处理系统、极宽的试剂选择范围、强大的计算机和软件系统，绝对配合今天高效多能的实验室需要。 FACSCalibur 性能卓越，不仅通过其用户友好的整体设计帮助临床医生快速实现常规免

15、疫表型、 DNA、网织红细胞、血小板、绝对计数等临床分析，FACSCalibur 更以其完美的四色分析和独特的分选功能成为遗传、肿瘤、血液、免疫功能等诸多研究不可或缺的重要工具。（一）、 FACSCalibur 仪器主要特点? 完美的四色分析系统BD专利的立体空间激发系统采用双激光实现4 色分析，最大程度地减少荧光信号之间的补偿，提高检测灵敏度；双激光的应用大大扩展了染料的选择范围，相应地扩大了仪器的应用领域。立体空间激发系统为流式细胞仪多色分析设立了行业标准，并使染料的选择更为自由，避免了染料之间的相互干扰。? 独特的分选及浓缩系统FACSCalibur 是世界上目前唯一的台式分选机。FAC

16、SCalibur 采用不同于传统分选方式的“捕获管（catchtuber ）”新技术，使整个分选操作极其简便，无需长时间液流稳定，只需设定感兴趣的细胞群体，鼠标轻轻一按就能实现对目标细胞的分选。细胞可分选到试管中，或根据需要直接分选到细胞浓缩系统提供的滤膜或培养皿上。FACSCalibur 分选为全封闭系统，安全性好，可实现无菌分选和细胞培养。细胞浓缩系统使细胞回收简单方便，减少离心步骤，大大提高细胞回收率。? 自动化程度高FACSCalibur 以用户为中心的系统设计，从自动化样本处理、自动上样，到按钮式液流控制、自动化软件获取和分析，每个环节操作都保证简便快捷 , 并提供准确客观的实验结果

17、，重复性极好。? 分析速度快FACSCalibur 荧光检测全部采用大型流式细胞仪国际通用的光电倍增管以保证最快的分析速度 10000 个细胞 / 秒，避免了使用 -导致的低速度。 FACSCalibur 是目前世界上分析速度最快的台式机。DNA分析的解决之道DDM（DoubletDiscriminationModule）双粘体辨别模式通过 FL2-W和 FL2-A 检测分析区别实体组织标本中的粘连细胞群体，最大程度的减少假阳性，是实体组织标本 DNA分析不可缺少的工具之一。? 唯一的双参数阈值设定最大程度减少无关噪音，增加获取分析速度，从而使含量极微的细胞检测成为可能。? 开机无需等待开机后

18、即可检测样本。机器无噪音。设计灵活，提供多种配置供用户选择第二根激光、分选及其浓缩系统、自动进样系统等都可以由用户根据实际需要和资金情况自由选配。（二）、配套设施1、FACStation 数据处理系统采用最先进的 Macintoshi苹果计算机系统，用户友好MacOS界面设计，易学易操作；与 PC兼容性好，数据可在 PC机上分析；网络功能强大，可与 Internet 和 Intranet 连接；不易感染病毒超强图形处理功能，可进行多维多色分析，是处理流式数据最佳的选择。最新配置 MacintoshG4：512MRAM；80GBHardDisk；CD-RW，容量大 , 为回顾性研究带来方便；多媒

19、体系统；17高分辨率纯平显示器FACStation 提供多种功能强大的自动化软件用于数据获取、分析和报告。并提供多媒体学习光盘 。主软件 CellQUEST具有完成所有流式实验的仪器设置、数据获取和统计分析等功能，设计灵活全面，是流式细胞仪系统不可缺少的全能工具。全面配合各种临床检验的自动化软件系统包括：FACSComp 自动校准仪器设置进行质量控制，自动设置流式双色、三色、四色分析条件，并可选择进行样本设置条件的优化。自动存储仪器条件。 SimulSET 双色淋巴细胞自动化分析： CD45/CD14自动淋巴细胞精确设门与分析；软件内一致性检测作为内在质控；可自行定义抗体组合，灵活方便；自动打

20、印标准化实验室报告、医生报告和总结报告。MultiSET三色与四色淋巴细胞自动化分析：提供 CD45/SSC 淋巴细胞门的手动与自动设置与分析；应用 Attractor 技术自动检查细胞群体位置漂移；客户可自定义试剂与抗体组合；绝对值定量简单快速准确；自动打印标准化实验室报告、医生报告和总结报告。ProCOUNT造血干祖细胞自动化分析软件；使用ProCOUNT试剂自动获取分析造血干细胞；与 TroCOUNT管组合实现绝对计数；操作简单，快速；降低CD34计数的变异；自动打印标准化实验室报告、医生报告和总结报告。HLA-B27自动分析软件；自动获取分析报告全血HLA-B27结果：支持 HLA-B

21、27系统试剂；应用 FACSLoader组合可实现自动获取批量分析；配合FACSComp软件进行自动校正；自动打印标准化实验室报告。ModFIT高精度 DNA自动分析软件：快速正确DNA分析；强大的批量分析功能；便捷的数据库输出；自动打印标准化实验室报告。Attractor多色自动快速批量分析软件：独家专利全自动设门技术可快速准确圈定客户自定义的目的细胞群；最小群体标色算法便于分辨小群体ReticCOUNT 网织红细胞计数自动化软件：自动设门分析报告网织红细胞计数，检测重复性好，低水平网织红细胞也可达到可靠的统计精度。QuantiCALC标准荧光定量分析：分析获取 QuantiBRITE 试剂

22、或微球的资料时， FL2 轴自动转化为每个细胞上抗体数（ ABC ）自动进行荧光定量；无限的条带设置充分满足对所有感兴趣细胞群体的研究；强大的数据库满足长期研究与大型科研工作需求Paint-a-gate相互作用多维资料分析软件：独家专利混色算法可同时分辨与显示多个细胞群体；强大的上色工具为研究复杂资料间相互关系提供帮助。2、全面的配套试剂BD公司提供通过 FDA标准的体外诊断临床试剂和广泛的科研试剂，并拥有全面的质量控制和质量保证产品线以确保检测结果的可靠性：包括仪器状态、实验方法全程控制、绝对计数控制以及试剂配套中一致性检测等，如：CaliBRITE 微球配合全自动软件 FACSComp可自

23、动进行仪器的灵敏度、补偿等校正，确保仪器正常运行。其设置条件还可用于淋巴细胞分析。 BDMulti-Check 全血质控试剂全程监控免疫表型分析检测结果的准确性。BDMulti-CheckCD4LOW为艾滋病检测提供标准。 BDStemCountControl 为 CD34阳性细胞检测质控物，监控CD34造血干细胞检测结果。TruCOUNTControl可确保绝对计数的线性精度。DNAQC保证DNA分析的线性与分辨率均达到最佳。（详见试剂报价单）另外， PMG、TL、Clontech 等 BD子公司的涵盖细胞生物和分子生物各领域的试剂供应将满足您多方位的需求。（详见附录 2BD公司全球及中国业

24、务介绍）。3、样本制备仪免疫样本制备仪BDFACSSampleProcessSP-采1用免洗程序，为细胞免疫表型分析提供自动化样本处理，简单易学，安全性好。DNA样本制备仪BD公司的 Medimachine 系统是一套安全的，标准化的样本制备系统，可对植物或动物的实体组织进行自动机械分离，为流式分析、细胞培养、或DNA扩增技术提供高质量的样本，是对各种类型的组织实现标准化的样本处理的最佳选择。4、售后服务BD公司深知每一台仪器正常运转的重要性，所以每一台 FACSCalibur、每一个软件和每一个试剂背后都有着最及时、最专业的支持。BD总部率先建立了流式行业第一个在线远程诊断系统，用户通过互联

25、网和 BD总部进行实时的网上交流， BD技术支持专家在自己的计算机上看到用户的问题并迅速提出评估和解决方案。在中国， BD建立了专业资深、经验丰富的工程师队伍和技术支持队伍，为用户提供仪器安装调试、维修保养、技术培训和咨询等服务。另外来自 BD、PMG、CLONTECH、 TransductionLaboratory 等总部科学家们的不遗余力的技术支持也是我们的有力后援。BDFACS品牌流式细胞仪在中国的二十年发展，拥有由一大批国内知名专家、教授组成的用户群体，他们也成为了 BD流式技术在中国推广、发展的主要动力。BD公司每年召开的用户大会，论文交流和新技术介绍讲座，以及定期出版的 FlowC

26、ytometry 专业技术杂志保证了用户及时了解最新的技术进展和相互交流。（三） FACSCalibur 仪器主要技术参数：参数项目参数指标标准激光器15mw， 488nm气冷氩离子激光。* 第二激光器用于 3 色荧光分析635nm半导体激光实现完美四色分析厂家保证激光管寿命 5000 个小时光斑大小22X66umLaser113X66umLaser2功能特点通过双激光立体空间激发方式实现四色荧光分析：即第一激光器激发的三色荧光与第二激光器激发的第四色荧光之间不会互相干扰，最大限度地减少了荧光信号的重叠（各吸收峰相差55nm以上）；增加了荧光染料的可选择范围可选荧光染料： FITC、 PE、P

27、erCP*、 PI 、APC、CY-5、AO等流动室430umX180um测量参数FSC，SSC，FL1， FL2，FL3,FL4* 光电倍增管光谱检测范围 300nm-1100nm电压较小，灵敏度大电压 150V-990V最小检测颗粒02um（min）大小50um（max）检测灵敏度100MESF检测分辨率CV<2%（全峰宽）* 样本获取速>10，000 个/ 秒（标准）度* 脉冲处理系BD专利，能同时分析峰值、脉用脉冲宽度和面积可区分双连体细胞统冲积分（面积）及脉冲宽度（如假四倍体细胞），减少假阳性结果* 分选装置300 个/ 秒目前唯一可做细胞分选的台式流式细胞仪，操作简单，

28、无须长时间稳定液流。分选纯度达 99.99%，全封闭液流系统实现无菌分选。* 工作站MacintoshG4/733苹果电脑具有超强的图形处理功能；FACStation256MRAM100MBZip外存盘，体积小，容量40GBHardDisk大，为回顾性研究带来方便；CD-RW多媒体系统；100MBZipDrive不易感染病毒MacOS9.1与 PC机的兼容性的解决之道：免费具有网络功能，能与普通微机下载的 WINMDI2.6在 PC上轻松分析连网苹果获取的数据。* 软件系统主软件：主软件 CellQuest 是在视窗平台下开CellQuest发，集获取，分析和分选为一体，主多种全自动软件：要特

29、点：FACSComp1.多窗口Modifit2.具有实时分析（ online ）功能Attractors3.自动软件方便临床试验，保证 1SimulSET分钟之内出报告MultiSETHLA-B27ProCOUNTPaint-A-GATERetiCOUNTQuantiBRITE（可选）CBA（可选）直方图和点图1024 和 256channel坐标分辨率1024X1024channel256X256channeL* 进样口与检15cm距离短，所需样本量少，节约单抗；测点距离距离短，减少了样本之间的相互干扰* 自动清洗系B-D 专利换样时自动吸去管道内剩余样本，避统免样本之间的相互干扰* 鞘液一

30、般生理盐水或双蒸水降低了实验成本滤光片可更换可根据实验者采用的标记荧光素的不同发射光波长选用合适的光学滤片全程质控FACSCalibur 获得 FDA认证CaliBRITEBeads 仪器校正标准品BD试剂为 FDA认证的 IVD 诊断FACSComp全自动仪器校正软件试剂Multi-Check 人淋巴细胞表面抗原质BD的全自动仪器校正软件控品FACSComp及配套质控品标准微StemcellControl 造血干细胞质控品球能够自动校正仪器，调整试验RetiCOUNTControl 网织红细胞质控条件品BD提供全带有内在质控的一系LeuCOUNTPLTControl列自动软件LeuCOUNT

31、RBCControlBD的全程质控品均或 FDA认证LeuCOUNTComboControl自动进样系统Autoloader（选配）Autoloader自动进样系统：40 管轮样本制备仪具有两种型号的样本制备仪（选配）盘，简单易操作，自动混匀进样，每个样品可按不同预设程式自动获取分析，真正实现无人看守，全自动实现不同项目检测。SP-1 用于表面抗原标记，全自动处理，与 BD自动软件配合，是质量的保证；Medimachine 处理实体组织和肿瘤样本，可得到高质量的细胞悬液，用于分析抗原表达，倍体及增殖指数。BD公司全球和中国业务介绍（一）BD公司全球业务BD公司成立于 1897 年，总部设于美国

32、的新泽西州。一百多年来，BD公司已发展成为机构遍布全世界九十多个国家和地区、全球雇员近二万名的跨国公司，由最初发明世界上第一支塑料注射器的家族式企业发展为纽约交易所的上市公司，由产品单一发展成为业务涵盖皮下注射、血液采集、微生物产品、流式细胞仪等诸多领域世界着名的医疗技术综合公司，并且多次荣幸地跻身于美国财富杂志五百强之列。在产品质量方面， BD公司上市的所有产品均符合或高于同行业最高质量要求并获得ISO 及 CE质量认证。在 1998 年度公司全球销售额为31 亿美元 , 用于研究开发新产品方面资金为2.18 亿美元。BD公司主要产品为：1、BD生物科学系统（ BDBiosciences ，

33、 BDB）BDB是 BD公司的高科技部分，致力于为生命科学的基础研究和临床应用提供全方位强有力的支持和帮助。 BDB由以下世界着名的品牌组成：BDImmunocytometrySystems（BDIS）PharMingen（PMG）TransductionLaboratories（TL）BDLabwareBDMicrobiologySystems （BDMS）BiometricImaging（BMI）Clontech. 。作为流式技术领域的先锋企业，BDIS的使命是通过采用划时代的技术为科学发展提供有诊断意义的解决方案和工具来扩展我们的全球领导地位。目前 BD品牌的流式细胞仪占全球同类产品总量

34、的 70%，占美国总量的 80%,为肿瘤、白血病、爱滋病及其它免疫系统疾病的诊断作出了积极的贡献。BD公司提供的流式细胞仪包括:? FACSCalibur: 世界上唯一的自动化四色台式分析和分选机 . 。提供自动进样系统、分选浓缩系统、自动免疫样本制备仪和 DNA样本制备仪等选配功能。常规应用包括免疫表型分析、 DNA分析、多色分析等，可广泛应用于临床和科研。? FACSVantageSE：具有最佳分析灵活性和高速度分选功能，可通过 Autosort 进行自动化分选。除常规应用外，还可进行高分辨率的染色体分析。BD公司同时提供 FDA批准的体外诊断试剂和研究试剂。通过最优良流式仪器、系统化软件

35、以及试剂的完美配合， BD公司力争在科研和临床，尤其在肿瘤和免疫系统疾病的控制（如 HIV）方面竭尽所长。BD公司始终遵循用户至上，多方位满足用户的需要。几年来 BD公司不断壮大，PharMingen、ClonTECH、 TransductionLaboratories 等高科技公司的加盟无疑进一步巩固了 BD公司在细胞生物和分子生物多学科领域的绝对领先地位。PMG建立在涵盖免疫学、细胞生物学、神经科学、分子生物学 / 蛋白质表达系统、蛋白质化学等多学科多样化的技术基础上，提供 3000 多种具领先技术的高质量产品，并继续在细胞因子、信号传导、凋亡、细胞周期调控、神经科学等战略性领域开发最新产

36、品。具体分类如下 ：1. 抗体：? CDAntigensandCellSurfaceMolecles? AdhesionMolecules? Cytokines,ChemokinesandCytokineReceptors? NoAzide/LowEndotoxin(NE/LE)ProductsforFunctionalStudies? TumorSuppressor/Onco-Proteins? SignalTransductionProteins? CellCycleRelatedProteins? Apoptosis-AssociatedProteins? TranscriptionFa

37、ctors? Neuroscience? 2ndStepReagents? IsotypeControls2. 分子生物学产品：? BDBaculoGoldBaculovirusKits,VectorsandExpressionSystems? GST/6xHisPurificationandExpressionSystems? BDBioColorsGreenFluorescentProteinExpressionVectors? BDRiboQuantRibonucleaseProtectionAssaySystems? LuciferaseAssay&DetectionSyste

38、m? DNADamage&Repair? CustomMolecularBiologyProducts3. 重组蛋白质：? SignalTransductionProteins? CytokinesAndChemokines? CellCycleProteinsBDTransductionLaboratories 正是迅速发展的信号传导研究领域提供高质量的单克隆抗体。成立于 1993 年， 1998 年成为 BD的有机组成， BDTL已经从最初的 25 个产品成长为超过 700 个产品的专业公司。产品包括：? Phosphorylation&Dephosphorylation?

39、 NitricOxide? CalciumSignaling? Apoptosis? CellCycle? GeneRegulation? CellBiology? CancerRessearch? Neuroscience? Immunology? GTPases&RegulatorsBDLabware作为 BDB的一员，以多种多样的高质量试剂、培养基及其添加物、生物活性细胞外基质等产品为防止和治愈疾病作出贡献。 BDL产品包括：? BDFalcon: 实验室塑料用品的首选，包括细胞培养、液体操作及其他生命科学应用；?BDBioCoatCellEnviroments:全面提供细胞培养

40、用品及细胞外生物活性基质；?CollaborativeBiomedicalProducts:高质量细胞培养试剂和培养基添加物的革新者和创造者。Clontech是功能性基因时代的科学家最忠实最有力的支持者。成立于1984年 ,CLONTECH一直以迅猛的速度增长 CLONTECH的使命始终是通过提供先锋性的工具辅助科学家们提出超越从前的新问题和新观点 , 最终加速科学发现的过程 . 基于强大的计划， CLONTECH发明了一些划时代的研究技术 , 如 GFP-based(greenfluorescentprotein)reporters,用于研究蛋白质相互作用的two-hybridanalysi

41、ssystems,用于表达差异分析的genearraytechnology等等 . 所有这些产品都以其质量和革新性极大地促进了分子生物研究的进展.CLONTECH主要的强项在于 :PCR&PCR-basedtechnologies;cDNAtechnologies;geneanalysis;expressionsystemsincludingretroviralexpression;twohybridtechnologies;reportersystems;apoptosisdetection;andnucleicacidchemistry.2、感染性疾病诊断系统 (Infectiou

42、sDiseaseDiagnostics)：3、临床标本采集系统 (SampleCollection)4、注射器产品系列 (InjectionSystem)5、糖尿病及运动保健系统(DiabeticHealthCare)6、静脉输液系统 (InfusionTherapy)在新技术日新月异的今天， BD公司在不断创新，追求产品品质卓越的同时也十分重视中国用户的需求，力争把适合中国市场的一流的产品及服务提供给中国用户。在当今医疗行业相互联合、兼并以增强竞争力的今天， BD公司以其强大的竞争优势相继收购了Ohmeda、Difico 、 Pharmingen、 Boin 等多家公司，使公司的经营规模、市

43、场份额及综合竞争能力有了飞跃性的发展，再次为世界同行所瞩目。（二） BD公司在中国1994 年 BD公司进入中国以来，发展迅猛，已在全国设立北京、上海、广州、哈尔滨等九个代表处，并在苏州兴建了合资厂。展望下一个百年， BD公司提出了“ Tohelpallpeoplelivehealthylives”（令全人类享有健康生活），力争在全中国、全世界有更好的表现。BD公司流式细胞仪培训计划为了使贵院技术人员和临床医生能够迅速掌握流式细胞仪的应用，早日收回投资成本，我们特意制定这份计划书，以供贵院作为采购之参考。一 技术培训技术培训的目的是让技术人员迅速掌握标本处理、上机操作和结果分析等操作技术。装机

44、后技术培训 （名额不限）时间：仪器安装调试完毕后一周内，为期一周。地点：医院实验室对象：操作仪器的技术员内容：1、 流式细胞仪基本原理及结构2、 开机、关机程序及软件使用；3、 自动、手动仪器校正及补偿调节；4、 DNA标本处理及测定；5、 免疫标本处理及测定；6、 仪器维护与保养。技术提高培训 ：（名额不限）时间：仪器使用半年后，根据医院需要决定具体时间地点：医院实验室对象：技术人员内容：1、 白血病分型；2、 微小残留病变检测；3、 PNH诊断；4、 血小板活化测定 ;5、 CD34检测；6、 HLA-B27检测。7、 细胞内细胞因子检测8、 细胞凋亡检测二应用培训应用培训的目的是让临床医

45、生尽快掌握流式细胞仪在临床上的应用，将流式检测项目应用到自己的临床诊断、鉴别诊断和治疗监测中，迅速提高全院的流式应用水平，同时让医院早日收回投资成本。全院讲座时间：装机培训结束后一周内，半天时间地点：医院安排对象：全院临床医生内容：流式细胞仪临床应用及进展血液科讲座时间：由医院和科室安排地点：由医院和科室安排对象：血液科临床医生内容：1、 白血病免疫分型2、 白血病和淋巴瘤诊断3、 血小板表面糖蛋白检测与血小板疾病诊断4、 白血病淋巴瘤治疗过程中免疫状态的监测5、 如何阅读流式细胞仪化验报告单肿瘤科讲座时间：由医院和科室安排地点：由医院和科室安排对象：肿瘤科、外科、放化疗科临床医生内容：1、

46、流式细胞仪在肿瘤诊断、病理分级及预后中的应用2、 放化疗过程中免疫状态监测3、 细胞凋亡检测4、 多药耐药检测5、 肿瘤体外药敏测定免疫相关科室根据医院要求安排内容：1、 细胞免疫功能测定与免疫性疾病诊断2、 免疫细胞活化检测3、 细胞内细胞因子检测4、 CD4计数与爱滋病诊断其它科室根据医院要求安排时间与内容（如血小板活化等）三维修培训维修培训的目的是让医院的维修工程师掌握一定的流式细胞仪维修技术。时间：仪器安装调试时地点：医院实验室对象：医院内部负责仪器维修的工程师内容：1、 仪器原理介绍2、 易损件（过滤器）的更换（1-2 年换一次）3、 常见故障排除四其它可以考虑的科研课题为了让流式细

47、胞仪更好地发挥科研带动临床的作用，我们抛砖引玉，提供下列可以于近期考虑的课题，供临床科室参考。1、 放化疗过程中免疫细胞活化研究2、 钙离子阻断剂预防多药耐药研究3、 化疗药物诱导肿瘤细胞表达P-170 比例及水平定量研究BD公司推荐配置单 :1 激光器配置 :15mw488nm氩离子激光器 , 寿命 >5000 小时3mw635nm红色激光器 , 寿命 >5000 小时双激光配置可以增加很多使用染料, 仪器所受限制少 , 可以根据所用染料来选取开关激光2 散射光及荧光探头数 :前向角散射光及侧向角散射光探头各一个荧光探头 4 个3 荧光检测灵敏度 <100MESF,此数字越

48、小越好4CV<2%(全峰宽 )5 脉冲检测器 : 能同时检测每个脉冲信号的高度、面积和宽度, 有效区分粘连的正常细胞和DNA含量改变的细胞6 全套软件，软件能够免费升级7 专用数据处理器，以市场最新型号为准8 仪器有硬件升级空间，如：一体化分选装置 , 药物筛选系统， CBA检测系统等BD公司与其他仪器比较表序项目名称BDFACSCaliburCOULTERXL号1美国市场占有80%20%率2中国市场占有65%30%率3激光器配置双激光：单激光：488nm15mw 气冷式488nm15mw 气氩离子激光和冷式氩离子激635nm 红色二极管光激光4最多检测荧光4 色4 色参数100MESF 800MESF荧光灵敏度说明美国一流大学几乎全部为BD公司产品还有一小部分为其他厂家荧光参数的增多使得荧光素之间的补偿问题成为一个极大的隐患，而 BD 公司双激光激发 4 色的巧妙构思将荧光素的补偿在空间和时间的安排下降低到最小，极大地增加5 可选用的荧光 488nm 激光激发：488nm 激光激素FITC、 PE、 发： FITC 、PerCP、PE-CY5、 PE、