用正交设计法优化黄连提取工艺探究

1、用正交设计法优化黄连提取工艺探究【摘要】目的：比较渗漉法、浸渍法、超声波法对黄连中 小漿碱的提出率，优选最佳的提取工艺。方法：采用正交试 验方法，用0.5%硫酸作溶媒，按3因素3水平进行l9(34) 正交试验，以紫外分光光度法测定盐酸小樂碱含量作为考察 指标。结果：影响小漿碱提出率的主要因素是提取方法。结 论：从黄连中提取盐酸小漿碱的最佳工艺为：a2b3c1,即用 黄连粗粉，12倍溶媒量，渗漉法提取。【关键词】黄连；正交试验；超声波；提取；渗漉法； 浸渍法【中图分类号】r931.71【文献标识码】a【文章编号】 1007-8517(2009)12-0014-02黄连为毛食科植物黄连(copti

2、s chinensis franch.) 的干燥根茎。神农本草经列为上品。性寒，味苦，具有 清热燥湿，泻火解毒之功效1,具有抗病原微生物、抗腹 泻、抗炎和免疫促进以及降血压、抗心律失常、降血糖等药 理作用，用于急性肠胃炎、口舌生疮、烧烫伤、心率失常、 高血压、糖尿病等疾病的治疗。黄连中主要有效成分为小糜 碱，为避免黄连中小槳碱在煎煮、浓缩过程中损失，中药复方 制剂中的黄连常单独提取。常用的提取方法有稀硫酸渗漉 法、乙醇回流提取法、超声提取法、连续回流法、煎煮法。 笔者以分光光度法测定盐酸小槃碱含量为指标2,采用正 交设计法，以0.5%硫酸溶液作为提取溶媒，考察影响小漿碱 提出率的因素，筛选黄连

3、的最佳提取工艺条件。1仪器与试药电子天平（德国赛多利斯制造），752紫外光栅分光光度 计（上海第三分析仪器厂制造，9802003）, cq-20-36型超声 波清洗器（上海市弘兴超声电子仪器有限公司制造）；盐酸 小漿碱对照品（中国药品生物制品检定所）；黄连（购自佛山 市中药饮片厂，批号:20080911,产地：四川。）2方法与结果2. 1标准曲线的绘制精密称取盐酸小漿碱化学对照品 4mg,用水溶解并移置100ml容量瓶中，定容，得浓度为 40 u g/ml的储备液，备用。精密吸取盐酸小樂碱储备液1. 0、 1.5、2.0、2.5、3.0、3.5、4. 0ml 于 25ml 容量瓶中，用蒸 饱水

4、作空白，在其最大吸收波长处（入max=345nm） 3分别 测得吸收度，结果见表lo用最小二乘法经线性回归，得方 程：c=15. 6074a-0. 125, r =0.9999。结果表明，盐酸小漿 碱在1.66. 4 u g/ml浓度范围内线性关系良好。2. 2样品溶液的制备将黄连粉碎成最粗粉（过10目不能 过20目筛）、粗粉（过20目不能过40目筛）及中粉（过40 目不能过60目筛）。称取上述药材粉末100g,用8倍、10 倍、12倍0.5%硫酸溶液为溶媒，按渗漉法、浸渍法、超声 波法提取。渗漉法装筒24小时后渗漉，按looog药材计算, 渗漉速度设计为每分钟为5ml；超声波法用溶媒浸渍12

5、小时 后用超声波清洗仪超声30分钟，再浸渍12小时，过滤得滤 液。浸渍法浸渍24小时后，过滤得滤液。将上述各液配成 含原药材83. 33mg/ml的溶液，备用。各取上述溶液lml至 25ml量瓶中，加0. 5%硫酸溶液稀释至刻度，再取上述溶液 lml至100ml量瓶中，加0. 5%硫酸溶液稀释至刻度（2500倍）。 摇匀，以0.5%硫酸溶液作空白，在345nm波长处测定9份溶 液的吸收度。选取药材粉碎度（a）、溶媒用量（b）、提取方 法（c）三个试验因素，每个因素取三个水平进行试验。采 用l9 （34）正交试验，正交试验及结果见表2。渗漉法与浸渍法提前装筒，浸泡24小时，再按上法操 作。将各提

6、取液配成含原药材83. 33mg/ml溶液，备用。取 上述溶液各lml,用蒸馆水稀释200倍，摇匀，以蒸馆水作 空白在345nm波长处测定9份溶液的吸收度，计算提出率。3结果与讨论3. 1实验方法本研究采用正交试验对提取黄连的有效 成分进行工艺研究，渗漉法除了提取率髙的优点以外，可以 避免盐酸小槳碱成分受热损失。本文以盐酸小篥碱为评价指 标，通过单因素和正交设计实验，考察药材粉碎度、溶媒用 量、和提取方法等因素对提取效果的影响，确定渗漉法提取 黄连中盐酸小槃碱成分的最佳工艺条件。中草药提取对于 提高中药制剂的内在质量和临床疗效最为重要。渗漉法提取 较为完全，且省去了分离浸出液的时间和操作。3.

7、2实验结果从表5中r值直观分析可知,a、b、c3因 素对提出率的影响大小为c>a>b,即提取方法的影响最大，药 材粉碎度次之，溶媒用量影响最小。从表6的方差分析结果 看，c、a因素对提出率的影响有显著性差异，而b因素对提 出率的影响没有显著性差异，因a2>a3>a1, b3>b2>b1, c1>c3>c2,故应选a2b3c1为盐酸小漿碱提取的最佳方案，即 将黄连加工成粗粉，用8倍量0.5%硫酸溶液为溶媒，渗漉法 提取。参考文献1 国家药典委员会.中华人民共和国药典m.北京：化 学工业出版社,2000:2512 周学勤，王迎春，张耀东，等紫外分光光度法测定 胃康宁片中盐酸小槃碱的含量j.中国医院药学杂志， 2003, 23(10):603-6043 佟少辉，李娜，蔡玉华高效液相色谱法测定