紫外分光-技术报告

1、计量标准技术报告计量标准名称 紫外、可见分光光度计检定装置 计量标准负责人 蒋志豪 建标单位名称(公章) 浙江大寺计量校准有限公司 填写日期 2014年12月25日 目 录一、建立计量标准的目的（ 2 ）二、计量标准的工作原理及其组成（ 2 ）三、计量标准器及主要配套设备（ 3 ）四、计量标准的主要技术指标（ 4 ）五、环境条件（ 4 ）六、计量标准的量值溯源和传递框图（ 5 ）七、计量标准的重复性试验（ 6 ）八、计量标准的稳定性考核（ 10 ）九、检定或校准结果的测量不确定度评定（ 14 ）十、检定或校准结果的验证（ 22 ）十一、结论（ 24 ） 十二、附加说明 （ 24 ）一、建立计量

2、标准的目的紫外、可见、近红外分光光度计是实验室通用分析仪器，适用于核酸的定量、蛋白质的定量、细菌细胞密度等，广泛应用于食品卫生、环境监测、农业环保等领域。但是紫外、可见、近红外分光光度计出厂设置以及人为使用等中间环节会直接影响分析结果的准确性，造成实验结果的误差，针对以上问题，有必要在本单位范围建立相应的计量标准，检校该仪器的各项性能，使被校仪器得出的结果更可靠、准确。二、计量标准的工作原理及其组成紫外、可见、近红外分光光度计检定装置主要由作为氧化钬滤光片、镨钕滤光片、可见光区和紫外区的透射比中性滤光片及杂散光滤光片组成。其工作原理如下：1、波长准确度与波长重复性检定：选择氧化钬滤光片、镨钕滤

3、光片、在常规的扫描速度下进行全波段扫描，由仪器识别并记录各个峰（谷）值。或由手动扫描，读出范围内合适的峰（谷）值。2、透射比准确度与透射比重复性检定：选择紫外区的透射比中性滤光片在235、257、313、350(nm)波长处以空气为参比，测量仪器的透射比。同理，用可见光区的透射比中性滤光片分别在440、546、635(nm)波长处测量仪器的透射比。3、杂散光检定：用杂散光滤光片在220、360或420(nm)波长处测量仪器的透射比。 三、计量标准器及主要配套设备计量标准器名 称型 号测量范围不确定度或准确度等级或最大允许误差制造厂及出厂编号检定或校准机构检定周期或复校间隔可见光区透射比标准滤光

4、片12.7mm×12.7mm×57mm10%、20%、30%U= 0.5%(k=2)黑龙江省计量科学研究院G1074-10G1074-20G1074-30黑龙江省计量科学研究院1年钬玻璃镨钕玻璃标准滤光片10mm×10mm(200700)nmU= 0.3nm(k=2)黑龙江省计量科学研究院H001黑龙江计量检检定测试院1年镨钕滤光片10mm×10mm(300900)nmU= 0.3nm(k=2)黑龙江省计量科学研究院P001北京市计量检测科学研究院1年紫外光区透射比标准滤光片ZW110%、 20%、 30%Urel= 0.50%(k=2.65)黑龙江省计

5、量科学研究院/ZW411黑龙江计量检检定测试院 1年杂散光滤光片10mm×10mm220nm、360nmU=0.01×A(k=2)黑龙江省计量科学研究院Z1-01Z2-01黑龙江计量检检定测试院 1年低压石英汞灯190nm900nm0.01nm黑龙江省计量科学研究院0056黑龙江计量检检定测试院 标准石英吸收池规格：10.0mm0002主要配套设备电子秒表绝缘电阻表兆欧表数字万用表UT30D深圳市胜利高电子科技有限公司3100391021杭州市质量技术监督检测院1年 四、计量标准的主要技术指标名 称测 量 范 围不确定度或准确定度等级或最大允许误差标准中性光滤光片10%、2

6、0%、30%U= 0.3% k=2杂散光滤光片220nm、360nmU=0.01×A k=2氧化钬滤光片(200700)nmU= 0.3nm k=2镨钕滤光片(300900)nmU= 0.3nm k=2紫外光区透射比标准滤光片10%、20%、30%Urel= 0.50% k=2.65五、环境条件序 号项 目要 求实际情况结 论1温度（1035）（1035）合格2相对湿度85%85%合格六、计量标准的量值溯源和传递框图上 一级计量器具 直接测量法计量标准名称：紫外可见分光光度计、高精度分光光度测量装置不确定度：波长：±0.1nm（k=1.65）,透射比：Urel=1.0

7、15;10-4%(k=1.65)保存机构：黑龙江省计量检定测试院本单位计量器具计量标准名称：紫外、可见分光光度计检定装置测量范围：波长：(190900)nm；透射比：(0100)%不确定度： 中性滤光片：U=0.3% (k=2)；氧化钬滤光片：U= 0.3nm (k=2)；镨钕滤光片：U=0.3nm (k=2)；杂散光滤光片：Urel =0.01×A( k=2)；紫外光区透射比标准滤光片：Urel = 0.50%(k=2.65)。直接测量法下一级计量器具计量器具名称：紫外、可见分光光度计测量范围：波长：(190900)nm；透射比：(0100)% 准确度等级：级、级、级、级七、计量标

8、准的重复性试验选取一台性能稳定的紫外可见分光光度计（型号：UV-1800），利用由北京捷力测控新技术公司研制的氧化钬滤光片来检验计量标准的波长测量重复性，以A段241.7 nm为例，测量结果如下表：试验时间测量值(nm)测量次数2013年11月20日试验条件2560%RH1241.52241.53241.54241.65241.66241.67241.58241.69241.610241.5241.550.05结 论符合要求备 注A段波长测量重复性引入的不确定分量为0.07nm试验人员陆松涛同理，对同一台性能稳定的紫外可见分光光度计（型号：UV-1800），利用由北京捷力测控新技术公司研制的氧

9、化钬滤光片来检验计量标准的波长测量重复性，以B段536.5nm为例，测量结果如下表：试验时间测量值(nm)测量次数2013年11月20日试验条件2560%RH1536.52536.53536.54536.55536.56537.07536.58537.09536.510537.0536.650.24结 论符合要求备 注B段波长测量重复性引入的不确定分量为0.35nm试验人员陆松涛选取一台性能稳定的紫外可见分光光度计（型号UV-1800）， 利用由黑龙江省计量院研制的紫外光区透射比标准滤光片来检验计量标准的吸光度测量重复性，以A段257nm处30%透射比为例。测量结果如下表：试验时间测量值(%)

10、测量次数2013年11月20日试验条件2560%RH129.3229.3329.3429.4529.3629.4729.3829.4929.41029.329.340.05结 论符合要求备 注A段透射比测量重复性引入的不确定分量为0.09%试验人员陆松涛同理，对一台性能稳定的紫外可见分光光度计（型号：UV-1800），利用由黑龙江省计量院研制的可见区透射比标准滤光片来检验计量标准的吸光度测量重复性，以B段440nm处30%透射比为例。测量结果如下表：试验时间测量值(%)测量次数2013年11月20日试验条件2560%RH130.5230.5330.5430.5530.6630.5730.683

11、0.5930.51030.530.520.04结 论符合要求备 注B段透射比测量重复性引入的不确定分量为0.07%试验人员陆松涛八、计量标准的稳定性考核选取一台性能稳定的紫外可见分光光度计（型号：UV-1800），利用由黑龙江省计量院研制的氧化钬滤光片来检验计量标准的波长测量稳定性，以A段241.5 nm为例，测量结果如下表：考核时间测量值(nm)测量次数2013年11月20日2013年12月25日2014年2月26日2014年4月23日核查标准JJG178-2007紫外、可见、近红外分光光度计检定规程1241.6241.4241.5241.42241.5241.4241.6241.53241

12、.5241.4241.6241.64241.6241.4241.6241.45241.6241.5241.4241.56241.6241.5241.5241.47241.5241.5241.5241.58241.6241.6241.6241.49241.6241.5241.6241.610241.5241.6241.5241.5241.55241.52241.55241.52变化量/0.030.030.03允许变化量A段波长：U=0.3nm(k=2)结 论符合要求符合要求符合要求考核人员陆松涛陆松涛陆松涛陆松涛同理，对同一台性能稳定的紫外可见分光光度计（型号：UV-1800），利用由北京捷力测

13、控新技术公司研制的氧化钬滤光片来检验计量标准的波长测量稳定性，以B段536nm为例，测量结果如下表：考核时间测量值(nm)测量次数2013年11月20日2013年12月25日2014年2月26日2014年4月23日试验条件2560%RH2560%RH2560%RH2560%RH核查标准JJG178-2007紫外、可见、近红外分光光度计检定规程1536.5537.0536.5537.02536.5537.0536.5536.53536.5537.0536.5537.04536.5537.0537.0536.55536.5537.0536.5537.06537.0537.0537.0537.075

14、36.5536.5536.5536.58537.0536.5536.5537.09536.5537.0537.0537.010537.0537.0536.5536.5536.65536.90536.65536.90变化量/0.250.250.25允许变化量B段波长：U=0.5nm(k=2)结 论符合要求符合要求符合要求考核人员陆松涛陆松涛陆松涛陆松涛选取一台性能稳定的紫外可见分光光度计（型号：UV-1800），利用由黑龙江省计量院研制的紫外光区透射比标准滤光片来检验计量标准的吸光度测量稳定性，以257nm处30%透射比为例。测量结果如下表：考核时间测量值(%)测量次数2013年11月20日20

15、13年12月25日2014年2月26日2014年4月23日试验条件2560%RH2560%RH2560%RH2560%RH核查标准JJG178-2007紫外、可见、近红外分光光度计检定规程129.329.529.329.4229.329.529.329.5329.329.529.329.4429.329.529.329.5529.329.529.329.3629.329.429.429.4729.329.429.329.5829.429.429.429.5929.429.429.429.41029.329.329.329.529.3229.4429.3329.44变化量/0.120.110.1

16、1允许变化量A段透射比：U=0.3% (k=2)结 论符合要求符合要求符合要求考核人员陆松涛陆松涛陆松涛陆松涛同理，对同一台性能稳定的紫外可见分光光度计（型号：UV-1800），利用由黑龙江省计量院研制的紫外光区透射比标准滤光片来检验计量标准的吸光度测量稳定性，以440nm处30%透射比为例。测量结果如下表：考核时间测量值(%)测量次数2013年11月20日2013年12月25日2014年2月26日2014年4月23日试验条件2560%RH2560%RH2560%RH2560%RH核查标准JJG178-2007紫外、可见、近红外分光光度计检定规程130.430.530.530.5230.430

17、.530.630.6330.430.630.430.5430.430.530.530.5530.430.530.630.5630.430.530.530.5730.630.630.530.5830.530.530.530.5930.530.530.530.61030.530.530.530.530.4530.5230.5130.52变化量/0.070.010.01允许变化量B段透射比：U=0.3% (k=2)结 论/符合要求符合要求符合要求考核人员陆松涛陆松涛陆松涛陆松涛九、检定或校准结果的测量不确定度评定一、波长示值误差测量结果的不确定度评定、A段波长示值误差测量结果的不确定度评定1 概述1

18、.1 检定依据：JJG178-2007紫外、可见、近红外分光光度计检定规程。1.2 环境条件：温度(1035)，相对湿度85%。1.3 校准标准：氧化钬滤光片，波长不确定度为U=0.3nm，包含因子k=2；1.4 被测对象：紫外-可见分光光度计。1.5 测量过程：在规定的条件下，用紫外-可见分光光度计直接测氧化钬滤光片，测得的吸收峰波长，重复测量3次，3次的算术平均值与氧化钬标准波长之差值，即为波长示值误差。1.6 评定结果的使用：在符合上述条件下的测量结果，一般可直接使用本不确定度的评定结果。2 测量模型 式中：紫外-可见分光光度计波长示值误差(nm)； 紫外-可见分光光度计波长示值的算术平

19、均值(nm)；氧化钬滤光片标准波长(nm)。3 输入量的标准不确定度评定3.1 输入量的标准不确定度的评定输入量的不确定度来源主要是紫外可见分光光度计的测量不重复性，可以通过连续测量得到测量列，采用A类方法进行评定。对一台紫外-可见分光光度计，使用氧化钬滤光片时，连续10次测量，得到一组测量列为241.4、241.5、241.4、241.4、241.4、241.5、241.6、241.5、241.6、241.5nm。nm单次实验标准差在实际检定中取3次的算术平均值测得：则求得 3.2 输入量的标准不确定度的评定输入量的不确定度主要来源于氧化钬滤光片波长定值不确定度，可根据定值证书给出的定值不确

20、定度来评定。因此，应采用B类方法进行评定。氧化钬滤光片波长的证书给出波长定值的不确定度为0.3nm，包含因子k=2，则标准不确定度为：4 合成标准不确定度的评定4.1灵敏系数，-14.2 标准不确定度汇总表输入量的标准不确定度汇总表见下表(nm)。标准不确定度分量不确定度来源ki测量重复性0.0670.038波长定值不确定度0.320.154.3 合成标准不确定度的计算输入量与彼此独立不相关，所以合成标准不确定度可按下式得到：4.4 扩展不确定的表示 取k=2则：同理求得A段波长示值误差不确定如下表(nm)。标准值ucU(k=2)241.70.0380.150.150.3279.40.0350

21、.150.150.35A段波长示值误差扩展不确定度一览表 (nm)测量范围标准值U(k=2)190340241.70.3279.4、B段波长示值误差测量结果的不确定度评定1 概述1.1 检定依据：JJG178-2007紫外、可见、近红外分光光度计检定规程。1.2 环境条件：温度(1035)，相对湿度85%。1.3 测量标准：氧化钬滤光片，波长不确定度为0.3nm，包含因子k=2；1.4 被测对象：可见分光光度计。1.5 测量过程：在规定的条件下，用可见分光光度计直接测氧化钬滤光片，测得的吸收峰波长，重复测量3次，3次的算术平均值与标准波长之差值，即为波长示值误差。1.6 评定结果的使用：在符合

22、上述条件下的测量结果，一般可直接使用本不确定度的评定结果。2 测量模型 式中：紫外-可见分光光度计波长示值误差(nm)； 紫外-可见分光光度计波长示值的算术平均值(nm)；氧化钬滤光片标准波长(nm)。3 输入量的标准不确定度评定3.1输入量的标准不确定度的评定输入量的不确定度来源主要是紫外可见分光光度计的测量不重复性，可以通过连续测量得到测量列，采用A类方法进行评定。对一台紫外-可见分光光度计，使用氧化钬滤光片时，连续10次测量，得到一组测量列为536.5，536.5，537.0，537.0，536.5，536.5，537.0，536.5，537.0，537.5nm。nm单次实验标准差在实际

23、检定中取3次的算术平均值测得：则求得 3.2 输入量的标准不确定度的评定输入量的不确定度可根据定值证书给出的定值不确定度来评定。因此，应采用B类方法进行评定。氧化钬滤光片波长的证书给出波长定值的不确定度为0.3nm，包含因子k=2，则标准不确定度为：4 合成标准不确定度的评定4.1灵敏系数，-14.2 标准不确定度汇总表输入量的标准不确定度汇总表见下表(nm)。标准不确定度分量不确定度来源ki测量重复性0.350.20波长定值不确定度0.320.154.3 合成标准不确定度的计算输入量与彼此独立不相关，所以合成标准不确定度可按下式得到：4.4 扩展不确定的表示 取k=2则：同理求得B段波长示值

24、误差不确定如下表(nm)。标准值ucU(k=2)360.90.200.150.250.5445.80.220.150.250.5536.50.210.150.250.5638.10.210.150.250.55B段波长示值误差扩展不确定度一览表 (nm)测量范围标准值U(k=2)340900360.90.5445.8536.5638.1二、透射比示值误差测量结果的不确定度评定、A段透射比示值误差测量结果的不确定度评定1 概述1.1 测量依据：JJG178-2007紫外、可见、近红外分光光度计检定规程。1.2 环境条件：温度(1035)，相对湿度85%。1.3 测量标准：紫外光区透射比标准滤光片

25、，透射比标称值：10%、20%、30%，Urel=0.5%(k=2)。1.4 被测对象：紫外-可见分光光度计。1.5 测量过程：用透射比标称值分别为10%、20%、30%的标准滤光片，在规定的波长处，以空气为参比，测量其透射比示值，连续测量3次，得到3次示值的算术平均值与在相应波长下的透射比的标准值之差，即为透射比的示值误差。1.6 评定结果的使用：在符合上述条件下的测量结果，一般可直接使用本不确定度的评定结果。2 测量模型 式中：紫外-可见分光光度计透射比示值误差(%)；紫外-可见分光光度计透射比测量平均值(%)；紫外-可见分光光度计透射比标准值(%)。3 输入量的标准不确定度评定3.1 输

26、入量的标准的评定输入量的不确定度来源主要是紫外-可见分光光度计的测量不重复性，可以通过连续测量得到测量列，采用A类方法进行评定。 对一台紫外-可见分光光度计，若选择透射比标称值为30%的紫外光区透射比标准滤光片，在250nm下连续10次测量，得到测量列30.1，30.4，30.3，30.3，30.2，30.4，30.2，30.3，30.3，30.3（%）。求得测量平均值：按贝塞尔公式计算可得单次测量标准偏差：由于取三次测量的平均值作为测量结果，故标准不确定度为：3.2 输入量的标准不确定度的评定输入量的不确定度来源于透射比标准滤光片的定值不确定度，可根据定值证书给出的定值不确定度来评定，因此应

27、采用B类方法进行评定，记为。由其证书查得：透射比定值的相对扩展不确定度为0.5%，k=2.65，则求得： 4 合成标准不确定度的评定4.1灵敏系数，-14.2 标准不确定度汇总表输入量的标准不确定度汇总表见下表(%)。标准不确定度分量不确定度来源ki测量重复性0.0920.053滤光片定值不确定度0.30%2.650.064.3 合成标准不确定度的计算输入量与彼此独立不相关，所以合成标准不确定度可按下式得到：4.4 扩展不确定的表示取k=2则：同理求得A段滤光片示值误差不确定如下表(%)。ucU(k=2)235nm0.0530.060.080.2257nm0.0650.060.080.2313

28、nm0.0620.060.080.2350nm0.0660.060.080.2、B段透射比示值误差测量结果的不确定度评定1 概述1.1 测量依据：JJG178-2007紫外、可见、近红外分光光度计检定规程。1.2 环境条件：温度(1035)，相对湿度85%。1.3 测量标准：可见光区透射比标准滤光片，透射比标称值10%，20%，40%，相对不确定度Urel=0.5%，包含因子k=2。1.4 被测对象：可见分光光度计。1.5 测量过程：用透射比标称值分别为10%、20%、40%左右的标准滤光片，分别在规定波长处，以空气为参比，分别测量各滤光片的透射比（示值），连续测量3次，得到3次示值的算术平均

29、值，与相应波长下的透射比的标准值之差，即为透射比的示值误差。1.6 评定结果的使用：在符合上述条件下的测量结果，一般可直接使用本不确定度的评定结果。2 测量模型 式中：紫外-可见分光光度计透射比示值误差(%)；紫外-可见分光光度计透射比测量平均值(%)；紫外-可见分光光度计透射比标准值(%)。3 输入量的标准不确定度评定3.1 输入量的标准的评定输入量的不确定度来源主要是紫外-可见分光光度计的测量不重复性，可以通过连续测量得到测量列，采用A类方法进行评定。对一台可见分光光度计，若选择透射比标称值为30%的透射比标准滤光片，在440nm处连续10次测量，得到测量列30.5，30.5，30.4，3

30、0.5，30.5，30.6，30.6，30.5，30.4，30.6%。求得测量平均值： 按贝塞尔公式计算可得单次测量标准偏差：由于取三次测量的平均值作为测量结果，故标准不确定度为：3.2 输入量的标准不确定度的评定输入量的不确定度来源于透射比标准滤光片的定值不确定度，可根据定值证书给出的定值不确定度来评定，因此应采用B类方法进行评定，记为。由其证书查得：透射比定值的相对扩展不确定度为0.3%，k=2，则求得： 4 合成标准不确定度的评定4.1灵敏系数，-14.2 标准不确定度汇总表输入量的标准不确定度汇总表见下表(%)。标准不确定度分量不确定度来源ki测量重复性0.0740.043滤光片定值不确定度0.3%20.15%4.3 合成标准不确定度的计算输入量与彼此独立不相关，所以合成标准不确定度可按下式得到：4.4 扩展不确定的表示取k=