第06章胺类药物的分析

1、一、结构与性质（一）（一）芳伯氨基或潜在芳伯氨基特性芳伯氨基或潜在芳伯氨基特性 具有芳伯氨基具有芳伯氨基或潜在的芳伯氨基，可用重氮化或潜在的芳伯氨基，可用重氮化偶合反应鉴别偶合反应鉴别或亚硝酸钠滴定法测定含量，可与芳醛发生缩合或亚硝酸钠滴定法测定含量，可与芳醛发生缩合反应，易氧化变色。反应，易氧化变色。 （二）（二）水解特性水解特性 酯键或酰胺键易水解酯键或酰胺键易水解（三）（三）弱碱性弱碱性 具脂烃胺侧链，弱碱性，可与生物碱具脂烃胺侧链，弱碱性，可与生物碱沉淀试剂发生沉淀反应进行鉴别或非水碱量法测沉淀试剂发生沉淀反应进行鉴别或非水碱量法测定含量。定含量。（四）（四）溶解性溶解性 游离碱易溶于

2、有机溶剂，其盐可溶于水。游离碱易溶于有机溶剂，其盐可溶于水。（五）（五）酚羟基特性酚羟基特性 对乙酰氨基酚对乙酰氨基酚(fecl(fecl3 3) )。（六）（六）与重金属离子发生沉淀反应与重金属离子发生沉淀反应 盐酸利多卡因和盐盐酸利多卡因和盐酸布比卡因酰氨基上的氮可在水溶液中与铜离子或钴离酸布比卡因酰氨基上的氮可在水溶液中与铜离子或钴离子络合，生成有色的配位化合物沉淀。此沉淀可溶于氯子络合，生成有色的配位化合物沉淀。此沉淀可溶于氯仿等有机溶剂后呈色。仿等有机溶剂后呈色。（七）（七） uv uv （八）（八） irir二、鉴别试验二、鉴别试验 （一）重氮化偶合反应 芳香第一胺类鉴别反应 ar

3、nh2hclnano2重氮盐橙黄猩红色萘酚oh- 直接：盐酸普鲁卡因、苯佐卡因、 间接：对乙酰氨基酚、非那西丁、醋氨苯砜、盐酸普鲁卡因盐酸普鲁卡因 chp（2000）鉴别鉴别 （1）本品显芳香第一胺类的鉴别反应（附录）本品显芳香第一胺类的鉴别反应（附录） 取供试品约取供试品约50mg，加稀盐酸，加稀盐酸1m1，必要时缓缓煮沸使溶解，必要时缓缓煮沸使溶解，放冷，加放冷，加0.1mo1/l亚硝酸钠溶液数滴，滴加碱性亚硝酸钠溶液数滴，滴加碱性-萘酚试液数萘酚试液数滴，视供试品不同，生成由橙黄到猩红色沉淀。滴，视供试品不同，生成由橙黄到猩红色沉淀。 对乙酰氨基酚对乙酰氨基酚 chp（2000）鉴别鉴别

4、 （2）取本品约）取本品约0.1g，加稀盐酸，加稀盐酸5m1，置水浴中加热，置水浴中加热40分分钟，放冷；取钟，放冷；取0.5m1，滴加亚硝酸钠试液，滴加亚硝酸钠试液5滴，摇匀，用水滴，摇匀，用水3ml稀释后，加碱性稀释后，加碱性-萘酚试液萘酚试液2m1，振摇，即显红色。，振摇，即显红色。 对氨基酚对乙酰氨基酚、hcl（乳白色）盐酸丁卡因h2nano（二）三氯化铁反应 对乙酰氨基酚 （三）与重金属离子反应（三）与重金属离子反应 1. 与铜和钴离子反应与铜和钴离子反应 黄色蓝紫色硫酸铜盐酸利多卡因氯仿碳酸钠 亮绿色细小盐酸利多卡因h2cocl 黄色）（盐酸利多卡因、3hno23nohg红色或橙黄

5、色）（对氨基苯甲酸酯类、3hno23nohg2与汞离子的反应与汞离子的反应 （四）水解产物的反应 1. 盐酸普鲁卡因盐酸普鲁卡因 chp（2000）鉴别鉴别 （2）取本品约）取本品约0.1g，加水，加水2ml溶解后，加溶解后，加10氢氧化钠氢氧化钠溶液溶液1ml，即生成白色沉淀；加热，变为油状物；继续加热，即生成白色沉淀；加热，变为油状物；继续加热，产生的蒸气，能使湿润的红色石蕊试纸变为蓝色；热至油状物产生的蒸气，能使湿润的红色石蕊试纸变为蓝色；热至油状物消失后，放冷，加盐酸酸化，即析出白色沉淀。消失后，放冷，加盐酸酸化，即析出白色沉淀。 naoh hcl 盐酸普鲁卡因普鲁卡因 （白色）油状物

6、对氨基苯甲酸钠二乙氨基乙醇（使湿润的红色石蕊试纸变兰色）对氨基苯甲酸钠对氨基苯甲酸（白色）2. 苯佐卡因苯佐卡因 chp（2000）鉴别鉴别 （2）取本品约）取本品约0.1g，加氢氧化钠试液，加氢氧化钠试液5m1，煮沸，即有，煮沸，即有乙醇生成；加碘试液，加热，即生成黄色沉淀，并发生碘仿的乙醇生成；加碘试液，加热，即生成黄色沉淀，并发生碘仿的臭气。臭气。 ）（碘仿臭气，黄色乙醇乙醇苯佐卡因32chinaohinaoh （五）制备衍生物测熔点（五）制备衍生物测熔点1三硝基苯酚衍生物三硝基苯酚衍生物 盐酸利多卡因盐酸利多卡因 chp（2000）鉴别鉴别 取本品取本品0.2g，加水，加水20ml溶解

7、。溶解。（1）取溶液）取溶液10ml，加三硝基苯酚试液，加三硝基苯酚试液10ml，即生成沉淀；滤过，即生成沉淀；滤过，沉淀用水洗涤后，干燥，依法测定（附录沉淀用水洗涤后，干燥，依法测定（附录c），熔点为），熔点为228232，熔融时同时分解。，熔融时同时分解。盐酸布比卡因盐酸布比卡因 chp（2000）2. 硫氰酸盐衍生物硫氰酸盐衍生物 盐酸丁卡因盐酸丁卡因 chp（2000）鉴别鉴别 （1）取本品约）取本品约0.1g，加，加5%醋酸钠溶液醋酸钠溶液10ml溶解后，加溶解后，加25%硫氰酸铵溶液硫氰酸铵溶液1ml，即析出白色结晶；滤过，结晶用水洗涤，即析出白色结晶；滤过，结晶用水洗涤，在在80

8、干燥，依法测定（附录干燥，依法测定（附录c），熔点约为），熔点约为131。 盐酸布比卡因盐酸布比卡因 chp（2000）鉴别鉴别 （2）取本品，精密称定，按干燥品计算，加）取本品，精密称定，按干燥品计算，加0.01mol/l盐酸溶液制成每盐酸溶液制成每1ml中含中含0.40mg的溶液，照分光光度法（附录的溶液，照分光光度法（附录a）测定，在）测定，在263nm与与271nm的波长处有最大吸收；其吸收度的波长处有最大吸收；其吸收度分别为分别为0.530.58与与0.430.48。（六）（六）uv （七）（七）ir 盐酸布比卡因盐酸布比卡因 chp（2000）鉴别鉴别 （3）本品的红外光吸收图谱与

9、对照的图谱（光谱集）本品的红外光吸收图谱与对照的图谱（光谱集324图）一致。图）一致。三、杂质检查（一）对乙酰氨基酚 1. 有关物质 杂质来源 中间体、副产物及分解产物 对氯乙酰苯胺对氯乙酰苯胺 杂质对照品法杂质对照品法 检查方法 tlc 其他杂质其他杂质 参比杂质对照品法参比杂质对照品法 2. 对氨基酚 杂质来源 中间体、水解产物 反应原理 兰色亚硝基铁氰化钠对氨基酚 oh检查方法 对照法 取本品取本品1.0g，加甲醇溶液（，加甲醇溶液（12）20ml溶解后，加碱性亚溶解后，加碱性亚硝基铁氰化钠试液硝基铁氰化钠试液1m1，摇匀，放置，摇匀，放置30min；如显色，与对乙酰；如显色，与对乙酰氨

10、基酚对照品氨基酚对照品1.0g加对氨基酚加对氨基酚50 g用同一方法制成的对照液比用同一方法制成的对照液比较，不得更深（较，不得更深（0.005）。）。 %005. 0%1000 . 11050 %1006供试品量允许杂质存在的最大量l 2. 盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸的检查 检查方法 tlc 杂质对照品法 杂质来源 水解产生 %2 . 1%100105 . 2101030 %1003供试品量允许杂质存在的最大量l（一）亚硝酸钠滴定法（一）亚硝酸钠滴定法 1. 原理原理 具芳伯氨基的药物具芳伯氨基的药物cl-+22+2+arnh2 nano2 hcl arnn nacl h2o四、含量测

11、定四、含量测定 具游离芳伯氨基的药物可用本法直接测定。具潜在芳伯氨基的药物，如具酰胺基药物（对乙酰氨基酚等）经水解，芳香族硝基化合物（如无味氯霉素）经还原，也可用本法测定。 nhcor + h2onh2 + rcoohh+no2 + 6hnh2 + 2h2o2. 主要测定条件主要测定条件（1）加入适量）加入适量kbr加速反应加速反应 kbr为催化剂为催化剂nano2+hclhno2+naclhno2+hclnocl+h2o 在盐酸存在下，重氮化反应的机理为：在盐酸存在下，重氮化反应的机理为： nn+cl-快n n oh快nnoh慢no+cl-nh2ohnobr hbr hno22ohnocl

12、hclhno22（1）k1（2）k2 k1 300 k2 加入加入kbr，可增大被测溶液中，可增大被测溶液中no+的浓度，所以能加快重氮化反应速度的浓度，所以能加快重氮化反应速度（2）酸的种类及其浓度）酸的种类及其浓度在不同酸中重氮化反应的速度为：在不同酸中重氮化反应的速度为：hbrhcl h2so4 hno3芳胺：盐酸芳胺：盐酸 1:2.56； 加入盐酸：加入盐酸： 重氮化反应速度加快；重氮化反应速度加快； 重氮盐在酸性溶液中稳定；重氮盐在酸性溶液中稳定； 防止生成偶氮氨基化合物，而影响测定结果防止生成偶氮氨基化合物，而影响测定结果nn+cl- + h2nnn nh + hcl（3）室温条件

13、下滴定）室温条件下滴定 1030（4）滴定速度：先快后慢）滴定速度：先快后慢 滴定管尖端插入液面下滴定管尖端插入液面下2/3处，滴定液一次大部分处，滴定液一次大部分放下，近终点时方改为慢速滴定放下，近终点时方改为慢速滴定 ,标准溶液在液面下标准溶液在液面下加入，可避免加入，可避免nano2挥发。挥发。3. 指示终点的方法指示终点的方法（1）永停滴定法）永停滴定法 chp（2000）、）、bp（1998）永停滴定法（附录永停滴定法（附录a） 用作重氮化法的终点指示时，调节用作重氮化法的终点指示时，调节r1使加于电极上的使加于电极上的电压约为电压约为50mv。取供试品适量，精密称定，置烧杯中，。取

14、供试品适量，精密称定，置烧杯中，除另有规定外，可加水除另有规定外，可加水40ml与盐酸溶液（与盐酸溶液（12）15ml，而，而后置电磁搅拌器上，搅拌使溶解，再加溴化钾后置电磁搅拌器上，搅拌使溶解，再加溴化钾2g，插入，插入铂铂铂电极后，将滴定管的尖端插入液面下约铂电极后，将滴定管的尖端插入液面下约2/3处，用亚处，用亚硝酸钠滴定液（硝酸钠滴定液（0.1mol/l或或0.05mol/l）迅速滴定，随滴随）迅速滴定，随滴随搅拌，至近终点时，将滴定管的尖端提出液面，用少量水搅拌，至近终点时，将滴定管的尖端提出液面，用少量水淋洗尖端，洗液并入溶液中，继续缓缓滴定，至电流计指淋洗尖端，洗液并入溶液中，继

15、续缓缓滴定，至电流计指针突然偏转，并不再回复，即为滴定终点。针突然偏转，并不再回复，即为滴定终点。（2）外指示剂法）外指示剂法 ki淀粉糊剂或试纸淀粉糊剂或试纸2nano2+2ki+4hcl2no+i2+2kcl+2nacl+2h2o 4. 测定方法测定方法 盐酸普鲁卡因盐酸普鲁卡因 chp（2000） 取本品约取本品约0.6g，精密称定，照永停滴定法（附录，精密称定，照永停滴定法（附录a），在），在1525，用亚硝酸钠滴定液（，用亚硝酸钠滴定液（0.1mol/l）滴定。每）滴定。每1ml亚硝亚硝酸钠滴定液（酸钠滴定液（0.1mol/l）相当于）相当于27.28mg的的c13h20n2o2hc

16、l 阳 极ohno2ehhno2ehhno2ohno2阴 极：（三）紫外分光光度法（三）紫外分光光度法 对乙酰氨基酚在对乙酰氨基酚在0.4氢氧化钠溶液中，于氢氧化钠溶液中，于257nm波长处有最大吸收，其紫外吸收光谱特征，可用于其波长处有最大吸收，其紫外吸收光谱特征，可用于其原料及其制剂的含量测定。原料及其制剂的含量测定。 （二）非水溶液滴定法（二）非水溶液滴定法 脂烃胺侧链，具弱碱性脂烃胺侧链，具弱碱性 对乙酰氨基酚对乙酰氨基酚 chp（2000） 取本品约取本品约40mg，精密称定，置，精密称定，置25ml量瓶中，加量瓶中，加0.4氢氧氢氧化钠溶液化钠溶液50ml溶解后，加水至刻度，摇匀，

17、精密量取溶解后，加水至刻度，摇匀，精密量取5m1，置置100ml量瓶中，加量瓶中，加0.4氢氧化钠溶液氢氧化钠溶液10m1，加水至刻度，加水至刻度，摇匀，在摇匀，在257nm的波长处测定吸收度，按的波长处测定吸收度，按c8h9no2的吸收系的吸收系数数 为为715 计算，即得。计算，即得。%11cme原料药原料药 吸收系数法吸收系数法 %100100%11scmmvnlea百分含量usp（24） 对照法对照法 （六）（六）hplc法法 盐酸普鲁卡因注射液盐酸普鲁卡因注射液 chp（2000）可同时测定盐酸普鲁卡因及其降解产物对氨基苯甲酸可同时测定盐酸普鲁卡因及其降解产物对氨基苯甲酸离子抑制色谱

18、法离子抑制色谱法 内标法定量内标法定量97：137采用亚硝酸钠法测定含量的药物有（ ）a. 苯巴比妥 b. 盐酸丁卡因 c苯佐卡因d. 醋氨苯砜 e. 盐酸去氧肾上腺素 95：85下列药物中不能用亚硝酸钠滴定法测定含量者（ ）a. 乙酰水杨酸 b. 对氨基水杨酸钠c. 对乙酰氨基酚 d. 普鲁卡因e. 苯佐卡因 96：81（99：72）. 亚硝酸钠滴定法中，加kbr的作用是（ ）a. 添加br b. 生成no+br c生成hbrd. 生成br2 e. 抑制反应进行 例1. chp（2000）亚硝酸钠滴定法测定对氨基水杨酸钠的含量时，指示滴定终点的方法为（ ）a. 自身指示终点法 b. 电位法指

19、示终点c. 永停滴定法 d. 氧化还原指示剂法e. 酸碱指示剂法 例2. 盐酸普鲁卡因采用亚硝酸钠滴定法测定含量时的反应条件是（ ）a. 强酸 b. 加入适量溴化钾 c. 室温（1030）下滴定 d. 滴定管尖端深入液面 e. 永停法指示终点 96：127亚硝酸钠滴定法中，可用于指示终点的方法有（ ）a. 自身指示剂法 b. 内指示剂法 c. 永停法d. 外指示剂法 e. 电位法 r1ch ch nh r2oh r3苯乙胺类药物的基本结构苯乙胺类药物的基本结构*第二节 苯乙胺类药物的分析 benzene ethylamines一、结构与性质 1. 脂烃胺基侧链，显弱碱性脂烃胺基侧链，显弱碱性2

20、. 酚羟基，易氧化变色，可发生三氯化铁反应酚羟基，易氧化变色，可发生三氯化铁反应3. 具手性碳原子，具旋光性具手性碳原子，具旋光性4. 溶解性溶解性 游离碱难溶于水，易溶于有机溶剂，其盐游离碱难溶于水，易溶于有机溶剂，其盐可溶于水可溶于水5. uv6. ir7. 取代基：具芳伯氨基的盐酸克仑特罗可用重氮化取代基：具芳伯氨基的盐酸克仑特罗可用重氮化偶合反应鉴别、亚硝酸钠滴定法测定含量。偶合反应鉴别、亚硝酸钠滴定法测定含量。 二、鉴别试验1. 三氯化铁反应三氯化铁反应2. 氧化反应氧化反应3. 与甲醛与甲醛硫酸反应硫酸反应4. uv与与ir 5. 与亚硝基铁氰化钠反应与亚硝基铁氰化钠反应脂肪族伯胺

21、的专属反应脂肪族伯胺的专属反应红紫色丙酮亚硝基铁氰化钠重酒石酸间羟胺 nahco3hochohchch3nh2ch(oh)coohch(oh)cooh三、杂质检查三、杂质检查 杂质来源杂质来源 原料残存原料残存 检查方法检查方法 比较法（含量测定法）比较法（含量测定法） （一）酮体的检查 检查原理检查原理 利用酮体在利用酮体在310nm波长处有最大吸收，而波长处有最大吸收，而药物本身在此波长处几乎没有吸收，规定一定浓度溶药物本身在此波长处几乎没有吸收，规定一定浓度溶液在液在310nm波长处的吸收度限制酮体的量。波长处的吸收度限制酮体的量。 （二）有关物质检查 盐酸去氧肾上腺素、硫酸沙丁胺醇等药

22、物盐酸去氧肾上腺素、硫酸沙丁胺醇等药物 检查方法：检查方法：tlc（二）溴量法（二）溴量法 盐酸去氧肾上腺素及其注射液、重酒石酸间羟盐酸去氧肾上腺素及其注射液、重酒石酸间羟胺胺 反应摩尔比为反应摩尔比为1 6 hoch ch2nhch3ohbr2+3brbrhobrch ch2nhch3oh+3hbr四、含量测定四、含量测定 （一）非水溶液滴定法（一）非水溶液滴定法 原料药原料药 脂烃胺基侧链，显弱碱性脂烃胺基侧链，显弱碱性 （三）比色法（三）比色法 盐酸克仑特罗栓盐酸克仑特罗栓 具芳伯氨基，可发生重氮化具芳伯氨基，可发生重氮化偶合反应偶合反应anmn测定盐酸克仑特罗盐酸克仑特罗栓乙二胺萘基）

23、（、盐酸氯仿500max1hnano2 对照法定量对照法定量 偶合剂偶合剂n-（1-萘基）萘基）-乙二胺遇亚硝酸也能显色，乙二胺遇亚硝酸也能显色，干扰比色测定，所以在重氮化后，应加氨基磺酸铵将干扰比色测定，所以在重氮化后，应加氨基磺酸铵将剩余的亚硝酸分解除去，再加偶合试剂剩余的亚硝酸分解除去，再加偶合试剂n-（1-萘基）萘基）-乙二胺。乙二胺。 （五）荧光分光光度法（五）荧光分光光度法三羟基吲哚，甲基肾上腺红肾上腺素一定条件下653i2nex410nm、em520nm处测定荧光强度，对照法定量。处测定荧光强度，对照法定量。（六）（六）hplc法法 重酒石酸去甲肾上腺素注射液重酒石酸去甲肾上腺素

24、注射液 离子对反相高效液相色谱法离子对反相高效液相色谱法 内标法定量内标法定量 调节溶液调节溶液ph为为3.8，加入离子对试剂十二烷基磺酸钠，加入离子对试剂十二烷基磺酸钠例1. 能和重酒石酸去甲肾上腺素发生颜色反应的试液为a. 浓硫酸b. 甲醛试液c. 氨试液d. 甲醛硫酸试液e. 茚三酮试液 例2. 盐酸异丙肾上腺素的检查项目是（ ）a. 有关物质b. 二苯酮c. 盐酸d. 醛e. 酮体 第三节第三节 氨基醚衍生物类药物的分析氨基醚衍生物类药物的分析 derivates of amino-ethers cho ch2ch2n(ch3)2 hcl盐酸苯海拉明cho ch2ch2n(ch3)2nnoch3ch3onnclh茶苯海明茶苯海明一、结构与性质1. 脂烃胺基侧链，显弱碱性2. uv和ir3. 茶苯海明含卤素 二、鉴别试验二、鉴别试验1. 与硫酸反应呈色与硫酸反应呈色2. 制备三硝基苯酚衍生物测熔点制备三硝基苯酚衍生物测熔点2. 水解反应水解反应3. 与与agno3反应形成沉淀反应形成沉淀4. uv和和ir 三、含量测