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文档简介
1、植物组培实验室建设目录1、功能简述11)准备室12)灭菌室13)缓冲间24)无菌操作室25)培养室26)驯化室37)温室38)辅助实验室(非必要)3 细胞学实验室3 生理生化分析室42、设备及耗材清单41)试验设备清单42)常备试剂清单6 ms培养基必备试剂7 常备激素及辅助试剂7植物组培实验室建设1、功能简述植物组织培养实验室一般应包括准备室、洗涤灭菌室、无菌操作室、培养 室、缓冲间,这也是组织培养实验所必须具备的基本条件。要培养成大田苗还要有 相应的驯化室、温室。1)准备室用途:又叫化学实验室,进行一切与实验有关的准备工作。完成所使用的各 种药品的贮备、称量、溶解、器皿洗涤、晾置、培养基配
2、制与分装、培养基和培养 器皿的灭菌、培养材料的预处理等。设备:准备室应具备实验台、药品柜、水池、落水架、仪器、药品、防尘橱 (放置培养容器)、冰箱、天平(0.匹、o.ooolg分度各一台)、干热消毒柜(可 省去)、蒸憾水器(可省去)、酸度计(又称ph计,为节约成本和减少维护可用 ph试纸代替)、过滤灭菌器、培养皿、培养瓶、三角瓶、试管、电磁炉、水浴锅、 漏斗、量筒、刻度移液管(为操作简便起见可购买移液枪lml、5ml各一个代 替)、玻璃棒、酒精灯、银子、试管架、琼脂、纱布、棉塞、封口膜、大量元素、 微量元素、蔗糖、有机物和植物激素的母液(详细内容见附表)、naoh、盐酸、 滤纸、脱脂棉、橡皮筋
3、、牛皮纸等。图1准备室图2灭菌室2)灭菌室用途:完成各种器具的保存、培养基的灭菌等。设备:中央实验台、高压灭菌锅、超声波清洗器、干燥灭菌器(电烘箱) 70%的酒精、2%的次氯酸钠等。3)缓冲间用途:是进入无菌室前的一个缓冲场地,减少人体从外界带入的尘埃等污染 物。工作人员在此换上工作服、拖鞋,戴上口罩,才能进入无菌室和培养室。进入 无菌操作室前在此更衣换鞋,以减少进出时带入接种室杂菌。设备:2盏紫外灯、水槽、试验台、鞋帽架、柜子、灭菌后的工作服、拖 鞋、口罩等。图3缓冲间图4无菌室4)无菌操作室用途:也叫接种室,主要用于植物材料的消毒、接种、培养物的转移、试管 苗的继代、原生质体的制备以及一切
4、需要进行无菌操作的技术程序,是植物离体培 养研究或生产中最关键的一步。设备:紫外灯、空调、解剖镜、消毒器、酒精灯、接种器械(接种银子、剪 刀、解剖刀、接种针),实验台和搁架,还有超净工作台和整套灭菌接种仪器、甲 醛和高镒酸钾等杀菌药品。5)培养室用途:对接种到培养瓶等器皿中的植物离体材料进行控制条件下的培养的场 所。设备:安装日光灯照明的培养架(控温控光控湿)、摇床、自动控时器、紫 外灯、光照培养箱或人工气候箱、生化培养箱、除湿机、显微镜、温湿度计、空调 等。要求:约需1020平方米左右,培养室的大小可根据需要培养架的大小、数 目、及其他附属设备而定,其设计以充分利用空间和节省能源为原则。基本
5、要求是 能够控制光照和温度,并保持相对的无菌环境,因此,培养室应保持清洁和适度干 燥;为满足植物培养材料生长对气体的需要,还应安装排风窗和换气扇等培养室的 换气装置;为节省能源和空间,应配置适宜的培养架,并安装日光灯照明。图5培养室6)驯化室用途:组培苗(试管苗)移栽前进行炼苗。设备:空调机、加湿器、恒温恒湿控制仪、喷雾器。刀温室用途:保证试管苗不分季节地常年牛产。设备:温度控制装置、通风口、喷雾装置、光照调节装置、杀菌杀虫工具及相应药物。8)辅助实验室(非必要)根据研究或生产的需要而配套设置的专门实验室,主要用于细胞学观察和生理 牛化分析等。由于并非必要,因此该项目所涉及仪器设备不出现在后续
6、清单中。细胞学实验室功能:用于对培养物的观察分析与培养物的计数,对培养材料进行细胞学鉴定 和研究,由制片室和显微观察室组成。制片是获取显微观察数据的基础,配备有切 片机、磨刀机、温箱及样品处理和切片染色的设备。应有通风橱和废液处理设施。 显微观察室主要是显微镜和图像拍摄、处理设备。生理生化分析室功能:培养细胞产物为主要目的的实验室,应建立相应的分析化验实验室,随 时对培养物成分进行取样检查。大型次生代谢物生产,还需有效分离实验室。要 求:明亮、清洁、干燥、防止潮湿和灰尘污染。设备:离心机、倒置式生物显微镜及配套的摄影、录像和图像处理设备;电泳 仪、萃取和层析设备、紫外分光光度计、高效液相色谱仪
7、、气相色谱仪、酶联免疫 测定系统等,根据需要来配置。表1、组培实验室仪器配置表功能单元面积(平米)配置仪器准备室(兼 储藏室功 能)50药品柜、冰箱(柜)、水槽、操作台、纯水制水 器、酸度计、显微镜、天平、防尘柜、常用玻璃 仪器灭菌室15高压灭菌器、烘箱、缓冲室5紫外灯、鞋架、挂钩、医用白大褂接种室15紫外灯、内置空调、超净工作台、消毒器、酒精 灯、接种器械培养室50x2培养架(控光、温、湿)温室人于300平方米喷灌设施和可移动苗床2、设备及耗材清单1)试验设备清单表2、器材数量及参考价格品名规格数量单价总价实验台2mx4m1高压灭菌锅100l2超净工作台双人垂直流2空调落水架防尘橱冰箱2品名
8、规格数量单价总价天平o.olg、o.ooolg2干热消毒柜蒸谓水器酸度计过滤灭菌器电磁炉不锈钢锅18585培养架20摇床低于240转1自动控时器10紫外灯10光照培养箱或人工气候箱2生化培养箱1加湿器2喷壶5温湿度计2超声波清洗器1解剖镜1鞋帽架、柜子2工作服、拖鞋、口罩药品柜3水浴锅1脱脂棉1漏斗培养皿培养瓶及瓶盖250ml10000三角瓶150ml50三角瓶250ml50三角瓶500ml10试管5ml50试管15ml50试管25ml50试管塞、试管架移液吸管1ml6848移液吸管2 ml6848移液吸管5 ml68.551移液吸管10 ml128.5102温度计200度64.527品名规格
9、数量单价总价试纸5.4-7302.575玻璃棒91.513.5量筒2000 ml349147量筒1000 ml32060量筒500 ml33090量筒100 ml67.545烧杯500 ml96.558.5烧杯250 ml64.527不锈钢药勺9436容量瓶100 ml67.545容量瓶250 ml69.557容量瓶500 ml61378容量瓶1000 ml1216192白口小瓶1000 ml219189白口小瓶250 ml95.549.5洗耳球304120勺子986.7漏斗9218移液器l-100ul3248744移液器loo-loooul3248744移液器1000-5000ul32487
10、44消毒器jz-100-b 立式65803480酒精灯1296蹑子20cm1232384手术剪18cm1227324手术刀柄4#1223276手术刀片23#12336培养皿15 cm304.8144滤纸屮速滤纸11cm31030瓶盖6cm带透气膜1000000.2626000组培灯32w220套6514300花瓶鱼形620120白大褂大中小50261300帽子20240线手套501.575橡胶手套92)常备试剂清单ms培养基必备试剂表3、ms培养基必备试剂大量元素微量元素铁盐有机物其他kno3h3bo3feso47h2o肌醇蔗糖nh4no3mnso44h2ona2edta2h2o烟酸琼脂mgs
11、o47h2oznso4 7h2o盐酸硫胺素kh2po4na2moo42h2o盐酸毗哆醇caci2 2h2ocuso45h2o甘氨酸c0ci2 6h2oki常备激素及辅助试剂激素:6ba、naa、kt、2,4-d辅助试剂:hcl、naoh、cano3蛋白月东、活性炭、水解酪蛋白、95%乙醇、 70%乙醇、次氯酸钠、甲醛、高镒酸钾。测量学模拟试卷得分评卷人复查人一、单项选择题(每小题1分,共20分)在下列每小题的四个备选答案中选出一个正确的答 案,并将其字母标号填入题干的括号内。1. 经纬仪测量水平角时,正倒镜瞄准同一方向所读的水平方向值理论上应相差 (a ) oa 180°b 0
12、76;c 90°d 270°2. 1: 5000地形图的比例尺精度是(d )。a 5 m b 0.1 mm c 5 cm d 50 cm3. 以下不属于基本测量工作范畴的一项是(c)。a高差测量b距离测量 c导线测量 d角度测量4. 己知某直线的坐标方位角为220° ,则其象限角为(d ) oa 220°b 40°c 南西 50°d 南西 40°5. 由一条线段的边长、方位角和一点坐标计算另一点坐标的计算称为(a )。a坐标正算b坐标反算c导线计算d水准计算6.闭合导线在x轴上的坐标增量闭合差(a )。a为一不等于0的常数b
13、与导线形状有关c总为0 d由路线中两点确定7.在地形图中,表示测量控制点的符号屈于(d ) oa比例符号b半依比例符号c地貌符号d非比例符号&在未知点上设站对三个已知点进行测角交会的方法称为(a )。a后方交会 b前方交会 c侧方交会 d无法确定9. 两井定向屮不需要进行的一项工作是(c )。a投点b地面连接c测量井筒中钢丝长度d井下连接10. 绝对高程是地面点到(c )的铅垂距离。a坐标原点b任意水准面c大地水准而 d赤道面 11下列关于等高线的叙述是错误的是:(a )a. 高程相等的点在同一-等高线上b. 等高线必定是闭合曲线,即使本幅图没闭合,则在相邻的图幅闭合c. 等高线不能分
14、叉、相交或合并3715.bd. 25°293(t如图所示支导线,的坐标方位角为(a.75°303(t b. 15°30,30r, c. 45°30*3(t12. 下面关于非比例符号中定位点位置的叙述错误的是(b )a. 几何图形符号,定位点在符号图形中心b. 符号图形中有一个点,则该点即为定位点c. 宽底符号,符号定位点在符号底部中心d. 底部为直角形符号,其符号定位点位于最右边顶点处13. 下面关于控制网的叙述错误的是(d )a. 国家控制网从高级到低级布设b. 国家控制网按精度可分为a、b、c、d、e五等c. 国家控制网分为平面控制网和高程控制网d.
15、 直接为测图目的建立的控制网,称为图根控制网14. 下图为某地形图的一部分,各等高线高程如图所视,a点位于线段mn上,点a到 点m和点n的图上水平距离为ma二3mm, na=2mm,贝u a点高程为(a )a.36.4mb.36.6mc.37.4md.37.6m16. 三角高程测量要求対向观测垂直角,计算往返高差,主要目的是(d )a. 有效地抵偿或消除球差和气差的影响b. 有效地抵偿或消除仪器高和觇标高测量误差的影响c. 有效地抵偿或消除垂直角读数误差的影响d. 有效地抵偿或消除读盘分划误差的彫响17. 下面测量读数的做法正确的是(c )a. 用经纬仪测水平角,用横丝照准目标读数b. 用水准
16、仪测高差,用竖丝切准水准尺读数c. 水准测量时,每次读数前都要使水准管气泡居中d. 经纬仪测竖直角时,尽量照准目标的底部18水准测量时对一端水准尺进行测量的正确操作步骤是(d )。 a对中整平瞄准_读数a整平瞄准读数精平c粗平精平瞄准读数d粗平瞄准精平读数19. 矿井平面联系测量的主要任务是(d )b实现井上下高程的统一d提高井下导线测量的精度b井下井筒附近d井下任意位置的水准点a实现井上下平而坐标系统的统一c作为井下基本平面控制20. 井口水准基点一般位于(a )。a地而工业广场井筒附近共20分)c地而任意位置的水准点得分评卷人复查人二、填空题(每空2分,21水准测量中,为了进行测站检核,在
17、一个测站要测量两个高差值进行比较,通常采用 的测量检核方法是双面尺法和o22直线定向常用的标准方向有真子午线方向、磁北方向和坐标纵线方向。23地形图符号一般分为比例符号、_半依比例符号和不依比例符号。24井下巷道掘进过程屮,为了保证巷道的方向和坡度,通常要进行中线和的标定工作。25测量误差按其对测量结果的影响性质,可分为系统误差和一偶然误差。26地物注记的形式有文字注记、和符号注记三种。27象限角的取值范围是:090°28经纬仪安置通常包括整平和 。29为了便于计算和分析,对大地水准面采用一个规则的数学曲面进行表示,这个数学曲 面称为 参考托球面。30光电测距仪按照测量时间的方式可以
18、分为相位式测距仪和得分评卷人复查人31.竖盘指标差 竖盘分划误差三、名词解释(每小题5分,共20分)32. 水准测量利用水准仪测定两点间的高差33. 系统误差由客观原因造成的具有统计规律性的误差34. 视准轴仪器望远镜物镜和fi镜中心的连线得分评卷人复查人四、简答题(每小题5分,共20分)35. 简述测回法测量水平角时一个测站上的工作步骤和角度计算方法。 对屮,整平,定向,测角。观测角度值减去定向角度值36. 什么叫比例尺精度?它在实际测量工作屮有何意义?图上0.1毫米在实地的距离。可以影响地物取舍37. 简述用极坐标法在实地测设图纸上某点平面位置的要素计算和测设过程。38. 高斯投影具有哪些
19、慕本规律。得分评卷人复査人五、计算题(每小题10分,共2()分)39. 在 1: 2000 图幅坐标方格网上,量测出 cib = 2.0cm, ac = 1.6cm, ad = 3.9cm, ae - 5.2cm。试计算ab长度d八b及其坐标方位角a aro40-从图上量得点m的坐标xm= 14.22m, ym=86.71m;点a的坐标为xa=42.34m, ya=85.00m。试计算m、a两点的水平距离和坐标方位角。测量学标准答案与评分说明一、一、单项选择题(每题1分)i a; 2d;3c; 4d;5 a; 6c; 7 d; 8a; 9c; 10c;ii a; 12 d; 13b; 14a;
20、 15 b; 16a; 17 c; 18 d; 19 a; 20 a二、二、填空题(每空2分,共20分)21变更仪器高法22磁北方向23半依比例符号(或线状符号)24. 腰线25. 偶然误差26. 数字注记27大于等于0度且小于等于90度(或0° , 90° )28对中29旋转椭球体面30脉冲式测距仪三、三、名词解释(每题5分,共20分)31竖盘指标差:在垂直角测量中,当竖盘指标水准管气泡居中时,指标并不恰好指向其 正确位置90度或270度,而是与正确位置相差一个小角度x, x即为竖盘指标差。32水准测量:利用一条水平视线并借助于水准尺,测虽地面两点间的高差,进而由已知 点
21、的高稈推算出未知点的高程的测量工作。33系统误差:在相同的观测条件下,对某量进行了 n次观测,如果误差出现的大小和符 号均相同或按一定的规律变化,这种误差称为系统误差。34视准轴:望远镜物镜光心与十字丝屮心(或交叉点)的连线。四、四、简答题(每题5分,共20分)35(1)在测站点o上安置经纬仪,对屮,整平(1分)(2)盘左瞄准a点,读数la,顺时针旋转照准部到b点,读数lb,计算上半测回 角度 o=lbla;(2分)(3)旋转望远镜和照准部,变为盘右方向,瞄准b点读数rb,逆时针旋转到a 点,读数ra,计算下半测回角度o2=rb-ra;(3分)(4)比较o和02的差,若超过限差则不符合要求,需要重新测量,若小于限差, 则取平均值为最终测量结果o二(o1+o2)/2(5分)图上omm对应的实地距离叫做比例尺精度。(3分)其作用主要在于:一是根据地形图比例尺确定实地量测精度;二是根据地形图上需要 表示地物地貌的详细程度,确定所选用地形图的比例尺。(5分)37要素计算:从图纸上量算待测设点的坐
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