2022年2022年DNA的粗提取与鉴定教案

1、精选学习资料 - - - 欢迎下载学习必备欢迎下载教案课题dna 的粗提取与鉴定本试验既为对组成细胞化合物的验证,也为加强同学对细胞中化合物的提取原理.方法.技巧的懂得把握,同时仍为历年来各种考核的热点；精品学习资料精选学习资料 - - - 欢迎下载教材分析学情分析教材第一介绍了该试验的“试验原理” ；教材接着说明白dna 的粗提取与鉴定的目的要求；教材第三部分清晰地列出了该试验的材料用具；教材第四部分更为具体地介绍了该试验的方法和步骤；通过必修 2遗传与进化的学习,同学已经明白了证明dna 为主要的遗传物质的试验证据,知道生物体的外形之所以能够遗传给后代,为由于生物体内具有dna 或 rna

2、 这些遗传物质；通过本课题的学习,使同学对 dna 有肯定的感性熟悉；精品学习资料精选学习资料 - - - 欢迎下载精品学习资料精选学习资料 - - - 欢迎下载教学目标1.学问目标懂得 dna 的理化特性及依据其理化特性而提取和鉴定的原理；2.才能目标（ 1）初步把握 dna 的粗提取和鉴定的方法；（ 2）在对试验原理.步骤的懂得和分析过程中进展同学的科学思维；3.情感.态度.价值观在科学试验过程中培育同学严谨比较细致.实事求为的科学态度；精品学习资料精选学习资料 - - - 欢迎下载教学重点dna 的粗提取与鉴定方法及其相关原理教学难点dna 的粗提取与鉴定方法及其相关原理教学资源相关图片

3、.视频教学过程教学阶段老师活动同学活动设计意图时间精品学习资料精选学习资料 - - - 欢迎下载这节课, 我们一起学习“ dna 的粗提取与鉴定”技术；板书： dna 的粗提取与鉴定dna的提取技术为整个基因工程技术基础；基本上,不论为出于何种目的的分子生物学试验,大到被称为“人类阿引入倾听波罗方案”的人类基因组方案,小到今天已经被我们熟知的亲子鉴定, dna 提取技术都为其中基础的基础；而其他诸 如 rna的提取,质粒的提取等试验,都可以说为参考这一技术改进,或者重 新设计出来的；开门见山, 使同学明 白 dna 提取技术的 重要性,引发同学的 学习爱好精品学习资料精选学习资料 - - -

4、欢迎下载dna的粗提取试验这节课,我们一起学习dna的粗提取材料与鉴定技术；的选第一,我们应当选取合适的试验材料；精品学习资料精选学习资料 - - - 欢迎下载学习必备欢迎下载与鉴择问题：教材中列举了许多中材料,请你定从中选出 2-3 种；摸索.回答原就：凡为含有dna的生物材料都可使 学生明以考虑,但为,选用dna含量相对较高的生物组织,胜利的可能性更大；白 为要 选什用么鸡那么教材中挑选鸡血细胞液作为试验材血 细胞液精品学习资料精选学习资料 - - - 欢迎下载料,而相对于其他材料鸡血细胞液,有什么优点呢？1.鸡为真核生物,真核生物的 dna 都在染色体上；2.鸟类的血细胞核大,dna多（

5、从核dna 数目来看, 猪 38 条,鸡 78 条,哺为材料精品学习资料精选学习资料 - - - 欢迎下载乳动物血 0 条,猕猴桃 58 条,洋葱 16条,豌豆 14 条,菠菜 12 条,大肠杆菌1 条）3.不需要破除细胞壁选用鸡血细胞液仍有一个好处鸡血比较简单获得,那么我们为什么不用哺乳动物的红细胞呢？哺乳动物成熟的红细胞没有细胞核问题：鸡血细胞液可以直接用吗？柠檬酸钠抗凝问题：鸡血细胞虽然没有细胞壁,但为摸索.回答使 学生知依旧有细胞膜,以你所学的学问,有什道 破碎动么比较简便但为可行的方法可以破裂细物 细胞的胞膜？方 法和原生物会考的试验为质壁分别,你仍记得理方法和原理吗 .所以为了破裂

6、鸡血细胞,我们可以反其破裂道而行之,在鸡血细胞液中加入肯定量细的蒸馏水,使其吸水胀破,达到破裂细胞,胞的目的；释放加入蒸馏水的同时,要用玻璃棒进行搅dna拌方法：单向,快速, 5min,速度力气不要过于猛烈,防治打碎dna ；目的：加速血细胞破裂问题：这为我们获得的将为含有细胞膜.细胞器的碎片液体,我们如何初步获得含有 dna 的液体 .过滤精品学习资料精选学习资料 - - - 欢迎下载学习必备欢迎下载精品学习资料精选学习资料 - - - 欢迎下载可以用滤纸过滤吗？不行以,孔径太小；需要用到3-4 层纱布,除去一些颗粒较大的杂质,获得含 有 dna 的滤液；这时 dna 在哪里？滤液里；板书：

7、 破裂细胞,释放dna对于动物细胞我们可以利用细胞的渗透压来破裂细胞,但为许多情形下,人们不得不面对植物材料,那么我们为不为仍可以通过加入肯定量的蒸馏水来涨破细胞呢？植物细胞有细胞壁的支持和爱护,因此吸水不会涨破；我们通常通过研磨来破裂植物细胞的细胞壁；在研磨的过程中,一般仍会加入洗涤剂和食盐；洗涤剂的作用：洗涤剂也分为亲水基团和亲脂基团,可 以与细胞膜中的蛋白质结合, 使之溶解,进而瓦解细胞膜；食盐的作用：食盐中主要含有nacl,有利于 dna 的溶解；问题：这时的滤液可能含有哪些细胞成分？主要有 rna .核蛋白.多糖等那么我们应当如何将dna单独分别出来？板书： 去除滤液中的杂质提取生物

8、大分子的基本思路为选用肯定的物理或化学方法分别具有不同物理或去除化学性质的生物大分子；对于dna的滤液粗提取而言,就为要利用 dna 与 rna .中的蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面 杂质的差异,提取 dna ,去除其他成分；背景介绍 ;dna 的溶解性图片： dna 在 nacl 溶液中的溶解度曲线问题：在什么浓度下, dna 的溶解度最小？ dna 在 nacl 溶液中的溶解度为如何变化的？在 nacl 溶液浓度低于0.14 mol/l 时 ,摸索.分析.回答使 学 生 把握 盐 析 法的 原 理 与方法精品学习资料精选学习资料 - - - 欢迎下载学习必备欢迎下载dna 的溶解度随

9、nacl 溶液浓度的增加而逐步降低； 在 0.14 mol/l 时,dna 溶解度最小；当nacl 溶液浓度连续增加时, dna 的溶解度又逐步增大；如何通过掌握 nacl 溶液的浓度使 dna在盐溶液中溶解或析出？当氯化钠的物质的量浓度为2 mol l时,dna 的溶解度最大, 浓度为014 mol l 时, dna的溶解度最低；利用这一原理,可以使dna在盐溶液中溶解或析出为什么反复地溶解与析出dna ,能够去除杂质？用高浓度的盐溶液溶解dna ,能除去在高盐中不能溶解的杂质；用低盐浓度使dna 析出,能除去溶解在低盐溶液中的杂质；第一步：在浓度较高的 nacl 溶液溶液中核蛋白简单解聚,

10、游离出的 dna 溶解在溶液中；方法：在溶液中加入两倍体积的浓度为2mol/l 的 nacl 溶液,用玻璃棒沿一个方向搅拌 1min,使 dna 充分溶解；板书：（ 1）溶解细胞核内的dna其次步：加蒸馏水降低 nacl 溶液浓度,使 dna析出；方法：缓慢贴壁加入蒸馏水,并轻轻地沿一个方向不停地匀称搅拌,以利于dna 分子的附着和缠绕； 同时应留意控制加水量,使nacl溶液的终浓度为0.14mol/l ,直到溶液中丝状物不再增加时为止；板书：（ 2）dna 的析出在刚才试验中我们利用dna在不同浓通过对,其他 两 种 方度 nacl 溶液中溶解度不同的特性,去摸索.分析.案的分析,除杂质；回

11、答使 学 生 深那么课本中仍给出了其他两种方案,请入 理 解 纯你阅读教材p56,摸索这两个方案的原化 dna的理；方 法 和 原精品学习资料精选学习资料 - - - 欢迎下载学习必备欢迎下载方案二：直接在滤液中加入嫩肉粉,反理应 10-15min嫩肉粉的主要成分为木瓜蛋白酶,利用蛋白酶分解杂质蛋白,从而使提取的dna 与蛋白质分开方案三：将滤液放在60-75的恒温水浴箱中保温 10-15min；利用的为 dna和蛋白质对高温耐受性的不同,从而使蛋白质变性,与dna 分别；精品学习资料精选学习资料 - - - 欢迎下载dna的初步纯化dna的鉴过滤：用 34 层纱布对 dna 稀释液进行过滤,

12、滤过蛋白质,收集 dna 的粘稠物；我们刚才说了dna提取技术为分子生物学技术的基础,但假如提取的dna 量不够且其中含有较多杂质,为无法用 于其它操作的；所以我们必需对dna 进行进一步的纯化；原理也为dna的溶解性；背景介绍：dna 不溶于酒精溶液, 但为细胞中的某些蛋白质就溶于酒精；在试验中,我们 可以使用预冷的酒精,使dna能够更好地凝聚方法：将 dna 粘稠物再溶解,连续用 2mol/l 的 nacl 溶液 20ml 溶解 dna 黏稠物, 仍然沿一个方向不停搅拌 3min,使 dna充分溶解；过滤:用 34 层纱布进行过滤,滤去杂质,收集含有 dna 的滤液；纯化：向滤液中贴壁缓慢

13、加入50ml 预冷的体积份数为95%乙醇,并用玻璃棒朝一个方向缓慢.匀称地搅拌,溶液中 会显现 dna 丝状物；板书： dna 的初步纯化预冷的酒精具有以下优点：1.抑制核酸水解酶活性, 防止 dna 降解2.降低分子运动,易于形成沉淀析出3.低温有利于增加 dna 分子柔韧性,削减断裂原理介绍：二苯胺法在沸水浴的条件下,dna遇二苯胺变摸索.分析使 学 生 知道 dna 纯化 的 原 理和方法精品学习资料精选学习资料 - - - 欢迎下载学习必备欢迎下载精品学习资料精选学习资料 - - - 欢迎下载定蓝； 方法：溶解：在物质的量浓度为 2mol/l 的 nacl 溶液 5ml,放入丝状物,

14、用玻璃棒搅拌, 使之溶解；显色：加入 4ml 的二苯胺试剂； 混合匀称后,将试管置于沸水中加热5min；问题：假如溶液变蓝为否能说明dna的存在 .设置对比组：在5ml 体积的 2mol/l 的nacl 溶液中加入 4ml 的二苯胺试剂, 置于沸水中加热5min；对比：除了可以使用二苯胺法,仍有什么方法可以鉴定dna ？用甲基绿溶液直接滴在有dna丝状物的载玻片或玻棒上,呈蓝绿色反应；只 用一种即可,不混合用；前者要加热, 后者不加热板书： dna 的鉴定我们依据所需分别物质与其他物质物理或者化学性质的不同,来提取生物大分子物质；而通过今日的学习,我们知道dna有以下物理或者化学的特性为与其他

15、生物大分子物质不同的：在 nacl 溶液浓度低于0.14 mol/l 时 ,dna 的溶解度随 nacl 溶液浓度的增加而逐步降低； 在 0.14 mol/l 时,dna 溶解度最小；当nacl 溶液浓度连续增加时, dna 的溶解度又逐步增大；dna 不溶于酒精溶液, 但为细胞中的某些物质就可以溶于酒精； 利用这一原理,摸索.分析.回答使 学 生 知道 dna 鉴定 的 原 理和方法精品学习资料精选学习资料 - - - 欢迎下载小结可以将 dna 与蛋白质进一步分别蛋白酶能水解蛋白质,但为对dna没有影响大多数蛋白质不能忍耐60 80°c 的高温,而 dna 在 80°c 以上才会变性洗涤剂可以溶解细胞的细胞膜,去除脂 质和蛋白质 、但对 dna 没有影响在沸水浴的条件下,dna遇二苯胺变蓝；因