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文档简介

1、1.DNJ生物碱是种叫做DNJ(1脱氧野尻霉素,)的特殊物质,其主要作用是抑制蔗糖酶、麦芽糖酶、a-葡萄糖苷糖、a-淀粉酶的分解,从而达到防治糖尿病的作用。(已从桑叶中分离出6种生物碱: 1-DNJ、N-Me-DNJ、GAL-DNJ、fagomine、DAB及Calystegin B2,并确定了其分子结构。) 桑叶生物碱fagomine及桑叶总多糖(TPM)促进胰岛ß细胞分泌胰岛素,促进细胞对糖的利用、肝糖原合成、改善糖代谢,加强糖尿病人病变胰岛细胞与结构的恢复功能,增加糖尿病人外周组织的胰岛素受体并提高受体敏感性的功能。有机铬能减轻胰岛素抵抗,增强胰岛素的功能。桑叶脱皮固酮也能促进

2、葡萄糖转化为糖元,最终达到降血糖的效果。不影响健康人的血糖水平,起到全方位的预防糖尿病和保健功效。摘 要:本研究从桑园土壤中经过初筛、复筛鉴定等方法筛选产DNJ 的菌株。利用含葡萄糖淀粉酶的琼脂平板,从263 个菌株中筛选出7 株反应后有不同程度变蓝的菌株。利用反相高效液相色谱法从7 株菌株中鉴定出1 株产DNJ菌株,菌株命名为SL-429,该菌株在发酵培养基为KCl 0.05%、MgSO4·7H2O 0.05%、NaNO3 0.2%、NaCl0.5%、CaCO3 0.35%、可溶性淀粉4%、大豆粉1%、胰蛋白1%,pH7.2、27下发酵,DNJ 产量为0.017mg/ml。根据其形

3、态特征、生理生化特征鉴定,初步确定为浅紫灰链霉菌。关键词:1 - 脱氧野尻霉素;浅紫灰链霉菌;筛选;反相高效液相色谱    1- 脱氧野尻霉素(1-deoxynojirimycin,DNJ)是植物中的一种哌啶生物碱,DNJ 化学名为3,4,5- 三羟基-2- 羟甲基四氢吡啶,其化学式为C6H13NO4,分子量为1631。DNJ 主要的生物功能是抑制- 葡萄糖苷酶2-3、葡萄糖淀粉酶4和肿瘤转移,抗病毒5-6以及减肥和增加胰岛素敏感性的作用 7 等。另外,DNJ 作为载体,可用于高纯度麦芽糖酶的合成。    DNJ 有植物来源和微生物来

4、源。含有DNJ 的植物包括桑树(Morus alba L.)、野拓草(Commelina communis)、风信子( H y a c i n t h u s o r i e n t a l i s ) 、沙参属植物(Ad en op hor at r iph yl la va r. ja po ni a)和爵床科植物(Jacobinia suberecta)8-11,但主要在桑树中含量高。生物来源据报道有浅紫灰链霉菌GC-148(Streptomyceslavendulae GC-148)和芽胞杆菌(Bacillus)12。目前医药上利用的DNJ 主要是从桑叶中提取,但干桑叶中DNJ 的含量

5、仅0.1% 左右,再加上提取过程中的损失,这样大规模得到DNJ 就非常困难。微生物发酵产DNJ 仅见国外有2 例报道,但仅仅局限于菌株初步筛选,没有开展大规模发酵制备DNJ 方面的实验。本实验从桑园土壤中经过初筛和复筛鉴定产DNJ 的菌株,并对产DNJ 菌株进行生理生化等初步鉴定。旨在为通过微生物大规模发酵从而实现DNJ 的高产、大量生产提供依据。2. 桑叶DNJ,2500 元/千克· A供应商:西安同升生物科技有限公司供应桑叶DNJ· 桑叶1-DNJ I-Deoxynojirimycin · 主要成分 1-脱氧野尻霉素 提取来源 桑叶 · 外观 淡棕黄

6、色粉末 检测方法 HPLC · 含量 1/10/20(%) 应用剂型 片剂 胶囊 · 包装 25KG/纸桶 保存期 24(月) · 桑叶提取物的药理作用:疏散风热,清肺润燥,清肝明目。用于风热感冒,肺热燥咳,头晕头痛,目赤昏花,有降低血糖,抑制动脉硬化!· 西安同升生物科技有限公司· 侯山里先生 QQ交谈 在线留言 · 电话:86#183; 手机#183; 邮编:710065· 公司地址:西安高新区电子三路· 公司主页:· 桑叶提取物1-DNJ GMP

7、厂家优惠供应 ·· B.供应商:上海森一生物科技有限公司· 产品名称:桑叶提取物 有效成分:桑叶脱氧野尻霉素 1DNJ 常用规格:1-DNJ 1-30 检测方法:HPLC 产品性状:棕黄色或黄绿色粉末 1-DNJ的主要药理作用及功能功效 DNJ具有降血糖作用 抑制反转录病毒活性 抑制肿瘤转移 降低胆固醇、防止血栓形成、改善肝脏功能、提高免疫力、稳定血压、净化血液、改善便秘、减肥 桑叶提取物的作用机理 迄今人们对桑叶提取物降血糖作用机理的研究是从两方面展开的:一方面是从桑叶成分对二糖类分解酶活性的抑制作用研究,另一方面从桑叶成分促进胰岛szlig;细胞分泌方面入手,

8、下图综述了近年来研究人员对桑叶降血糖作用方面的研究进展。 研究表明桑叶的降血糖作用是通过两个途径实现的:一、通过桑叶生物碱DNJ对二糖类分解酶活性产生抑制作用,从而抑制小肠对双糖的吸收,降低食后血糖的高峰值;二、桑叶生物碱fagomine及桑叶多糖促进szlig; 经DNJ对莫洛尼鼠白血病毒(MoLV)的抑制实验表明,DNJ具有显著的抗逆转录酶病毒活性,由DNJ对葡萄糖苷酶I的抑制作用而致的未成熟糖蛋白的积累可能通过抑制细胞融合、病毒与寄主细胞受体结合、病毒穿透力和合胞体形成来抑制MoLV的复制,从而抑制病毒活性。 Tsutomu Tsuruoka等认为DNJ通过抑制糖苷酶的活性在肿瘤细胞表面

9、产生未成熟的碳水化合物链,削弱了肿瘤的转移能力。这些表面活性发生改变的肿瘤细胞被寄主免疫系统攻击而使这些肿瘤细胞不能结合到寄主细胞上3。·· 上海森一生物科技有限公司· 陈瑞斯 先生 销售经理· 电话:86-21-64263957-803· 传真:86-21-64128408· 手机#183; 地址:中国上海市闵行报春路558弄42号· 邮编:2011003. 提取与纯化方法:1-脱氧野尻霉素提取精制工艺的研究刘韦鋆  赵骏  高秀梅  刘美平

10、  曾森  【摘要】:目的:研究桑叶中1-脱氧野尻霉素(DNJ)的提取与精制工艺,建立1-脱氧野尻霉素(DNJ)的定性鉴别及含量测定方法。方法:本研究取桑叶药材,加70%乙醇提取,将提取液浓缩,通过大孔吸附树脂,取通过大孔吸附树脂的流出液,浓缩,通过阳离子交换树脂,用蒸馏水洗,用0.5mol/L氨水洗脱,收集洗脱液,浓缩,浓缩液通过硅胶纯化,将有杂质的组分弃去,合并含1-脱氧野尻霉素较纯的组分,浓缩,真空干燥,即得1-脱氧野尻霉素(DNJ)。4.DNJ鉴定和检测方法:4-1.1-脱氧野尻霉素的定性鉴别采用薄层鉴别法,吸取溶液点于薄层板上,展开剂为乙酸乙脂-无水乙醇(2:8)

11、,碘熏法进行显色,置紫外光灯(254nm)下检视。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。1-脱氧野尻霉素的含量测定采用柱前衍生化高效液相色谱法,以芴甲氧羰酰氯(Fmoc-Cl)作为衍生化试剂,在pH=8.5硼酸盐缓冲液中进行衍生化反应后,生成具有紫外吸收的DNJ-FMOC络合物,用反相高效液相色谱紫外检测法分离测定DNJ-FMOC。采用十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱;流动相为乙腈-0.1%冰醋酸(11:16);检测波长为254nm。结果:经测定1-脱氧野尻霉素的含量为23.2%,收率为0.355%。结论:本方法工艺流程简单、快速、收率及含量高,适合于工业生产。4-2测桑叶

12、粉 DNJ的测定方法和主要仪器试剂试剂 为 美 国 公 司 产 品为美国 公司产品 乙腈色谱纯为中国天 津市凯通 化学试剂有 限公司出品 其他试剂皆为分析纯中国 试验用水为自制双蒸水仪器 型高效液相色谱仪为美国 公司产品 色谱柱 为科瑞 检测器为 紫外检测器 分析软件为 工作站 台式离心机中国型超声波清洗器中国 电子恒温水浴锅中国 旋涡混合器中国等均的测定方法 参照 等 报 道 的 方 法 的 基 本 原 理 按 照 等 描 述 的 方 法 测 定 测试样品的 提取 称取待 测桑叶粉 加 入 盐酸 涡流 超 声 波 处 理离 心 收 集 上 清 液 沉 淀 物 再 按 上 步 重 复 抽 提

13、次 合 并 次 上 清 液定容至 即得样品提 取液 的 衍 生 化 取 桑 叶 粉 提 取 液 于 的 离 心 管 加 入硼酸钾缓冲液 再加入 的衍生化试剂 溶解于体积分数为 乙腈中 混匀 恒温水浴中反应 加入 的甘氨酸 中和剩余的 以终止反应 再加体积分数为 的醋酸溶液 用水定容至 最后用孔径尼龙膜过滤 收集滤液 即得测试液 测定方法 采用反相高效液相层析 法测定色 谱 柱 为 科 瑞 检 测 器 为 紫 外 检 测 器 检 测 波 长 流 动 相 为 乙 腈体 积分数 醋酸 体积比 流速为 进样量 分析软件为 工作站 外标法分析计算 所有样品均测定 次 平均值为其 质量分数【作者单位】:

14、天津中医药大学; 【关键词】: 桑叶 -脱氧野尻霉素 阳离子交换树脂 硅胶 提取 精制 【基金】:教育部高等学校科技创新工程重大项目培育基金项目资助课题(706013) 【分类号】:R284.2【正文快照】: 桑叶异名铁扇子,为桑科属桑(Morus albaL.)的叶。味苦、甘,性寒,归肺、肝经。祛风清热,凉血明目等功效1。治风温发热,头痛,目赤,口渴,肺热咳嗽等。现代药理研究证明桑叶生物碱的活性成分1-脱氧野尻霉素具有高效广泛的药理作用,对糖尿病及其并发症、肥胖症、病毒感染(HIV)等·3333333供应蚕沙会员信息供应蚕沙产品标签:蚕沙 放大图片· 当 前 价: 3 元

15、/千克· 发 货 期: 3天内发货· 最小起订: 2000 千克· 供货总量: 5000 千克· 所 在 地: 云南 保山· 有效期至: 2012-05-10· 杨家良(个体经营)· 联系人:杨家良先生· 电话:86-0875#183; 手机#183; 所在地:云南 保山· 主营产品:蚕茧、蚕丝 · 公司地址:云南省保山市施甸县永福潘家庄(下)蚕沙提取物功效上述的粗叶绿素每克含维生素A3644国际单位。 泉州本草:治风寒感冒,偏头痛。 【用法与

16、用量】内服:煎汤,35钱;或入丸、散。外用:炒熨、煎水洗或研末调敷。 【宜忌】本草经疏:瘫缓筋骨不随,由于血虚不能荣养经络,而无风湿外邪侵犯者,不宜服。 【选方】治湿聚热蒸,蕴于经络,寒战热炽,骨骱烦疼,舌色灰滞,面目萎黄,病名湿痹:防己、杏仁、滑石各五钱,连翘、山栀各三钱,苡仁五钱,半夏三钱(醋炒),晚蚕沙三钱,赤小豆皮三钱。 水八杯,煮取三杯,分温三服,痛甚加片子姜黄二钱,海桐皮三钱。 (温病条辨宣痹汤) 治风瘙瘾疹,遍身皆痒,搔之成疮:蚕沙一升。 以水二斗,煮取一斗二升,去滓,温热得所以洗之,宜避风。 (圣惠方) 治外感头痛:蚕沙、白芷、大黄各三钱。 共研细末,调葱汤外敷。 (泉州本草)

17、 治风湿痛或麻木不仁:晚蚕沙一两。 煎汤,一日三回分服,临服时和入热黄酒半杯同服。 (现代实用中药) 治半身不遂:蚕沙二硕。 以二袋盛之蒸熟,更互熨患处。 仍以羊肚、粳米煮粥,日食一枚,十日即止。 (纲目) 治霍乱转筋,肢冷腹痛,口渴烦躁,目陷脉伏,时行急证:晚蚕沙五钱,生苡仁、大豆黄卷各四钱,陈木瓜三钱,川连(姜汁炒)三钱,制半夏、黄芩(酒炒)、通草各一钱,焦栀一钱五分,陈吴萸(泡淡)三分。 地浆或阴阳水煎,稍凉徐服。 (王士雄霍乱论蚕矢汤) 治烂弦风眼:以真麻油浸蚕沙二、三宿,涂患处。 (陈氏经验方一抹膏) 治迎风流泪:蚕沙(炒)四两,巴戟(去皮,用练肉)、马蔺花(去梗) 【功能主治】祛风

18、燥湿、清热活血。治风湿、皮肤不仁,关节不遂,急剧吐泻转筋,筋骨不遂、腰脚痛、腹内瘀血、头风赤眼。 蚕沙提取物现货供应。公司主营比例提取物如下: 菝契提取物5:1 巴戟天提取物10:1 百合提取物10:1 白芥子提取物10:1 白前提取物10:1 白芍提取物10:1 白芸豆提取物10:1 板蓝根提取物10:1 半枝莲提取物10:1 鳖甲提取物10:1 柏子仁提取物10:1 莱菔子炒提取物10:1 苍耳子提取物10:1 侧柏叶提取物10:1 葱白提取物10:1 蝉衣提取物10:1 炒谷芽提取物10:1 炒青皮提取物10:1 赤芍提取物5:1 赤小豆提取物10:1 虫草粉提取物10:1 茺蔚子提取物

19、10:1 川贝提取物10:1 川芎提取物10:1 川牛膝提取物10:1 大蒜提取物10:1 代赭石提取物10:1 胆南星提取物10:1 丹参提取物 8:1 淡竹叶提取物10:1 当归提取物10:1 地肤子提取物10:1 杜仲提取物10:1 煅龙骨提取物10:1 莪术提取物10:1 非洲仙人掌提取物20:1 佛手提取物10:1 茯苓皮提取物10:1 附片提取物10:1 茯神提取物10:1 浮小麦提取物10:1 公丁香提取物10:1 桂花提取物10:1 龟板提取物10:1 贯众提取物10:1 国产仙人掌提取物20:1 海金沙提取物10:1 海藻提取物10:1 黑豆提取物10:1 黑木耳提取物10:

20、1 黑芝麻提取物10:1 红花提取物10:1 琥珀提取物10:1 滑石提取物10:1 黄精提取物10:1 黄连提取物10:1 鸡内金提取物10:1 姬松茸提取物10:1 建曲提取物10:1 降香提取物10:1 韭菜籽提取物10:1 橘核提取物10:1 橘红提取物10:1 橘叶提取物10:1 款冬花提取物10:1 昆布提取物10:1 葵花籽提取物10:1 莲肉提取物10:1 龙胆草提取物10:1 龙葵提取物10:1 漏芦提取物10:1 路路通提取物10:1 芦荟提取物10:1 芦荟粉提取物20:1 鹿衔草提取物10:1 鹿茸提取物10:1 麦冬提取物4 : 1 麦冬提取物10:1 蔓荆子提取物1

21、0:1 玫瑰花提取物10:1 木瓜提取物10:1 木香提取物10:1 南瓜子提取物8:1 蒲黄提取物10:1 前胡提取物10:1 千年健提取物10:1 芡实提取物10:1 秦皮提取物10:1 青黛提取物10:1 青葙子提取物10:1 全蝎提取物10:1 瞿麦提取物10:1 肉桂提取物10:1 乳香提取物10:1 乳香提取物8:1 三七提取物10:1 三棱提取物10:1 桑白皮提取物10:1 桑白皮提取物5:1 桑寄生提取物10:1 桑椹提取物10:1 桑螵蛸提取物10:1 桑枝提取物10:1 山扁豆提取物10:1 蛇舌草提取物10:1 生龙骨提取物10:1 匙羹藤提取物5:1 桃仁提取物10:

22、1 五味子提取物10:1 五味子提取物10:1 吴茱萸提取物10:1 小茴香提取物10:1 续断提取物10:1 玄参提取物10:1 夜交藤提取物10:1 益母草提取物10:1 玉竹提取物10:1 泽泻提取物10:1 紫甘蓝提取物10 : 1 紫草提取物10:1 浙贝母提取物10:1 制南星提取物10:1 重楼提取物10:1 蚕沙提取物10:1欢迎来电咨询、订购! 我们将竭诚为您提供最优质的产品,和满意的服务!规格:10:1 性状:棕黄色粉末目数:80目检测方法:tlc包装:25公斤/桶保质期:2年完整介绍:    以上是关于蚕沙提取物的详情信息,如果您对

23、蚕沙提取物比较感兴趣,需要更详细的了解和咨询蚕沙提取物的有关资料, 欢迎致电8613572052991(联系人:苏小向),谢谢! 1. DNJ 的性质 代写MBA论文野尻霉素(nojirimycin,NJ)类化合物是一类哌啶类多羟基生物碱及其衍生物,其中对1-脱氧野尻霉素(1-deoxynojirimycin,DNJ)的研究较多。DNJ 为一种极性含N 化合物,其化学名称是3,4,5-三羟基-2-羟甲基四氢吡啶,分子式为C6H13NO4,相对分子质量为163。DNJ 具有对-葡萄糖苷酶的抑制作用,是降血糖、治疗糖尿病的有效成分,此外还具有抗病毒、抗肿瘤转移等药理作用

24、。近年来,国内外学者对DNJ 的来源、在生物体内的合成机制及化学合成方法进行了大量的研究探索,希望找到一种稳定、高效、经济的获取DNJ 的途径。 2. 天然DNJ 的来源 2.1 植物来源 1976 年,Yagi 等首次从桑根皮中分离到天然DNJ,并定名为“moranoline”。现在从桑树中发现并确定了分子结构的DNJ 类似物有18 种,其中对哺乳动物消化酶有抑制作用的有8 种。在所有被检测的植物中,桑树中的DNJ 含量最高,质量分数为0.1%0.5%。近几年来,国内外研究者对桑树中DNJ 的分布和含量变化进行了广泛的研究,发现桑树的各个部位几乎都含有DNJ,但其含量因桑品种、栽培地区和气候

25、以及树体部位的不同存在很大的差异,其中桑叶中的DNJ 含量还受叶位、发育阶段、采收时间和季节的影响,尤其是受桑品种、桑叶的发育阶段和采收季节的影响很大,并与其降血糖效果有密切关系。叶晶晶等研究表明,所测定的18 个桑品种中,DNJ 含量以秋雨和沙2×伦教109 最高,黄鲁最低,含量差异在1 倍左右;农桑14 号和陕桑305 两个桑品种在冬、春季不同发育时期桑叶中的DNJ 含量以冬芽、开叶期和成熟叶中较高,在缓慢生长期的含量较低;不同季节桑叶中的DNJ 含量均是嫩芽嫩叶成熟叶老叶,其中嫩芽和嫩叶中的DNJ 含量以晚秋最高,成熟叶中以夏季最高,而老叶中的DNJ含量以春季最高;桑枝皮中DN

26、J 的含量以中秋和晚秋期较高,夏季最低。殷浩等(2009)在最近的研究中发现,桑种子中含有很高浓度的DNJ,具有非常显著的降血糖效果,是一种很有开发价值的降血糖天然药物资源。 2.2 微生物来源 人们第一次获得野尻霉素的报道是在1967 年,Inouye 等从链霉菌Str.roseochromogenes R-468、Str. lavendulae SF-425 和 Str. nojiriensis n. sp.中分离到一种具有拮抗藤黄八叠球菌、黄单胞菌属、弗氏志贺菌生物活性的化合物,此种化合物经鉴定为野尻霉素。Frommer 等报道了来自芽孢杆菌(Bacillus)的糖苷酶抑制剂,因为是首次

27、从胶质芽孢杆菌(Bacillus macerans)中发现,因此定名为胶质芽孢杆菌酶,并进一步研究,确定了这种物质正是野尻霉素。此后,有多株可产糖苷酶抑制剂的芽孢杆菌被分离发现,如Bacillus macerans、 Bacillus megaterium、Bacillus circulans 、 Klebsiellapneumoniae 和Bacillus No.38-2(嗜碱细菌)等。Daniel 等报道芽孢杆菌菌株DSM704 可以产生一种人肠道的二糖酶抑制剂DNJ,并对其特性以及生产工艺进行了研究,发现该物质在碳源丰富时可以大量产生,并随着底物糖酵解的增加而增加(达到1 mg/mL),

28、在产生菌株中不可代谢,不能被用作单一碳源或氮源。Hardick 等也从芽抱杆菌的培养过滤液中分离得到了DNJ,并用同位素标记法对其在芽孢杆菌中的合成途径进行了研究。 2.3 昆虫来源 韩国学者Ryu 等首次报道了用家蚕5 龄幼虫经过冷冻干燥制成的全蚕粉具 有治疗糖尿病的作用,家蚕作为最早被发现体内含有DNJ 的昆虫引起了广泛关注。近年来,许多试验结果进一步证实了全蚕粉的降血糖功效。Asano 等报道了蚕体中的DNJ 含量是桑叶中的2.7 倍,指出家蚕消化酶已经适应了这种环境,使得对-葡萄糖苷酶有良好抑制作用的DNJ 却不能抑制家蚕中肠的糖苷酶活性。 近年来,本实验室较为系统地研究了家蚕对DNJ

29、 的富集作用。施新琴等研究发现,用不含桑叶粉的人工饲料饲养的蚕不含DNJ,说明家蚕自身不能合成DNJ,蚕体内的DNJ 直接来源于饲料,DNJ 含量与其取食饲料的DNJ 含量呈现明显的正相关关系,原种蚕中的DNJ 含量高于杂交种。殷浩等研究表明,家蚕对DNJ 的富集能力与性别、蚕品种和发育阶段有密切关系:雄蚕的富集效率高于雌蚕;不同蚕品种的DNJ 含量存在显著差异;蚕体内的DNJ 主要存在于血液、消化管和体壁中,丝腺中不含DNJ;家蚕幼虫期对DNJ 的积累和排泄存在周期性变化,每个龄期的前期和中期是蚕体积累DNJ 的阶段,蜕皮前及熟蚕前蚕体内DNJ 的含量迅速减少,蚕粪中含量增加,是DNJ 的排泄阶段,家蚕对食下桑叶中的DNJ 的累计富集率在5 龄第3 天左右达到高峰,这与Ryu 等所报道的物试验结果相一致。沈以红等的研究

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