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文档简介

1、.Griess 法检测 NO含量【实验目的】掌握 Griess法测量 NO 含量的方法。【实验原理】NO 在体内或水溶液中极易氧化成NO 22-和 NO 33-，NO 33-可通过镉被还原为NO 22-。 NO 22-在碱性条件下和磺胺作用生成重氮化合物(重氮盐 )，再与N-1-萘基乙二胺盐酸进行偶联反应(保留氮反应 )，生成有颜色的化合物，通过分光光度法比色 ,在波长 546nm 下测定吸光度 ,并制作标准曲线，通过曲线可求得样品中NO含量。【实验材料】1.试剂： NaNO 2 标准液、 1%磺胺、 0.1% N-1-萘基乙二胺盐酸、双蒸水。2.仪器：试管 7 支、滴定管 4 支、洗耳球、分

2、光光度计。【实验步骤】1.NaNO2 标准液的稀释：取试管 7 支，依次标号 1-7。用滴定管 1 号依次向 2-7 号试管加入双蒸水1ml，用滴定管 2 号向 1 号试管加入 NaNO 2 标准液 2ml，再用滴定管 2 号从 1 号试管吸出 1ml 液体加入 2 号试管，混匀，再吸出 1ml 液体加入 3 号试管，混匀。重复此步骤。当从 6 号试管吸出 1ml 液体时弃去。稀释步骤见图 1。精选范本.图 1 NaNO 2 标准液的稀释步骤2.用滴定管 3 号依次向 1-7 号试管加入 1%磺胺 0.5ml。3.用滴定管 4 号依次向 1-7 号试管加入 0.1% N-1-萘基乙二胺盐酸0.

3、5ml。4.依次混匀 1-7 号试管内液体，于常温下孵育20 分钟。5. 用 7 号试管内液体作为对照组，用分光光度计分别测定1-6 号试管内液体的吸光度值并记录。用滴定管滴加液体时应注意每一只滴定管只能用于每一种试剂，切忌混用。【实验结果】1.1-6号试管内液体的吸光度值见表1。表 1 1-6 号试管内液体的吸光度值浓度（mol/L ）8040201052.5吸光度值0.90.750.430.230.120.0552.以浓度为横轴，吸光度值为纵轴，利用Excel 绘制标准曲线，如图2。【讨论】在测定吸光度值时， 1 号试管内液体的吸光度值读数位于分光光度计数值刻盘的较大区域，其一精确度较低，其二机器已有故障，因此舍去了浓度为80精选范本.mol/L 对应的吸光度值0.9，采用余下5 个值绘制标准曲

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