专题植物的组织培养技术实用教案

1、会计学1专题专题(zhunt)植物的组织培养技术植物的组织培养技术第一页，共46页。第1页/共46页第二页，共46页。 第2页/共46页第三页，共46页。菊花的组织培养菊花的组织培养1 1、植物、植物(zhw)(zhw)组织培养的原理：组织培养的原理：植物细胞植物细胞(xbo)具有全能具有全能性性2 2、植物、植物(zhw)(zhw)组织培养的过组织培养的过程：程：离体的植物离体的植物器官、组织器官、组织、细胞、细胞脱分化脱分化愈愈伤伤组组织织再分再分化化根根芽芽植植物物体体第3页/共46页第四页，共46页。（1 1）植物）植物(zhw)(zhw)材料的选择材料的选择 不同的植物不同的植物(z

2、hw)(zhw)组织，培养的难易程度差别很大。组织，培养的难易程度差别很大。 同一种植物同一种植物(zhw)(zhw)材料，材料年龄、保存时间长短也会材料，材料年龄、保存时间长短也会影响实验结果。如菊花组织培养一般选择未开花植株的茎上部新萌影响实验结果。如菊花组织培养一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝。生的侧枝。（2 2）适宜的培养基）适宜的培养基MSMS培养基培养基 大量元素大量元素C H OC H O、N P SN P S、K Ca MgK Ca Mg 微量元素微量元素ZnZn、FeFe、B B、CuCu、MoMo、CoCo（钴）、（钴）、I I、MnMn （新铁臂阿童木，古典猛）（新

3、铁臂阿童木，古典猛） 有机物有机物碳源碳源-蔗糖蔗糖(zhtng)(zhtng)，特殊营养物质，特殊营养物质-甘氨酸、烟酸、甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素等肌醇、维生素等 （3 3）其他因素）其他因素(yn s)(yn s)：pHpH、温度、光照等条件、温度、光照等条件3 3、影响植物组织培养的因素、影响植物组织培养的因素：第4页/共46页第五页，共46页。思考思考(sko)：以下培养基出现的现象反：以下培养基出现的现象反应了什么问题？应了什么问题？第5页/共46页第六页，共46页。总结：总结：植物激植物激素的浓素的浓度、使度、使用用(shyng)的先的先后顺序、后顺序、以及用以及用量的比量的比例

4、都会例都会影响实影响实验结果。验结果。第6页/共46页第七页，共46页。第7页/共46页第八页，共46页。制备制备(zhbi)MS固体培养基固体培养基外植体消毒外植体消毒(xio d) 接种接种(jizhng) 培培 养养栽栽 培培4 4、实验操作、实验操作 移移 栽栽第8页/共46页第九页，共46页。MSMS固体固体(gt)(gt)培养基成分及比例培养基成分及比例母液母液4保存保存(bocn)第9页/共46页第十页，共46页。植物植物(zhw)(zhw)组织培养过组织培养过程示意图程示意图 上面的示意图中还有什么上面的示意图中还有什么(shn me)地方不够完地方不够完善的？善的？试管没有试

5、管没有(mi yu)做密封做密封第10页/共46页第十一页，共46页。污染污染(wrn)指在组织培养过程指在组织培养过程(guchng)中，培养容器内中，培养容器内滋生菌斑，使培养材料不能正常生长发育，从滋生菌斑，使培养材料不能正常生长发育，从而导致培养失败的现象。而导致培养失败的现象。细细菌菌污污染染霉霉菌菌污污染染第11页/共46页第十二页，共46页。无菌 操 作无菌 操 作(cozu)v器皿、培养基灭菌器皿、培养基灭菌-高压蒸汽灭菌高压蒸汽灭菌v外植体消毒外植体消毒-体积分数体积分数70%酒精、酒精、v 质量分数质量分数0.1%氯化汞氯化汞v手消毒手消毒- 体积分数体积分数70%酒精酒精

6、v无菌操作无菌操作-超净工作台超净工作台v器械器械-灼烧灼烧(zhu sho)灭菌灭菌v激素激素-过滤灭菌过滤灭菌(防细菌滤膜防细菌滤膜) 第12页/共46页第十三页，共46页。制备制备MS固体培养基固体培养基 外植体的选择和消毒外植体的选择和消毒 接种接种培养培养 移栽移栽 栽培栽培第13页/共46页第十四页，共46页。第14页/共46页第十五页，共46页。月季的花药培养月季的花药培养1、被子植物、被子植物(biz-zhw)的花粉发育的花粉发育花丝花丝花药：囊状结构，内有很多花粉粒花药：囊状结构，内有很多花粉粒花粉（小孢子花粉（小孢子(boz)）：是花粉母细胞（小孢子）：是花粉母细胞（小孢子

7、(boz)母细胞母细胞）经过减数分裂而形成的，因此，花粉是单倍体的生殖细胞）经过减数分裂而形成的，因此，花粉是单倍体的生殖细胞。花粉的发育要经历：四分体时期、单核期、双核期花粉的发育要经历：四分体时期、单核期、双核期雄蕊雄蕊(xingru)第15页/共46页第十六页，共46页。花粉花粉花粉花粉胚状体胚状体愈伤组织愈伤组织从芽从芽从芽从芽生根生根移栽移栽脱分化脱分化分化分化再分再分化化诱导诱导途径一：花粉通过胚状体阶段发育为植株途径一：花粉通过胚状体阶段发育为植株(zhzh)。途径二：花粉在诱导培养基上先形成愈伤组织，再将其诱导途径二：花粉在诱导培养基上先形成愈伤组织，再将其诱导分化成植株分化成

8、植株(zhzh)。走哪条途径，主要走哪条途径，主要(zhyo)取决于培养基中激素的种取决于培养基中激素的种类及其浓度配比。类及其浓度配比。第16页/共46页第十七页，共46页。人工种子是由外植体通过组织培养而获得的人工种子是由外植体通过组织培养而获得的胚状体，然后加上人造胚状体，然后加上人造(rnzo)胚乳，人造胚乳，人造(rnzo)种皮而制成；外植体进行的是有丝种皮而制成；外植体进行的是有丝分裂，无须通过两性生殖细胞结合而发育成分裂，无须通过两性生殖细胞结合而发育成的个体，属于无性生殖。的个体，属于无性生殖。第17页/共46页第十八页，共46页。第18页/共46页第十九页，共46页。第19页

9、/共46页第二十页，共46页。第20页/共46页第二十一页，共46页。未熟，由于它的外面有花萼、未熟，由于它的外面有花萼、花瓣或颖片保护，通常处于无花瓣或颖片保护，通常处于无菌状态，所以只要将整个花蕾菌状态，所以只要将整个花蕾或幼穗消毒即可。或幼穗消毒即可。第21页/共46页第二十二页，共46页。一般经过一般经过20-30天培养后，会天培养后，会发现花药开裂，长出愈伤组织或释发现花药开裂，长出愈伤组织或释放出胚状体。将愈伤组织及时转移放出胚状体。将愈伤组织及时转移到分化培养基上，以便进一步分化到分化培养基上，以便进一步分化出再生植株出再生植株(zhzh)。第22页/共46页第二十三页，共46页

10、。 如果花药开裂释放出胚状体，则一个花药内就会产生大量幼小植株，必须在花药开裂后尽快将幼小植株分开，分别移植到新的培养基上，否则这些植株将很难分开。 在花药培养中，特别是通过愈伤组织形成的花粉植株，常常会出现染色体倍性的变化。（主要原因是营养核和生殖(shngzh)核融合造成的。）第23页/共46页第二十四页，共46页。植物组织培养技术植物组织培养技术(jsh)与花药培养技术与花药培养技术(jsh)的的异同点异同点项目项目相同点相同点不同点不同点植物组织培养技植物组织培养技术术离体的植物组织离体的植物组织经脱分化形成愈经脱分化形成愈伤组织，再分化伤组织，再分化成丛芽，诱导出成丛芽，诱导出根，然

11、后进行移根，然后进行移栽。栽。外植体为体细胞，外植体为体细胞，染色体数无需加染色体数无需加倍。倍。花药培养技术花药培养技术取材为花药，培养取材为花药，培养的为单倍体幼苗，的为单倍体幼苗，植株弱小，高度不植株弱小，高度不育，必须用秋水仙育，必须用秋水仙素处理，使染色体素处理，使染色体加倍，恢复正常植加倍，恢复正常植株的染色体数，而株的染色体数，而且为纯种。且为纯种。第24页/共46页第二十五页，共46页。第25页/共46页第二十六页，共46页。注意：注意：二核花粉粒：成熟二核花粉粒：成熟(chngsh)的花粉粒中，只含的花粉粒中，只含花粉管细胞核和生殖细胞核。花粉管细胞核和生殖细胞核。（精子在花

12、粉管中形成）（精子在花粉管中形成）三核花粉粒：有些植物的花三核花粉粒：有些植物的花粉，在成熟粉，在成熟(chngsh)前，生前，生殖细胞进行一次有丝分裂，形殖细胞进行一次有丝分裂，形成两个精子，这样的花粉在成成两个精子，这样的花粉在成熟熟(chngsh)时，含有一个营时，含有一个营养核和两个精子。养核和两个精子。两个精子和一个营养核的基两个精子和一个营养核的基因型相同。因型相同。1花粉母细胞花粉母细胞4个小孢子个小孢子(boz)减分减分有分有分4个花粉管细胞核个花粉管细胞核4个生殖细胞核个生殖细胞核有分有分8个精子个精子(jngz)第26页/共46页第二十七页，共46页。第27页/共46页第二十八页，共46页。第28页/共46页第二十九页，共46页。第29页/共46页第三十页，共46页。第30页/共46页第三十一页，共46页。第31页/共46页第三十二页，共46页。第32页/共46页第三十三页，共46页。第33页/共46页第三十四页，共46页。第34页/共46页第三十五页，共46页。第35页/共46页第三十六页，共46页。第