成鹅大肠杆菌病原的分离与鉴定

1、第 1 页 共 6 页成鹅大肠杆菌病原的分离与鉴定摘 要：目的对一群疑似大肠杆菌病的成年鹅进行病原的分离与鉴定，为该病的防治提供依据。方法挑取疑似死于大肠杆菌病成年鹅的心血、肝脏，接种于麦康凯琼脂培养基，37下培养 24h，制备抹片、革兰氏染色镜检、生化试验及药敏试验。结果在上述试验中分离到1 株革兰氏阴性小杆菌，该菌的生化试验结果与大肠杆菌一致。选择药敏试验中敏感的药物环丙沙星给病成鹅注射，连用3 天，得到了有效治疗，病鹅逐步恢复健康。结论该群病死鹅的发病原因为致病性大肠杆菌感染。【关键词】： p ：大肠杆菌；分离；鉴定；生化试验；药敏试验20_年 12 月，安徽休宁某养殖户饲养的1000

2、只140 日龄成鹅相继出现精神沉郁、采食量下降、排白色稀粪、消瘦等症状，发病几天后出现死亡。剖检病死鹅，观察到心包膜增厚，心包内充满大量淡黄色液体，肝脏表面覆盖有浅黄色的纤维性渗出物，肠道出血。本试验主要是为了查明该群鹅的发病原因，特对其进行细菌的分离鉴定，并通过药敏试验确定敏感药物，为该群病鹅的防治提供依据。第 2 页 共 6 页一、材料与方法1. 材料（1）病料来。安徽休宁某养殖户送检的疑似感染大肠杆菌病死成年鹅3 只。（2）培养基。蔗糖、乳糖、麦芽糖、葡萄糖半固体发酵管，蛋白胨水，葡萄糖蛋白胨水，麦康凯琼脂培养基，营养琼脂培养基，伊红美蓝琼脂培养基。2. 方法（1）细菌的分离培养。无菌采

3、取病死鹅的心血、肝脏，用接种环划线接种于麦康凯琼脂培养基中，37下培养24h。然后挑取单个红色的典型菌落接种到伊红美蓝琼脂平板上，37培养 24h，进行革兰氏染色镜检，最后从伊红美蓝琼脂平板上挑取紫黑色带金属光泽的单个典型菌落，接种到营养琼脂平板上， 37培养24 h ，获得纯培养物，置4冰箱备用。（2）细菌抹片制备及革兰氏染色镜检。从麦康凯琼脂培养基上挑取单个粉红色的菌落，制备抹片、革兰氏染色镜检。（3）细菌的生化试验。主要进行了糖类分解试验、吲哚试验、甲基红4816001.gif style=ma_-width:450p_ width=450p_ alt=成鹅大肠杆菌病原的分离与鉴定 ti

4、tle=成鹅大肠杆菌病原的分离与鉴定/ （mr ）试验及 vp试验第 3 页 共 6 页（4）细菌药物敏感试验。k-b 纸片扩散法：将被检细菌用灭菌的涂布棒均匀涂布于营养琼脂平板上，用无菌镊子将各种抗菌药物圆纸片，分别贴于培养基表面，37培养1824h，根据药物纸片周围有无抑菌圈及其直径大小，来判断该菌对各种药物的敏感程度。二、结果与分析p 1. 病死鹅的病理剖检变化心包膜增厚，心包内充满大量淡黄色液体，肝脏表面覆盖有浅黄色的纤维性渗出物，肠道出血。2. 细菌的分离培养结果从上述病死鹅的心血、肝脏中分离到1 株细菌，该菌在营养琼脂平板上37 培养 24 h 后，形成中等大小，圆形微凸起，表面光

5、滑湿润，浅灰白色半透明菌落；在麦康凯培养基上形成中等大小，表面光滑湿润的粉红色菌落；在伊红美蓝琼脂平板上形成深紫黑色、光滑、湿润、带有金属光泽的圆形菌落。3. 革兰氏染色镜检结果该分离菌经革兰氏染色，在油镜下均可见散在的红色、中等大小、两端钝圆的无芽胞短直杆菌。多单个散在，个别成双排列，革兰氏阴性，符合大肠杆菌的形态特征。4. 细菌的生化试验结果第 4 页 共 6 页该菌能发酵葡萄糖、乳糖、麦芽糖产酸产气，mr试验呈阳性， vp试验呈阴性，吲哚试验呈阳性。5. 体外药物敏感试验结果见表 1。由表 1 可知：该细菌的耐药谱较广。三、讨论与小结1. 该株大肠杆菌的确定及特性分析p 通过对送检的疑似

6、大肠杆菌病死鹅进行细菌的分离培养及生化试验鉴定，其生化试验结果与大肠杆菌一致，因此，引起成鹅死亡的病原为致病性大肠杆菌。2. 该株大肠杆菌的耐药性分析p 从药敏试验结果可看出：该株大肠杆菌对红霉素、头孢拉定和妥布霉素等10 多种抗菌药物均不敏感；对先锋噻肟、头孢哌酮、环丙沙星等8 种抗菌药物敏感。建议养殖户使用环丙沙星作为治疗该病首选药进行治疗。大肠杆菌耐药性不仅仅是反复用药的结果，而且是大肠杆菌在不利环境中增强生存能力的自身防卫系统的重要组成部分，这也是大肠杆菌容易产生耐药性的本身原因。大肠杆菌耐药性由药物诱发作用所引起：一是有病乱投药。二是长期滥用药，这是诱发大肠杆菌产生耐药性的主要原因。

7、由于抗生素的大量使用，细菌的耐药性越来越强，耐药菌第 5 页 共 6 页株出现的也越来越多，不少耐药菌株不仅能耐受 1 种或少数几种抗生素，而且能够耐受多种抗生素，由此而造成的危害十分严重。三是小剂量用药，不仅未达到杀菌的目的，反而逐步诱发。四是联合用药，这也是加快大肠杆菌产生耐药性的另一个原因 11 。因此，科学合理地用药是减少细菌产生耐药性的最有效的方法。所以，应尽量提高对疾病诊断的准确率，减少不必要的用药，并严格用药剂量和疗程。3. 该病的治疗和综合防治该鹅群中一旦发生本病应立即隔离治疗。本病的治疗应选择在疾病发生的早期，因大肠杆菌病发生的后期使用抗菌素往往疗效不理想。该成年鹅群饮水时，上午水中添加环丙沙星粉，下午水中添加电解多维和葡萄糖粉以增加机体抵抗力，连用 3-5 天。同时保持鹅舍清洁干净，粪便及时清除，堆积发酵进行无害化处理；鹅舍及活动场地每天用消毒药进行喷雾消毒1 次，连用 3 天。经此治疗方案处理后，除了少数成鹅由于病程时间较长体况