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1、MKM环凯微生物科技饮用水大肠菌群检测方法大肠菌群是指在37C培养24h内能发酵乳糖产酸、产气的兼性厌氧的革蓝 氏阴性无芽抱杆菌的总称。主要由肠杆菌科中四个属内的细菌组成, 即埃希氏杆 菌属、柠檬酸杆菌属、克雷伯氏菌属和肠杆菌属。水的大肠菌群数是指100 mL水检样内含有的大肠菌群实际数值,以大肠菌 群最近似数(MPN表示。在正常情况下,肠道中主要有大肠菌群、粪链球菌和厌 氧芽抱杆菌等多种细菌。这些细菌都可以随人畜排泄物进入水源,由于大肠菌群 在肠道内数量多,所以,水源中大肠菌群的数量,是直接反映水源被人畜排泄物 污染的一项重要指标。目前,国际上已公认大肠菌群是粪便污染的指标。因而对 饮用水必
2、须进行大肠菌群的检查。水中大肠菌群的检测方法,常用多管发酵法和滤膜法。多管发酵法可适用于 各种水样的检验,但操作繁琐,需要的时间较长。滤膜法仅适用于自来水和深井 水,操作简单、快速,但不适用于杂质较多、易于堵塞滤孔的水样。(一)水样的采集供细菌学检验的水样,必须按一般无菌操作的基本要求采集,并保证再运送、 贮存过程中不受污染。水样从采集到检验不应超过 4h,在04C下保存不应超 过24h,如不能在4h内分析,应在检验报告上注明保存时间和条件。1、 自来水取样:应在水龙头打开放水 5mi n,再用无菌容器接取水样,待分 析。如水样内含有余氯,则采样瓶灭菌后按每500m冰样加3%Na2S2O3.5
3、H2溶 液1mL2、江、河、湖、池自然水体取样:可用采样器,采样瓶应先灭菌。采样后, 瓶内应留有空隙。如果与其他化验项目联合取样,细菌学分析水样应采在其他样 品之前。(二)初发酵试验1. 水样稀释:制备水样10-1、10-2的稀释液,方法为用无菌移液管吸取水 样10mL放于盛有90mL无菌水和若干玻璃珠的锥形瓶中,充分振荡使混合均匀, 并使其中的细菌尽量呈单个存在,即为10-1稀释液;再从10-1制备10-2稀释液。 以此类推,稀释到所需倍数。2. 接种和培养:以无菌操作于5支三倍浓缩培养基(接种前一定应先检查杜 汉氏小管内有无气泡)中各加入水样10mL 5支普通培养基试管中加入水样1mL5支普通培养基试管中加入10-1稀释液1mL小心混匀放入37 C培养箱中培养 24h。此即5管法。3. 结果观察:37C中培养24h后取出观察,观察有无气体(杜汉氏小管内有 无气体)和酸产生(培养基有无变色)。在48h之间,培养管内倒置的杜汉氏小管 内有任何量的气体积累,或培养基颜色从紫色变为黄色,便可初步断定为阳性反 应
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