草莓的脱毒培养10

1、第十四章第十四章 草莓的脱毒与快繁草莓的脱毒与快繁 草莓为蔷薇科草莓属多年生草本植物，草莓为蔷薇科草莓属多年生草本植物，植株矮小，呈半平卧丛状生长，基生三植株矮小，呈半平卧丛状生长，基生三出复叶。果实为聚合瘦果生于花托上。出复叶。果实为聚合瘦果生于花托上。 草莓喜光但又较耐荫，要求肥沃、疏松、草莓喜光但又较耐荫，要求肥沃、疏松、透水、通气的中性微酸性或微碱性土壤。透水、通气的中性微酸性或微碱性土壤。（一）草莓脱毒（一）草莓脱毒 1. 病毒种类病毒种类 草莓斑驳病毒、皱叶病毒、草莓草莓斑驳病毒、皱叶病毒、草莓镶脉病毒、轻型黄斑病毒等。镶脉病毒、轻型黄斑病毒等。 2. 脱毒方法脱毒方法1）热处理脱

2、毒（恒温或变温的热空气处理）热处理脱毒（恒温或变温的热空气处理方法）方法）将草莓母株在将草莓母株在4041温度的特定容器内温度的特定容器内下处理下处理1-2个月。个月。将母株和容器一起放在恒温箱中，母株必将母株和容器一起放在恒温箱中，母株必须带有成熟的叶片。每天光照须带有成熟的叶片。每天光照16 h，光照强，光照强度度5000 lx，白天温度，白天温度38 ，夜间，夜间35 。 2. 茎尖培养脱毒茎尖培养脱毒1）初代培养）初代培养 ：取草莓顶芽，用自来水流：取草莓顶芽，用自来水流水冲洗水冲洗24 h，然后剥去外层叶片，消毒，然后剥去外层叶片，消毒，切取切取0.2 mm的茎尖。接入的茎尖。接入M

3、S + BA0.25 + NAA0.25的培养基中。培养条件为的培养基中。培养条件为2225 ，日照，日照1618 h，光强，光强3000 lx。 2）继代培养：把芽丛割成芽丛小块，转入）继代培养：把芽丛割成芽丛小块，转入新鲜的新鲜的MS培养基中，令其长大，并进行分培养基中，令其长大，并进行分株，扩大繁殖。株，扩大繁殖。3）生根培养：在培养基中加入）生根培养：在培养基中加入NAA1（mg/L）或）或IBA1。3. 无病毒苗的鉴定无病毒苗的鉴定抗血清法、电子显微镜法、指示植物法、抗血清法、电子显微镜法、指示植物法、酶联免疫吸附法（酶联免疫吸附法（ELISA）等，确保脱毒）等，确保脱毒后的试管苗不

4、含病毒。后的试管苗不含病毒。 （二）快繁技术（二）快繁技术 1. 材料与消毒：经过热处理（材料与消毒：经过热处理（6-7月）后月）后的草莓母株上新抽的匍匐茎作外植体，未的草莓母株上新抽的匍匐茎作外植体，未经热处理的于经热处理的于7-8 月的匍匐茎发生旺盛期，月的匍匐茎发生旺盛期，在无病虫害的田块，连续晴天在无病虫害的田块，连续晴天3-4 d选取健选取健壮、新萌发且未着地的匍匐茎段壮、新萌发且未着地的匍匐茎段3 cm作为作为外植体。外植体。 外植体取来后流水冲洗材料外植体取来后流水冲洗材料2 h，进行表，进行表面消毒：洗涤灵水溶液洗去材料表面的油面消毒：洗涤灵水溶液洗去材料表面的油质；用质；用7

5、0%酒精浸泡数秒除去蜡质；用酒精浸泡数秒除去蜡质；用3%的次氯酸钠溶液浸泡的次氯酸钠溶液浸泡15-30 min，无菌，无菌水冲洗水冲洗3 次。次。 把芽放在解剖镜下，无菌条件下，用把芽放在解剖镜下，无菌条件下，用镊子、刀片、解剖针等把芽外面的幼叶镊子、刀片、解剖针等把芽外面的幼叶和叶原基去掉，暴露生长点。用利刀切和叶原基去掉，暴露生长点。用利刀切下含下含1-2 个叶原基，个叶原基，0.5 mm的生长点，的生长点，接种在培养基上。接种在培养基上。 2. 培养条件：培养条件：茎尖分化培养基：茎尖分化培养基：MS+6-BA0.5 mg/L+IBA0.1 mg/L继代培养基：继代培养基：MS+6-BA

6、 1 mg/L生根前一次的继代培养基：生根前一次的继代培养基： MS+6-BA0.5 mg/L 生根培养基：生根培养基：1/2MS+IBA 1.0 mg/L温度：温度：23 左右左右光照：光照：12 h 光照强度：光照强度：2000 lx3. 生长与分化生长与分化接种接种1-2 个月，茎尖在培养基上形成愈伤组织个月，茎尖在培养基上形成愈伤组织并分化出小的植株，将初次培养产生的新植株切并分化出小的植株，将初次培养产生的新植株切割成带割成带3-4 个芽的芽丛转入继代培养基中，每瓶个芽的芽丛转入继代培养基中，每瓶3-4 个芽丛，个芽丛，3-4 周即可获得周即可获得30-40 个腋芽形成的个腋芽形成的芽丛及植株。芽丛及植株。4. 生根培养生根培养为获得整齐健壮的生根苗，将芽丛切为获得整齐健壮的生根苗，将芽丛切割开，单个芽转接到专门的生根培养基割开，单个芽转接到专门的生根培养基中生根，培养中生根，培养4 周后，即可长成周后，即可长成4-5 cm高并有高并有5-6 条根的健壮苗。条根的健壮苗。5. 试管苗的移栽试管苗的移栽小心取出试管中的发根幼苗，用清水洗小心取出试管中的发根幼苗，用清水洗去附着的培养基，栽植到经过蒸汽消毒的去附着的培养基，栽植到经过蒸汽消毒的培养土中，在温室内驯化。培养土中，在温室内驯化。每天叶面喷水每天叶面喷水3-4