2019年PBS缓冲液的配制方法

1、PBS 缓冲液配方不管是免疫组化，还是细胞培养中，常用到PBS 缓冲液，下面是我们实验室的配方，供大家参考。我们实验室的配方：A 液： L 磷酸二氢钾：磷酸二氢钾（ KH2PO4，），加双蒸水至 100ml。B 液： L 磷酸氢二钠：酸酸氢二钠（，），加双蒸水至 100ml。或者酸酸氢二钠（，），加双蒸水至 100ml。pH A 液 （ml） B 液（ ml）一般免疫组化用PBS 都只包含 Na2HPO4?12H2O（磷酸氢二钠）NaH2PO4?2H2O（磷酸二氢钠） Nacl用于细胞培养的PBS 需含有氯化钾称取 8g NaCl、 KCl 、 Na2HPO4 和 KH2PO4,溶于 800m

2、l 蒸馏水中，用 HCl 调节溶液的 pH 值至，最后加蒸馏水定容至1L 即可PBS 缓冲液称取 NaCl 8g，KCl 0.2g，Na2HPO4?12H2O 3.63g, KH2PO4 0.24g，溶于 900ml 双蒸水中，用盐酸调 pH 值至，加水定容至 1L，常温保存备用。PBS是最普遍不过的实验室缓冲液， 但其配方各异。以下是我的总结：母液的配制：0.2M Na2HPO4：称取 71.6g Na2HPO4-12H2O，溶于 1000ml 水0.2M NaH2PO4：称取 31.2g NaH2PO4-2H2O，溶于 1000ml 水各种浓度 PB(pH=的配制：先配0.2M PB (p

3、H=，100ml)：取19ml L的 NaH2PO4， 81ml L 的 Na2HPO4, 即可。然后 只需将 0.2M PB (pH= 按相应比例适当稀释即可，如：0.1M PB（PH=） ：取 500ml 0.2M PB，加水稀释至 1000ml 即可。0.01M PB （PH=）：取 50ml 0.2M PB，加水稀释至 1000ml 即可。0.02M PB （PH=）：取 100ml M PB，加水稀释至 1000ml 即可。若需要 NaCL 的话，加入 NaCL 至%（g/100ml）即可。另：其它各种另PH 值的 0.2M PB（100ml)配方 ：pH0.2M NaH2PO4（m

4、l）0.2M Na2HPO4（ml）9289010851551494555386233672872237719ml81ml16841387793磷酸盐缓冲液（Phosphate Buffer, PB），磷酸氢二钠和磷酸二氢钠缓冲液配方磷酸盐缓冲液（ Phosphate Buffer, PB）试剂：NaH2PO4· 2H2ONa2HPO4·12H2O配制方法：配制时，常先配制L 的 NaH2PO4 和 L 的 Na2HPO4，两者按一定比例混合即成L 的磷酸盐缓冲液（ PB），根据需要可配制不同浓度的 PB 和 PBS。（ 1）L 的 Na2HPO4；称取 (或 NaH2PO

5、4·H2O 加重蒸水至 1000ml溶解。（ 2）L 的 Na2HPO4：称取 NaHPO4·.12H2O （或 Na2HPO4· 7H2O 或Na2HPO4·2H2O ）加重蒸水至 1000ml 溶解。（ 3） L 的 PB 的配制：取 19ml L 的 NaH2PO4 和 81ml L 的Na2HPO4·12H2O,充分混合即为L 的 PB（pH 约为）。若 pH 偏高或偏低，可通过改变二者的比例来加以调整，室温保存即可。L 磷酸盐缓冲液（）pHL NaH2PO4(ml)L Na2HPO4(ml)关于磷酸缓冲溶液的知识， 我在网上搜索了好多

6、帖子， 但是还是不能确定正确的答案。现在把他们链接过来，希望有高手们参与讨论，我会把最终的正确解答整理出来，提供给大家。PBS 可以为三种溶液的英文缩写，分别是1.磷酸盐缓冲溶液（ phosphate buffered solution）、2.磷酸盐缓冲盐水（ phosphate buffered saline）及3.磷酸盐缓冲钠（ phosphate buffered sodium），其配制方法不同， pH 值不同，发挥的生物学作用亦不完全相同。如无特殊说明，生物学上常用的PBS 是中性磷酸盐缓冲溶液（phosphate buffered solution）。无钙镁离子磷酸缓冲盐水（PBS）

7、（ LPH）NaClKClNa2HPO4（如为 Na2HPO4·12H2O，则为）KH2PO4将上述试剂依次溶于 1 000ml 去离子水中，完全溶解后， 115高压灭菌 10min15min，存在 4冰箱中备用。此液可用于配制和稀释细胞分散剂以及洗涤细胞培养物。我们用的都是第二种问题 1：磷酸盐缓冲盐水（ phosphate buffered sodium），为什么用第三种或第一种呢 :这么多年以来我都以为 PBS 就是磷酸盐缓冲溶液，其他两种说法的英语名称常见到， 不过我一直都以为他们是差不多的东西。 不同的汉语翻译倒是第一次听说。我们公司用的PBS 有很多种，抗体组用的中和PB

8、S 配方就比较简单，没有 K+ 离子，只起到缓冲 PH 的作用； Na2HPO4+ KH2PO4按照不同比例混匀，可以得到不同 PH 的缓冲液，用于不同目的，这个在分子生物学中用得很多； 用于活细胞或者细菌处理的，为了保持渗透压，会加入其他的溶液，最常见的就是 NaCl 和 KCl 调节离子浓度。以上是个人的理解，欢迎批评。 :问题 2：既然抗体组的 PBS 是起到缓冲 PH 的作用，那加入 80G 的 NACL 作用是什么？需要平衡渗透压吗？还有加入K 离子的是不是因为细胞上 NA-K 泵的原因啊，血清里面又没有细胞， 何来 NA-K 泵一说啊？我觉得之所以这么配， 其实就是对血清中缓冲环境的一种模拟罢了，血清里面又没有细胞，何来 NA-K 泵一说啊？ 我没说血清撒。 我们用的又没加 K，我是说加了 K 的的问题 3：不加 NACL 会怎么样啊？多省钱啊在中和磷酸盐缓冲液中， NaCl 的主要作用应当是保持一定的离子浓度，以维持抗体的活性。在离子浓度过高或过低的情况下，蛋白质都会变性，抗体当然不例外。ps:哺乳类需用生理盐水浓度是%