微生物复习资料

1、1.微生物包括哪些类群?非细胞型生物：病毒、亚病毒细胞型生物：原核微生物：古细菌、真细菌（包括粘细菌和蓝细菌）、放线菌、立克次氏体、支原体和衣原体；真核微生物：丝状真菌、酵母菌、大型真菌（蕈菌）、显微藻类和原生动物2.柯赫对微生物学的贡献有哪些？阐明柯赫原则的主要内容.贡献：对微生物学基本操作技术方面的贡献 a）细菌纯培养方法的建立 土豆切面 营养明胶 营养琼脂（平皿） b）设计了各种培养基，实现了在实验室内对各种微生物的培养 c）流动蒸汽灭菌 d）染色观察和显微摄影对病原细菌研究的贡献： a）具体证实了炭疽杆菌是炭疽病的病原菌 b）发现了肺结核病的病原菌（1905年获诺贝尔奖）柯赫原则： 在

2、每一相同病例中都出现这种微生物要从寄主分离出这样的微生物并在培养基中培养出来用这种微生物的纯培养接种健康而敏感的寄主，同样的疾病会重复发生从试验发病的寄主中能再度分离培养出这种微生物来3.原核微生物和真核微生物在细胞结构和功能方面有那些区别？比较项目真核生物原核生物细胞大小较大（通常直径>2m）较小（通常直径<2m）若有壁，其主要成分纤维素、几丁质等多数为肽聚糖细胞膜中甾醇有无（仅支原体例外）细胞膜含呼吸或光合组分无有细胞器有无鞭毛结构如有，则粗而复杂（9+2型）如有，则细而简单细胞质线粒体有无溶酶体有无叶绿体光合自养生物中有无真液泡有些有无高尔基体有无微管系统有无流动性有无核糖体

3、80S（指细胞质核糖体）70S间体无部分有贮藏物淀粉、糖原等PHB等细胞核核膜有无DNA含量低（约5%）高（约10%）组蛋白有无核仁有无染色体数一般>1一般为1有丝分裂有无减数分裂有无生理特征氧化磷酸化部位线粒体细胞膜光合作用部位叶绿体细胞膜生物固氮能力无有些有专性厌氧生活罕见常见化能合成作用无有些有鞭毛运动方式挥鞭式旋转马达式遗传重组方式有性生殖、准性生殖等转化、转导、接合等繁殖方式有性、无性等多种一般为无性（二等分裂）4.细菌细胞壁的结构与化学组成是怎样的？什么叫肽聚糖？G+菌与G-菌的细胞壁结构和化学组成有何差异？细胞壁的结构与化学组成：肽聚糖、磷壁酸、类脂质、蛋白质肽聚糖：是由双

4、糖单位，四肽尾还有肽桥聚合而成得多层网状大分子结构。革兰氏阳性菌：肽聚糖（90%）、磷壁酸（0%）革兰氏阴性菌：肽聚糖（510%）、脂多糖、磷脂、蛋白质5.用细菌的细胞壁结构和化学组成解释革兰氏染色的机制. 革蓝氏染色机制：通过结晶紫液初染和碘液媒染后，在细菌的细胞膜内可形成不溶于水的结晶紫液和碘液的复合物，G+细菌由于其细胞壁较厚，肽聚糖网层次多和交联致密，因此遇脱色剂乙醇处理时，因失水而使网孔缩小，再加上它不含类脂，故乙醇的处理不会溶出缝隙，因此能把结晶紫与碘的复合物牢牢留在壁内，使其保持紫色。反之，G-细菌的细胞壁薄，外膜层类脂含量高，肽聚糖层薄，交联度差，遇脱色剂乙醇后，以类脂为主的外

5、膜迅速溶解，这时薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出，因此细胞褪成无色。再经番红、沙黄等红色染料复染，就使G-细菌呈现红色，而G+细菌则保留紫色。6.细菌细胞有哪些基本构造和特殊构造？细菌的繁殖方式.基本构造：细胞壁，细胞膜，细胞质和内含物，核区特殊构造：糖被，鞭毛，菌毛，性毛，芽孢和其他休眠构造，伴孢晶体繁殖方式：裂殖，芽殖7.什么叫糖被、芽孢、伴胞晶体和菌毛？细菌的细胞核特点.糖被：位于某些细菌细胞壁外的一层厚度不定的透明胶状物质。芽孢：某些细菌在其生长发育的后期，在细胞内形成一个圆形或椭圆形、厚壁、含水量低、抗逆性强的休眠体，称为芽孢，又称内生孢子。伴胞晶体：又称内毒素。少数

6、芽孢杆菌产生的糖蛋白昆虫毒素。例如苏云金芽孢杆菌，在形成芽孢的同时，会在芽孢旁形成一颗菱形、方形或不规则形的碱溶性蛋白质晶体，称为伴孢晶体。菌毛：又称纤毛、伞毛、线毛或须毛，是一种长在细菌体表的纤细、中空、短直且数量较多的蛋白质类附属物，具有使菌体附着于物体表面上的功能。细胞核特点：核质体或核区、原核实际是一巨大的、连续的、环状的双链DNA其长度可达0.253.0mm，比细菌本身长1000倍它分散于细胞质中，没有真正的核膜、核仁它在细胞内是高度折叠缠绕，核区一般呈球状、棒状、哑铃状生长迅速时可在一个细胞内找到几个（24个）（一般12个）8.细菌鞭毛的结构是怎样的？G+菌与G-菌在鞭毛构成上有何

7、差异？鞭毛结构：基体、钩形鞘和鞭毛丝。G+菌仅有S、M两环，G-菌有S、M、L、P四个环。9.霉菌的营养菌丝和气生菌丝有哪些特化形式？酵母菌和霉菌细胞壁结构和化学组成是怎样的？其繁殖方式（有性、无性）有哪些？营养菌丝：假根，匍匐菌丝，吸器，附着胞，附着枝，菌核，菌索，菌环和菌网气生菌丝（子实体）：无性：分生孢子头、孢子囊，分生孢子器、分生孢子座、分生孢子盘；有性：担子；子囊果：闭囊壳，子囊壳，子囊盘酵母菌：细胞壁厚约25nm，占细胞干重25%“三明治”结构：外层为甘露聚糖，中层为蛋白质，内层是葡聚糖。葡聚糖：3040%、甘露聚糖：3040%、蛋白质：10%左右、几丁质：12%、无机盐：13%霉

8、菌：细胞壁厚100250nm最外层：无定形的葡聚糖次外层：葡聚糖蛋白网层次内层：蛋白质层内层：几丁质层主要的机械强度支撑纤维低等水生真菌含有较多的纤维素。繁殖：酵母菌：无性繁殖：芽殖各属酵母菌都存在；裂殖：在裂殖酵母菌中存在；无性孢子：节孢子、掷孢子、厚垣孢子；有性繁殖：产子囊孢子霉菌：无性或有性孢子10.链霉菌的典型构造和繁殖方式如何？典型构造：基内菌丝、气生菌丝、孢子丝繁殖方式：孢子繁殖，菌丝繁殖11.支原体、衣原体和立克次氏体的特征，比较其异同。蓝细菌的特点有哪些？比较项目支原体衣原体立克次氏体细胞构造有有有直径大于300nm不一定不一定是含核酸类型DNA和RNADNA和RNADNA和R

9、NA核糖体有有有细胞壁无有（不含肽聚糖）有（含肽聚糖）细胞膜有（含甾醇）有（无甾醇）有（无甾醇）在无生命的培养基上生长不能生长不能生长细胞二分裂繁殖有有有繁殖时个体完整性保持保持保持大分子合成能力有有有产ATP系统有无有氧化谷氨酰胺能力有无有对抑制细菌抗生素的反应敏感（对抑制细胞壁合成者例外）敏感（青霉素例外）敏感蓝细菌特点：具有光合能力，进行产氧光合作用具有固氮作用革蓝氏染色阴性主要以裂殖方式繁殖没有鞭毛，但能进行滑行运动，并具有趋光性和趋化性细胞具有特化结构，如异形胞、静孢子、链丝段等海水和湖水中的蓝细菌可引起“赤潮”和“水华”12.何为假丝酵母？与霉菌菌丝体有何区别？ 假丝酵母是指能形成

10、假菌丝、不产生子囊孢子的酵母。假菌丝没有横隔。各细胞间仅以狭小的面积相连，呈藕节状，在分隔处缢缩。霉菌的菌丝大多有横隔，整个菌丝的直径粗细一致，且分枝与主干的直径一致。菌丝顶端常呈钝圆形。相连细胞间的横隔面积与细胞直径一致,呈竹节状的细胞串。假菌丝与真菌丝明显不同处在于其两细胞间有一细腰，而不象真正菌丝横隔处两细胞宽度一致。13.比较细菌、放线菌、酵母菌和霉菌的菌落特征异同.微生物类别菌落特征单细胞微生物菌丝状微生物细菌酵母菌放线菌霉菌主要特征菌落含水形态很湿或较湿较湿干燥或较干燥干燥外观形态小而凸起或大而平坦大而凸起小而紧密大而疏松或大而致密细胞相互关系单个分散或有一定排列方式单个分散或假丝

11、状丝状交织丝状交织形态特征小而均匀，个别有芽孢大而分化细而均匀粗而分化参考特征菌落透明度透明或稍透明稍透明不透明不透明菌落与培养基结合程度不结合不结合牢固结合较牢固结合菌落颜色多样单调，一般呈乳脂或矿烛色，少数红色或黑色十分多样十分多样菌落正反面颜色的差别相同相同一般不同一般不同菌落边缘一般看不到细胞可见球状，卵圆状或假丝状细胞有时可见细丝状细胞可见粗丝状细胞细胞生长速度一般很快较快慢一般较快气味一般有臭味多带酒香味常有泥腥味往往有霉味14.病毒区别于其他微生物的主要特征.个体极其微小，能通过细菌滤器无细胞结构，主要成分为核酸（DNA或RNA）和蛋白质，专性活细胞内寄生，以感染态和非感染态两种

12、状态交替存在，又称“分子生物”没有酶或酶系统极不完全，不能独立进行代谢活动，只能利用活寄主内现成的代谢系统合成自身的核酸和蛋白质成分以核酸和蛋白质的装配来实现其大量繁殖每种病毒只含一种核酸，不是DNA，就是RNA对一般抗生素不敏感，但对干扰素敏感在离体条件下,能以无生命的生物大分子状态长期存在，并可保持其感染活性有些病毒的核酸能整合到宿主基因组中，诱发潜伏性感染15.病毒粒子的衣壳粒有哪些对称形式，其典型代表种是什么病毒？螺旋对称：烟草花叶病毒二十面体对称：腺病毒复合对称：T4噬菌体16.以大肠杆菌T系列噬菌体为例，阐明病毒的复制（繁殖）过程。什么叫温和噬菌体、一步生长曲线、前噬菌体？病毒的复

13、制（繁殖）过程：吸附尾丝与宿主特异结合，时间很短宿主表面有多个吸附位点，如300不同噬菌体吸附的位点不同，如脂多糖、脂蛋白、磷壁酸、鞭毛等吸附可以受外界条件的影响，如阳离子、辅助因子、pH、温度等每一个敏感细胞所能吸附的相应噬菌体的数量称为感染复数（m.o.i）m.o.i一般可达到250-360，超大m.o.i可引起自外裂解侵入T4噬菌体从吸附到侵入只需15秒吸附引起构象变化，将核酸注入宿主细胞内，而蛋白质外壳留在细胞外如果两种以上侵入，只有一种得以增殖增殖T4噬菌体的dsDNA早期转录早期蛋白酶（RNA）次早期转录次早期蛋白酶（DNA）晚期转录晚期蛋白（结构蛋白等）成熟（装配）各个部件自行装

14、配T4噬菌体需要30种蛋白参与裂解（释放）水解酶水解细胞膜、细胞壁裂解释放子代噬菌体大肠杆菌T系列1525minT2位150个，T4为100个温和噬菌体： 当噬菌体DNA进入细胞后，在宿主与病毒的相互作用下，病毒DNA整合到宿主的DNA上，同宿主DNA 同步复制，这种噬菌体为温和性噬菌体。 一步生长曲线：定量描述烈性噬菌体生长规律的实验曲线称作一步生长曲线。它可以反映噬菌体的3个最重要的特征参数潜伏期、裂解期和裂解量。（少量病毒与敏感细胞接触，病毒吸附后，高倍稀释，继续培养，定时取样测定培养物中的病毒效价，以感染时间为横坐标，病毒效价为纵坐标，绘制出病毒特征性的繁殖曲线，即一步生长曲线 ）前噬

15、菌体：整合的DNA 为前噬菌体，或原噬菌体17.病毒粒子的结构与化学组成，亚病毒包括哪几种，各有何特点？化学组成：核酸和蛋白质，有包膜的病毒还有脂类和糖类结构：衣壳、核心、包膜、刺突亚病毒分类：类病毒：是裸露的、专性活细胞寄生的分子病原体，仅含一个单链、环状、低相对分子质量的RNA分子。类病毒RNA相对分子质量虽小，但能独立侵染寄主，侵入寄主后也能自我复制，不需要辅助病毒。类病毒目前只在植物中发现，是许多植物病害的病原体。拟病毒：是一类包裹在真病毒粒中的有缺陷的类病毒。 拟病毒的RNA分子单独存在时不具感染性（不表现致病性），只有与辅助病毒共同存在时，才能完成复制和具有感染性。朊病毒：是一类比

16、病毒小，不含核酸，仅含有疏水的具侵染性并在宿主细胞内复制的小分子蛋白颗粒。朊病毒具有极强的抗逆性；是正常细胞蛋白的改造物；借食物进入消化道，再经淋巴系统进入大脑。18.病毒的群体特征.包含体：某些病毒感染宿主细胞后，在宿主细胞中出现的显微镜可见的小体。有的在细胞质（狂犬病毒）；有的在细胞核（疱疹病毒）；有的在细胞核、细胞质都有（麻疹病毒）。噬菌斑：少量烈性噬菌体与大量敏感细胞混合后，涂布在培养基平板上，一定温度下培养1020h后，可见到嗜菌的透明小圆斑，为噬菌斑。空斑：以单层动物细胞受动物病毒侵染产生的透明斑为空斑。病斑：肿瘤病毒感染单层动物细胞，产生细胞剧增，称为病斑。枯斑：植物叶片上的植物

17、病毒群体为枯斑。19.微生物的营养类型有哪几种，比较异同（以氢供体、主要或唯一碳源和能量的划分为依据）.营养类型能源氢供体主要或唯一碳源实例光能自养型光无机物（如H2、H2S、H2O）CO2蓝细菌、藻类光能异养型光有机物（如乙酸、甲醇、异丙醇）CO2及简单有机物红螺菌化能自养型无机物无机物（如H2、H2S、Fe2+、亚硝酸盐）CO2硫化细菌、硝化细菌化能异养型有机物有机物有机物多数细菌、全部真菌20.什么叫微生物的营养？微生物的营养要素有哪些种类？他们各有何功能？微生物的营养：微生物细胞直接同生活环境接触并不停地从外界环境吸收适当的营养物质，在细胞内合成新的细胞物质和贮藏物质，并储存能量，微生

18、物从环境中吸收营养物质并加以利用的过程即称为微生物的营养。营养要素的种类及其功能：碳源：用来构建菌体物质或代谢产物中的碳素骨架的营养物质。氮源：它是微生物细胞蛋白质和核酸的主要成分，微生物利用它在细胞内合成氨基酸和碱基，进而合成蛋白质、核酸等细胞成分，以及含氮的代谢产物。能源：为微生物的生命活动提供最初能量来源的营养物或辐射能。生长因子：微生物维持正常生命活动所不可缺少的、微量的特殊有机营养物，这些物质在微生物自身不能合成，必须在培养基中加入。缺少这些生长因子就会影响各种酶的活性，新陈代谢就不能正常进行。无机盐：构成细胞的组成成分；作为酶的组成成分；维持酶的活性；调节细胞渗透压，氢离子浓度和氧

19、化还原电位；作为某些自养菌的能源。水：直接参与一些反应；作为机体内一系列生理生化反应的介质；营养物质的吸收、代谢产物的排泄都需通过水；由于水的比热高，又是良好的热导体，所以它能有效地吸收代谢释放的热量，并将热量迅速地散发出去，从而有效地控制细胞的温度。21.培养基分为哪些类型？什么叫选择性培养基和鉴别性培养基？分别解释单纯扩散、促进扩散、主动运输和基团转位的异同.培养基分类：按培养基的成分分：天然培养基，组合培养基，半组合培养基按培养基外观的物理状态分：液体培养基，固体培养基，半固体培养基，脱水培养基按培养基对微生物的功能分：选择性培养基，鉴别性培养基选择性培养基：就是根据某种或某一类微生物的

20、特殊营养需要或对某种化合物的敏感性不同而设计出来的一类培养基。利用这种培养基可以将某种或某类培养基从混杂的微生物群体中分离出来。鉴别性培养基：可以用于鉴别某种或某一类微生物的培养基。一般通过加入某些试剂，使得某种或某类微生物的菌落发生颜色变化，便于区别。单纯扩散：特点：高浓度低浓度；运送速度慢；无特异载体运送动力：浓度差运送终点：内外浓度相等运送前后溶质分子：结构不变促进扩散：特点：高浓度低浓度；运送速度快；有特异载体运送动力：浓度差运送终点：内外浓度相等运送前后溶质分子：结构不变主动运输：特点：低浓度高浓度；运送速度快；有特异载体运送动力：消耗能量ATP运送终点：内部浓度高得多运送前后溶质分

21、子：结构不变基团转位（各种糖类、核苷酸等）：特点：低浓度高浓度；运送速度快；有特异载体 运送动力：消耗能量ATP 运送终点：内部浓度高得多 运送前后溶质分子：结构改变22.微生物的产能方式有哪些？什么叫初级代谢和次级代谢？产能方式：呼吸；无氧呼吸；发酵初级代谢：一类与生物生存有关的、涉及到产能代谢和耗能代谢的代谢类型，普遍存在于一切生物中。次级代谢：某些生物为了避免在初级代谢过程某种中间产物积累所造成的不利作用而产生的一类有利于生存的代谢类型。可以认为是某些生物在一定条件下通过突变获得的一种适应生存的方式。23.发酵与呼吸的区别。什么叫反硝化作用和硝化作用？区别：电子载体不是将电子直接传递给底

22、物降解的中间产物，而是交给电子传递系统，逐步释放出能量后再交给最终电子受体。反硝化作用：反硝化细菌在缺氧条件下，还原硝酸盐，释放出分子态氮（N2）或一氧化二氮（N2O）的过程。硝化作用：硝化细菌将氨氧化为硝酸的过程。24. 比较有氧呼吸和无氧呼吸，比较光合细菌和蓝细菌的产能方式（即比较循环式光合磷酸化和非循环式光合磷酸化）.比较项目有氧呼吸无氧呼吸不同点反应条件需要O2、酶和适宜的温度不需要O2，需要酶和适宜的温度呼吸场所第一阶段在细胞质基质中，第二、三阶段在线粒体内全过程都在细胞质基质内分解产物CO2和H2OCO2、酒精或乳酸释放能量较多，1 mol葡萄释放能量2870 kJ，其中1161

23、kJ转移至ATP中1 mol葡萄糖释放能量19665 kJ(生成乳酸)或222 kJ(生成酒精)，其中均有6108 kJ转移至ATP中相同点其实质都是：分解有机物，释放能量，生成ATP供生命活动需要相互联系第一阶段(从葡萄糖到丙酮酸)完全相同，之后在不同条件下，在不同的场所沿不同的途径，在不同的酶作用下形成不同的产物循环式光合磷酸化一种存在于厌氧光合细菌中的利用光能产生ATP的磷酸化反应，是在光驱动下通过电子的循环式传递而完成的磷酸化。（在光能的驱动下，电子从菌绿素分子上逐出后，通过类似呼吸链的循环回到菌绿素，在此过程中产生了ATP）非循环式光合磷酸化是绿色植物、藻类和蓝细菌利用光能产生ATP

24、的磷酸化反应。电子的传递途径属非循环式。（水通过光解作用产生的电子经过两个电子传递系统接连传递，最终将电子传递给NADP+产生NADPH2，在传递过程中发生光合磷酸化发应）25.单细胞微生物的生长曲线分哪几个时期？每个时期各有何特点？在微生物的培养过程中，如果要缩短其生长的延迟期，可以在菌种、培养基和其它方面采取哪些措施.延滞期：分裂迟缓、代谢活跃。对数期：A生长速率最大，代时最短。B细胞进行平衡生长C酶系活跃，代谢旺盛。稳定期：A生长速率常数等于零，细胞处于正生长与负生长相等的动态平衡中。B菌体产量达到最高点。衰亡期：该时期死亡的细菌以对数方式增加，但在衰亡期的后期，由于部分细菌产生抗性也会

25、使细菌死亡的速率降低，仍有部分活菌存在。在生产实践中缩短迟缓期的常用手段：通过遗传学方法改变种的遗传特性使迟缓期缩短利用对数生长期的细胞作为种子尽量使接种前后所使用的培养基组成不要相差太大；适当扩大接种量26.什么叫分批培养和同步培养？如何获得同步培养物？分批培养：将微生物置于一定容积的培养基中，经过培养生长，最后一次收获。培养基一次加入，不予补充，不再更换。同步培养：使群体中的细胞处于比较一致的生长状态，生长发育均处于同一阶段上，即大多数细胞能同时进行生长或分裂的培养方法。酸纤维素滤膜法是最经典的获得同步生长的方法：A.将菌液通过硝酸纤维素薄膜，由于细菌与滤膜带有不同电荷，所以不同生长阶段拓

26、细菌均能附着于膜上；B.翻转薄膜，再用新鲜培养液滤过培养；C.附着于膜上的细菌进行分裂，分裂后的子细胞不与薄膜直接接触，由于菌体本身的重量，加之它所附着的培养液的重量，便下落到收集器内；D.收集器在短时间内收集的细菌处于同一分裂阶段，用这种细菌接种培养，便能得到同步培养物。机械法同步培养物是在不影响细菌代谢的情况下获得的，因而菌体的生命活必然较为正常。但此法有其局限性，有些微生物即使在相同的发育阶段，个体大小也不一致，甚至差别很大，这样的微生物不宜采用这类方法。27.什么叫混合酸发酵、丁二醇发酵、乙醇发酵、乳酸发酵？混合酸发酵：埃希氏菌、沙门氏菌、志贺氏菌属的一些菌通过EMP途径将葡萄糖转变成

27、琥珀酸、乳酸、甲酸、乙醇、乙酸、H2和CO2等多种代谢产物，由于代谢产物中含有多种有机酸，故将其称为混合酸发酵。丁二醇发酵：肠杆菌、沙雷氏菌、和欧文氏菌属中的一些细菌具有-乙酰乳酸合成酶系而进行丁二醇发酵。乙醇发酵：细菌利用葡萄糖及其他可发酵的糖产生乙醇。乳酸发酵：乳酸细菌能利用葡萄糖及其他相应的可发酵的糖产生乳酸。28. 现有两支已混淆的菌种试管，已知其中一种为大肠杆菌，另一支为产气肠杆菌。试用微生物生理生化反应将其区分开来。要求写出试验用培养基、实验原理和简要的实验方案（即细菌鉴定中常用的甲基红反应与伏-普反应原理）.甲基红反应（M.R.试验）：实验原理：细菌糖代谢，会将糖分解后的丙酮酸分

28、解为乙酸，乳酸等，培养基变酸，加入甲基红试剂，呈红色。实验步骤：取3支葡萄糖蛋白胨水培养基，分别标明发酵培养基名称，所接种的菌名和组号，1支接种大肠杆菌，1支接种产气杆菌，1支不接种，作为对照。37培养48h，加甲基红指示剂数滴，观察结果。呈现红色者为阳性，呈现黄色者为阴性。实验结果：大肠杆菌为阳性，产气肠杆菌为阴性。伏-普反应（V.P.试验）：实验原理：细菌糖代谢，会将糖分解后的丙酮酸缩合，脱羧，后变成二乙酰，与蛋白胨中Arg的胍基作用，生成红色化合物。实验步骤： 取3支葡萄糖蛋白胨水培养基，分别标明发酵培养基名称，所接种的菌名和组号，1支接种大肠杆菌，1支接种产气杆菌，1支不接种

29、，作为对照。37培养48h后，加入40%KOH510滴，然后再加入等量的5%-萘酚溶液，用力振荡，再放入37温箱中保温30min，以加快反应速度。观察培养基的颜色变化。若培养物呈现红色，为伏-普反应阳性。实验结果：大肠杆菌为阴性，产气肠杆菌为阳性。29.什么叫连续培养？控制连续培养的方法有哪几种？恒浊连续培养和恒化连续培养的原理和应用各是怎样的？连续培养：在微生物的整个培养期间，通过一定的方式使微生物能以恒定的比生长速率生长并能持续生长下去的一种培养方法。方法：恒浊连续培养：当微生物在恒浊器中培养进入对数期时，不断从外界加入新鲜培养基，而同时又流出培养物，用光电池信号控制浊度，以维持恒定的细胞

30、密度。恒化连续培养：微生物在恒化器中培养，通过控制恒化器中微生物生长所必需营养物的浓度，以保证微生物持续生长。应用：连续发酵法生产酒精，半连续发酵法生产丙酮、丁醇等。30.试解释抑制、防腐、化疗、死亡、消毒、灭菌这几个概念.抑制：生长停止，但不死亡防腐：防止或抑制霉腐微生物在食品等物质上的生长化疗：杀死或抑制宿主体内的病原微生物死亡：生长能力不可逆丧失消毒：杀死或灭活病原微生物（营养体细胞）灭菌：杀死包括芽孢在内的所有微生物31.以磺胺类药物为例阐明抗代谢物的作用机理.磺胺类药物广泛用于临床，是由于它们与微生物生长所必需的代谢物对氨基苯甲酸(PABA)间的竞争性抑制作用，细菌生长所必需的对氨基

31、苯甲酸可以自行合成，也可从外界环境中获得。若自行合成时，正常情况下，对氨基苯甲酸则和二氢喋啶在二氢碟酸合成酶的作用下，合成二氢碟酸，进一步合成二氢叶酸。二氢叶酸再通过二氢叶酸还原酶的作用，生成四氢叶酸。然而磺胺的结构与对氨基苯酸极其相似，在一定条件下，它们竞争性地与二氢碟酸合成酶结合，阻止或取代了对氨基甲酸掺入到叶酸分子中去，从而阻断了细菌细胞重要组分叶酸的合成。而叶酸是一种辅酶，在氨基酸、维生素的合成中起生要作用，缺乏此酶，细菌细胞活力受到明显破坏。磺胺抑制细菌的生长是因为许多细菌需要自己合成叶酸而生长。由于人和动物可利用现成的叶酸生活，因此不受磺胺的干扰。叶酸，亦称蝶酰谷氨酸。32.什么叫

32、石炭酸系数？指在一定时间内被试药剂能杀死全部供试菌的最高稀释度和达到同效的石炭酸的最高稀释度的比率。一般规定处理时间为10分钟，而供试菌定为伤寒沙门氏菌。33.常用的消毒、防腐剂及其应用.消毒剂：可杀死微生物，通常用于非生物材料的灭菌或消毒。防腐剂：能杀死微生物或抑制其生长，但对人及动物的体表组织无毒性或毒性低，可作为外用抗微生物药物。类型名称及使用方法作用原理应用范围醇类70%75%乙醇脱水、蛋白质变性皮肤、器皿醛类0.5%10%甲醛蛋白质变性房间、物品消毒（不适合食品厂）2%戊二醛（pH=8）酚类3%5%石炭酸破坏细胞膜、蛋白质变性地面、器具2%来苏儿皮肤3%5%来苏儿地面、器具氧化剂0.

33、1%高锰酸钾氧化蛋白质活性基团，酶失活皮肤、水果、蔬菜3%过氧化氢皮肤、物品表面0.2%0.5%过氧乙酸水果、蔬菜、塑料等重 金 属 盐 类0.05%0.1%升汞蛋白质变性、酶失活非金属器皿2%红汞变性、沉淀蛋白皮肤、粘膜、伤口0.1%1%硝酸银蛋白质变性、酶失活皮肤、新生儿眼睛0.1%0.5%硫酸铜防治植物病害表面活性剂0.05%0.1%新洁尔灭蛋白变性、破坏细胞膜皮肤、粘膜、器械0.05%0.1% 杜灭芬皮肤、金属、棉织品、塑料卤素及其化合物0.20.5mg/L氯气破坏细胞膜、蛋白质饮水、游泳池水10%20%漂白粉地面0.5%1%漂白粉水、空气等2.5%碘酒皮肤染料2%4%龙胆紫与蛋白质的

34、羧基结合皮肤、伤口酸类0.1%苯甲酸食品防腐0.1%山梨酸食品防腐34.青霉素、两性霉素、制霉菌素、链霉素、放线菌素D的作用位点.青霉素：抑制肽尾和肽桥间的转肽作用两性霉素：与真菌细胞膜中的固醇类结合制霉菌素：与真菌细胞膜中的固醇类结合链霉素：作用于核糖体30S亚基放线菌素D：作用于DNA中的鸟嘌呤35.青霉素的作用机理.作用机理：抑制细胞壁重要组分肽聚糖的合成。青霉素的b-内酰胺换结构与D-Ala的末端结构相似，能占据D-Ala的位置与转肽酶结合，并将酶灭活，使肽链间无法连接，抑制了细胞壁的合成，用于处理革兰氏阳性菌。36.试述pH对微生物影响机理及温度对微生物的影响（机理）.pH对微生物影

35、响机理：pH变化引起细胞膜电荷的变化，从而影响微生物对营养物质的吸收，影响代谢过程中酶的活性，改变生长环境中营养物质的可给性及有害物质的毒性。温度对微生物的影响：影响酶活性，温度变化影响酶促反应速率，最终影响细胞合成。 影响细胞膜的流动性，温度高，流动性大，有利于物质的运输，温度低，流动性降低，不利于物质运输，因此，温度变化影响营养物质的吸收与代谢产物的分泌。 影响物质的溶解度，对生长有影响。37.什么叫间歇灭菌法、巴氏消毒法、高压蒸汽灭菌法（常规加压灭菌法）？分别适用哪些物品的灭菌？间歇灭菌法：将待灭菌培养基在80100下蒸煮1560分钟以杀死其中所有微生物的营养细胞，然后置室温或37下保温

36、过夜，使残留的芽孢萌发，第二天在以同样方法蒸煮和保温过夜，如此连续重复3天即可。使用于不耐热培养基的灭菌。巴氏消毒法：一种低温灭菌法，一般在6085下处理15秒至30分钟。用于牛奶、啤酒、果酒和酱油等不能进行高温灭菌的液体的一种消毒方法，主要目的是杀死其中无芽孢的病原菌，而又不影响其风味。高压蒸汽灭菌法（常规加压灭菌法）：将待灭菌物件放置于盛有适量水的加压蒸汽灭菌锅内，把锅内的水加热煮沸，并把其中原有的空气彻底驱尽后将锅密闭。在继续加热使锅内的蒸汽压逐渐上升，从而达到高于100的温度。一般应在121（压力为1千克/厘米²或15磅/英寸²）下维持1520分钟，也可采用较低的温

37、度（115，即0.7千克/厘米²或10磅/英寸²）下维持35分钟。适用于普通培养基、生理盐水、手术器械、玻璃容器及注射器、敷料等物品的灭菌。38.根据微生物与氧的关系，可将微生物分为哪几种类群？试比较之.好氧菌：专性好氧菌：好氧呼吸产能兼性厌氧菌：以呼吸为主，兼营发酵产能和厌氧呼吸产能微好氧菌：只能在较低的氧分压下正常生长厌氧菌：耐氧菌：只能以发酵产能，但分子氧无毒害（专性）厌氧菌：只能在无氧条件下生长，氧剧毒39.光波杀菌力最强的波长范围是？什么叫光复活作用？紫外线的杀菌机理.紫外线：波长在210313nm范围都有效，最常用的波长是253.7nm左右。以波长260nm的紫

38、外线杀菌力最强。光复活作用：经紫外线照射后的微生物立即暴露于可见光下时，可明显降低其死亡率的现象，称为光复活作用。光解酶在黑暗中战役的识别嘧啶二聚体并与之结合，形成酶-复合物，当给予光照时，酶利用光能将二聚体拆开，恢复原状，使损伤得到修复。紫外线的杀菌机理：其杀菌作用主要由于紫外线引起核酸形成胸腺嘧啶二聚体，从而干扰了核酸的复制，另外，U.V可使空气中分子氧变为臭氧，臭氧不稳定，易分解放出新生态氧O有杀菌作用。40.什么叫饰变？饰变与基因突变的区别。饰变：不涉及遗传物质结构改变而只发生在转录、翻译水平的表型改变。表型的差异只与环境等因素有关。特点：暂时性、不可遗传性、表现为全部个体的行为。基因

39、突变中遗传物质改变，导致表型改变。特点：可遗传的、群体中只极少数个体发生。41.证明核酸是遗传因子的三个经典实验.经典转化实验；噬菌体感染实验；植物病毒重建实验42.什么叫点突变和染色体畸变？什么叫转换、颠换和移码突变？基因突变分哪些种类？点突变：一对碱基上的突变。染色体畸变：指一段染色体数目的增减或结构的改变。转换：即DNA链中的一个嘌呤被另一个嘌呤或是一个嘧啶被另外一个嘧啶所置换。颠换：即一个嘌呤被另一个嘧啶或是一个嘧被另一个嘌呤索置换。移码突变：指诱变剂会使DNA序列中的一个或少数几个核苷酸发生增添（插入）或缺失，从而使该处后面的全部遗传密码的阅读框架发生改变，并进一步引起转录和翻译错误

40、的一类突变。分类：碱基置换；移码突变；缺失突变；插入突变43.基因突变的特点有哪些？试述证明突变的自发性和不对应性的三个经典实验，他们分别证明了基因突变的什么特点？特点：不对应性：突变的性状与突变原因之间无直接的对应关系。自发性：突变可以在没有人为诱变因素处理下自发地产生。稀有性：突变率低且稳定。独立性：各种突变独立发生，不会互相影响。可诱发性：诱变剂可提高突变率。稳定性：变异性状稳定可遗传。可逆性：从原始的野生型基因到变异株的突变称为正向突变，从突变株回到野生型的过程则称为回复突变。三个经典实验：变量实验（又称波动实验或彷徨实验）：大肠杆菌的T1噬菌体（烈性噬菌体）悬液，分两个大试管，其一分

41、50个培养，其二分一个整体培养；观察统计抗噬菌体的抗性菌株数量。证明了基因突变的不对应性。涂布实验：两培养基保温5小时后，一个直接喷T1，培养过夜，一个重新涂布后喷T1，培养过夜，观察。证明了基因突变的自发性。影印实验：所谓影印培养法，实质上是使在一系列培养皿的相同位置上能出现相同菌落的一种接种培养方法。影印培养实验工具其基本过程是：把长有许多菌落(可多达数百个)的母种培养皿倒置于包有灭菌丝绒布的木圆柱(直径略小于培养皿)上，然后可把这一“印章”上的细菌一一接种到不同的选择性培养基平板上，待培养后，对各皿相同位置上的菌落作对比后，就可选出适当的突变型。据报道，用这种方法，可把母平板上1020%

42、的细菌转移到绒布上，并可利用它接种8个子培养皿。因此，通过影印培养法，可以从在非选择性条件下生长的细菌群体中，分离出各种类型的突变种。证明了基因突变的不对应性。44.如何筛选营养缺陷型微生物？什么叫原养型、营养缺陷型、完全培养基、补充培养基和基本培养基？营养缺陷型的筛选：诱变剂处理淘汰野生型：抗生素法、菌丝过滤法检出缺陷型：夹层培养法、限量补充培养法、逐个检出法、影印平板法鉴定缺陷型：生长谱法、组合营养物法、组合补充培养基法原养型：指营养缺陷型突变菌株回复突变或重组后产生的菌株，与野生型的表型相同。营养缺陷型：诱变处理野生型菌株后，由于丧失某酶合成能力的突变，只有在加有该酶的培养基中才能生长的

43、菌株。完全培养基（CM）：满足一切营养缺陷型菌株生长的天然或半合成培养基。补充培养基(SM)：在基本培养基中有针对性地加入一或几种营养成分以满足相应营养缺陷型菌株生长的合成培养基。基本培养基(MM)：凡是能满足野生型菌株营养要求的最低成分的合成培养基。45.什么叫Ames试验？原理：用遗传学方法培植一种不能自行制造组氨酸的鼠伤寒沙门氏菌的变异体，这种菌株在无组氨酸的培养基中不能生长。如果将这种菌株与化学致癌物一起培养，则可使其DNA（脱氧核糖核酸）再次突变，恢复到能制造组氨酸的原型（野生型），即在无组氨酸的培养基中也能生长。利用这一特征性变化来测试化学物质有无致突变作用，并根据生长的菌落数目还

44、可以判定其致癌性的强弱。化学药剂对细菌的诱变率与其对动物的致癌性成正比。46.原核微生物的基因重组方式有哪几种？原核生物的基因重组有转化、转导、接合和原生质体融合等方式47.什么叫转化？转化子、感受态、转染？转化：受体菌直接吸收来自供体菌的游离DNA片段，并把它整合到自己的基因组中，而获得部分新的遗传性状的基因转移过程，称为转化。转化子：转化后的受体菌称为转化子。感受态：受体细胞能从环境吸取外源DNA片段并实现其转化的一种生理状态。转染：把噬菌体或其它病毒的DNA（或RNA）抽提出来，让它去感染感受态的宿主细胞，并进而产生正常的噬菌体或病毒的后代，这种现象称为转染。48.什么叫转导、普遍性转导

45、、完全普遍转导、流产转导、局限转导、溶源转变？比较完全普遍转导与流产转导的异同.转导：以温和噬菌体为媒介，将供体细胞的DNA片段携带到受体细胞中，通过交换与整合，从而使后者获得前者部分遗传性状的现象，称为转导。普遍性转导：通过完全缺陷噬菌体对供体菌任何DNA小片段的“误包”而实现其遗传性状传递至受体菌的转导现象，称为普遍性转导。完全普遍转导：在普遍转导过程中，如果导入的外源DNA片段与受体细胞核染色体组上的同源区段配对，并可通过双交换而整合到受体菌染色体组上，使后者成为一个遗传性状稳定的转导子，就称为完全普遍转导。流产转导：经普遍转导而获得了供体菌DNA片段的受体菌，如果外源DNA在其内既不进

46、行交换、整合和复制，也不迅速消失，而仅进行转录、转译和性状表达的现象，称为流产转导。局限转导：指通过部分缺陷的温和噬菌体把供体菌的少数特定基因携带到受体菌中，并与后者的基因组整合、重组，形成局限转导子的现象。溶源转变：当正常的温和噬菌体感染其宿主而使其发生溶源化时，因噬菌体基因整合到宿主的核基因组上，而使宿主获得了除免疫性外的新遗传性状的现象，称溶源转变。比较异同：完全普遍转导：供体菌野生型（鼠伤寒沙门氏菌 ）；受体菌各种营养缺陷型；完全缺陷型噬菌体P22，感染复数<1， 由于一个受体细胞只感染了一个完全缺陷噬菌体，故受体细胞不会发生往常的溶源化，也不显示其免疫性，更不会裂解和产生正常的噬菌体；而由于导入的外源DNA片段可与受体细胞核染色体组上的