过硫酸氢钾复合盐消毒作用试验研究

1、过硫酸氢钾复合盐消毒作用实验研究过硫酸氢钾复合盐是国内新近生产的一种非氯氧化消毒剂，其水溶液接近 中性，溶解水后产生各种高能量、 高活性的小分子的自由基、 活性氧衍生物等过 氧化氢的衍生物， 能破坏微生物细胞膜的通透性屏障， 使细胞内容物流失， 丧失 能量依赖性膜运输系统的功能， 并且可与核酸中金属离子如钙、 铁等结合， 产生 自由-OH基，作用于DNA的磷酸二酯键而导致其断裂1。对RNA亦有类 似的破坏作用 2。过硫酸氢钾复合盐作为水处理消毒剂具有很强的氧化能力， 可以杀灭水中微生物，去除污水中的有机物，其代谢产物仅使水中的 K+ 、SO2 4+有少许增加，不会对人类和环境带来影响 3。为观

2、察验证其消毒效果，对 过硫酸氢钾复合盐的消毒作用进行了实验研究。1 材料与方法1.1 材料1.1.1 过硫酸氢钾复合盐 白色颗粒结晶，以三合盐的形式组合，分子式为 :2KHS O5-KHSO5-K5SO4，分子量为614.7,为一种无机化合物，浙江省上虞洁华化工 有限公司产品，其有效成分含量约为 70%-75%。消毒时浓度为 1 0- 1 60mg/L 。1.1.2供试菌种金黄色葡萄球菌（ATCC6538）、绿脓杆菌（ATCC2027 ）、枯 草杆菌黑色变种（ATCC9372）、大肠杆菌（ATCC8040）。以上菌种均购自中 国菌种保藏中心，由黑龙江省佳木斯大学基础医学院微生物教研室保藏。1.

3、1.3 HBsAg阳性血清用ELISA法检测，滴度为1:4096,由黑龙江省佳木斯大学 第一附属医院检验科提供。1.1.4培养基普通肉汤培养基 配方为4牛肉膏3.0g，蛋白胨10.0g, NaCl5.0 g,水1000ml, PH=7.47.6。改良沙氏肉汤培养基，参照文献4自配。1.1.5 实验动物 黑龙江省佳木斯大学实验动物中心提供。1.2 试验方法1.2.1 中和剂选择试验 5 试验菌为大肠杆菌与金黄色葡萄球菌。中和试验设 6 个试验组： 消毒剂+菌悬液；消毒剂+菌悬液）+中和剂；中和剂+菌悬 液；消毒剂+中和剂）+菌悬液；磷酸盐缓冲液（PBS） +菌悬液；未 接种菌的培养基对照。试验结

4、果，当第 6组不长菌，第 3、 4、 5组组间菌数相差 不超过10%，第1组不长菌或长菌数远少于第 2组，第2组长菌数超过100cfu/ ml时，为所选中和剂浓度。1.2.2悬液定量杀菌试验试验菌为大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌与枯 草杆菌黑色变种芽抱将0.5ml菌悬液与45ml消毒液混匀，作用至预定时间，取 0.5ml菌药混合液，加入45ml中和剂中，混匀。中和作用5min,取该液0.5ml 接种平皿，倾注普通营养琼脂并混匀。于 37C培养48h,计数菌落数，计算杀灭 率。1.2.3乙肝病毒表面抗原破坏试验 用含5%小牛血清的ABS将纯化乙肝病毒表面 抗原稀释成其含量为试剂灵敏度 50

5、000倍，50ul加入反应孔中，加入50ul消毒 液使其终浓度分别达到40,80,160ml/L，作用不同时间。阴性对照为含5%小牛血 清PBS。用ELISA法检测HBsAg抗原性，以试验组 OD值（S）与阴性对照O D值（N）的比值（S/N） >2.1判为HBsSg灭活有效。2结果2.1中和剂试验以含40mg/L过硫酸氢钾复合盐加大肠杆菌、金黄色葡萄球菌后作用5min后, 加中和剂作用5min观察中和作用。所选中和剂为1%硫代硫酸钠。结果见表1。 表1消毒剂中和试验结果组别试验困金黄色葡萄球菌（cfu/ml ）大肠杆菌（cfu/ml）（消毒剂+中和剂）+困悬液3 100 0001 11

6、2 000中和剂+菌悬液3 100 0001 120 000（消毒剂+困悬液）+中和剂139260消毒剂+困悬液00对照3 160 0001 200 000注：试验温度为20E，结果为3次平均值。2.2悬液定量消毒试验1040mg/L过硫酸氢钾复合盐对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的杀灭率均为100%,对白色念珠菌的杀灭率均大于 99.50%。但未观察到对枯草杆菌黑色变种 芽抱的杀灭作用。结果表2。表2过硫酸氢钾对悬液中细菌的杀灭效果试验困株过硫酸氢钾浓度(mg/L )对照组平均菌数( cfu/ml )试验组残留菌落数(c fu/ml )平均杀灭率(%)大肠杆菌404.5 X 10 70100.00

7、200100.00100100.00金黄色葡萄球402.2 X1070100.00菌202099.999103099.998白色念珠菌402.2 X 1075599.90209399.9710200099.58枯草芽抱杆菌405.3 X1075.3 X1070变种205.3 X1070105.3 X10702.3过硫酸氢钾复合盐对HBsAg表面抗原灭活试验结果见表3表3过硫酸氢钾复合盐对乙肝病毒表面抗原灭活试验过硫酸氢钾复合盐浓度(ml/L )不同时间作用结果(min)51015201601.2731.0911.091801.8131.3641.636401.4540193讨论自20世纪70年

8、代始，三氯甲烷、一溴二氯甲烷、二溴一氯甲烷和溴仿等氯化消毒副产物相继在饮用水中被检出，这些副产物有许多是三致”物质m,氯化消毒工艺的地位受到了挑战和质疑，控制和减少饮用水消毒副产物成为人们特别 关注的课题。近年来随着工业研制方法的改进，过硫酸氢钾复合盐的应用逐渐受到人们的 关注。过硫酸氢钾复合盐用于水消毒时，几乎不产生三氯甲烷及其它有机卤代物。 与氯相比，对PH有较宽的适应范围，当PH>6.5时，杀菌效率高于氯系列消毒 剂6。过硫酸氢钾复合盐性质稳定，储存、运输方便，水溶液氧化能力强， 作用温和，可以去除水中色度、臭味、锰等；在水中保持的残留量时间较长6。 过硫酸氢钾复合盐不仅可以通过其

9、氧化作用杀灭微生物，而且可以清除水中的有机物N。本项目试验结果表明，过硫酸氢钾复合盐溶液浓度为1040mg/L时，接触时间为5min即对细菌繁殖体，如大肠杆菌、金黄色葡萄球菌具有较强的杀灭作 用，杀灭率达100%;对真菌也有一定的杀灭作用，杀灭率 >99.50%;但对细菌 芽抱及乙肝病毒表面抗原未观察到其灭活作用。有机物的存在对过硫酸氢钾复合盐的杀菌效果影响明显。在使用过程中可根 据实际情况如消毒目标物的污染程度、有机物含量等因素相应调整使用浓度。参考文献1张文福 过氧化氢消毒研究进展J，中国消毒学杂志，1992，( 9) 3:179.2 俞晓峰，梁增辉.过氧化氢对白色念珠菌的超微结构及酸性磷酸酶的影响J.消毒与灭菌,1987.4:183.3Sharma,Virender K,Potassiumferrate(VI):an wnvironmentally frienly oxidant J, Advances in Environmental Research,