生理学实验概论：实验一 坐骨神经-腓肠肌标本与坐骨神经干标本的制备

1、实验一、实验一、坐骨神经坐骨神经-腓肠肌腓肠肌标本标本与坐与坐骨骨神神经干经干标本的制备标本的制备实验目的1. 掌握坐骨神经-腓肠肌标本的制备方法2. 掌握坐骨神经干标本的制备方法实验原理蛙类一些基本生命活动和生理功能与恒温动物相似，在生理试验中常用蛙类离体组织器官作为试验标本。蛙类坐骨神经腓肠肌标本、坐骨神经干标本是研究神经冲动和肌肉收缩机能等试验最常用的试验材料。实验材料与器械蟾蜍，蛙板，蛙类手术器械（毁髓针、金冠剪、手术剪、手术镊、玻璃针、固定针、棉线），培养皿锌酮弓锌酮弓： 由铜片和锌片两种金属制成。锌酮弓在极性溶液中形成回路时，锌与铜两极产生约0.50.7V的直流电压，因此可用来刺激

2、神经和肌肉，使神经或肌肉兴奋。实验步骤及注意事项：1、双毁髓（脑、脊髓）2、剪除躯干上部及内脏3、撕去下肢皮肤4、分开两腿5、固定其中一条腿于蛙板上6、游离坐骨神经：在大腿部的半膜肌与股二头肌之间找到坐骨神经的大腿部分，剪去大腿部分的肌肉，保留膝关节与部分股骨 注意分离时要用玻璃分针，并且要顺着肌肉的走向游离，剪除肌肉时避免触碰神经，注意保留膝关节和相连的股骨7、分离腓肠肌：跟腱下穿线并结扎跟腱，游离腓肠肌8、检查神经活性注意不要碰到从脊柱发出的神经注意背侧向上9、制备坐骨神经干标本：取另一侧后肢固定于蛙板上，按前法分离大腿部位的坐骨神经。坐骨神经在腘窝处分为内侧的胫神经和外侧的腓总神经两支，

3、用玻璃针沿胫神经和腓总神经主干走向将神经分离至踝部，剪断侧支。结扎坐骨神经脊柱端及胫神经和腓总神经足端，游离神经干即制成坐骨神经干标本。置任氏液中稳定10分钟左右，即可用于实验。实验步骤及注意事项： 注意试验过程中严禁用手或铁器触碰神经和腓肠肌 注意保持标本的湿润实验二、实验二、神经神经干干动作电位动作电位、传导速度传导速度与神经不应期与神经不应期的的测定测定实验目的观察坐骨神经干的单相、双相动作电位、双向性传导学习测定神经干的传导速度学习阈刺激电位、绝对不应期和相对不应期的简单测定方法观察机械损伤对神经兴奋和传导的影响神经细胞动作电位神经细胞动作电位 动作电位是神经细胞兴奋的客观标志。当神经

4、细胞受到有效刺激时，细胞膜电位将发生一系列短暂的变化，由静息状态下的膜外正内负转变为膜外负内正的去极化状态。此时，膜外兴奋区相对于未兴奋区而言，其电位为负。两个区域电位差所产生的局部电流又引起邻近未兴奋区的去极化，使兴奋沿细胞膜传递。此时产生可传导的动作电位，也称为神经冲动。实验原理 静息状态兴奋状态动作电位神经干双相动作电位神经干双相动作电位 神经干由多条神经纤维组成，由于每条神经纤维的直径、长度、膜特性不完全一样，故兴奋性不同，动作电位的阈值各异。因此，神经干动作电位是许多单根神经纤维动作电位的复合表现。如果两个引导电极（R1-、R1+）置于兴奋性正常的神经干表面，兴奋波先后通过两个电极处

5、，便引导出两个方向相反的电位波形，称双相动作电位。实验原理实验原理神经干双相动作电位神经干双相动作电位兴奋区细胞外引导电极检流计ABCDEABCDE+ 实验原理单相动作电位单相动作电位 如果两个引导电极之间的神经纤维麻醉或损伤，兴奋波只通过第一个引导电极，不能传至第二个引导电极，则只能引导出一个方向的电位偏向波形，称单向动作电位。BC+ 细胞外引导电极检流计A+ ABC实验原理刺激伪迹AP刺激器放大器+地刺激电流i-i+R+R-地刺激伪迹刺激伪迹的的产生产生 刺激伪迹是刺激电流通过导电介质扩散至两引导电极而形成的电位差信号。神经冲动传导速度的测定神经冲动传导速度的测定实验原理+St 传导速度测

6、定 V = St刺激器输入通道R1- Rr1+ R2- R2+神经不应期神经不应期 神经组织和其他可兴奋组织一样，在接受一次刺激产生兴奋以后，其兴奋性将会发生规律性的变化，依次经过绝对不应期绝对不应期、相对不应期相对不应期、超常期超常期和低常期低常期，然后再回到正常的兴奋水平。 采用双脉冲刺激，先给予一个中等强度的阈上刺激，在神经发生兴奋后，按不同时间间隔给予第二个刺激，通过调节两刺激脉冲间隔，可测得坐骨神经的绝对不应期和相对不应期。 实验原理神经不应期神经不应期 将两刺激脉冲间隔由最小逐渐增大时，开始只有第一个刺激脉冲刺激产生AP，第二个刺激脉冲刺激不产生AP，当两刺激脉冲间隔达到一定值时，

7、此时第二个刺激脉冲刚好能引起一极小的AP，这时两刺激脉冲间隔即为绝对不应期。实验原理神经不应期神经不应期 继续增大刺激脉冲间隔，这时由第二个刺激脉冲刺激产生的AP逐渐增大，当两刺激间隔达到某一值时，此时由第二个刺激脉冲刺激产生的AP，其振幅刚好和由第一个刺激产生的AP相同，这时两刺激脉冲间隔即为相对不应期。实验原理按实验一制备的坐骨神经标本神经屏蔽盒BL-420生物机能系统实验材料与器械 CH1 CH2 CH3 CH4刺激 1 2 3 4 5 6 7+-BL420生物机能实验系统生物机能实验系统神经屏蔽盒神经屏蔽盒坐骨神经注意接地，防止干扰一、观察一、观察双向双向动作电位动作电位实验步骤1、单

8、击“神经干动作电位”2、“设置刺激参数”设定刺激强度等参数 细电压，单刺激，刺激强度2V3、单击“启动刺激”按钮开始记录4、改变刺激强度，观察不同刺激强度对动作电位的影响二、二、观察阈刺激电位观察阈刺激电位实验步骤1、单击“神经干动作电位”2、“设置刺激参数”设定刺激强度等 程控刺激信息，电压刺激增量0.1V 细电压，连续单刺激，起始刺激电压0.1V4、单击“启动刺激”按钮开始记录三、三、测定传导速度测定传导速度实验步骤方法一：1、连接2对传导电极2、固定两对记录电极间的距离，如0.5cm、1cm等3、记录动作电位后，选择“神经干兴奋传导速度测定”4、单击“启动刺激”按钮开始记录方法二：1、只连接1对传导电极2、固定两个电极间的距离3、记录动作电位，记录动作电位峰值间的时间差4、计算传导速度四、四、测定不应期测定不应期实验步骤1、选择“神经干兴奋不应期的测定”2、固