(完整word版)【职考冲刺】临床免疫学要点集锦

1、职考冲刺】临床免疫学要点集锦 0、免疫学检测技术的基础是抗原抗体反应。 1、免疫：是机体识别和排斥抗原性异物的一种生理功能 2、免疫防御（对外） ；免疫自稳（防自身免疫病） ；免疫监视（防肿瘤） 。 3、中枢免疫器官：骨髓、胸腺；外周免疫器官：淋巴结、脾脏（最大） 、黏膜相关淋巴组织 4、 B 细胞：通过识别膜免疫球蛋白来结合抗原，介导体液免疫； B 细胞受体=BCR=mlg 表面标志：膜免疫球蛋白（Smlg）、Fc 受体、补体受体、EB 病毒受体和小鼠红细胞受体。 成熟 B 细胞：CD19、CD20 CD21、CD22 （成熟 B 细胞的 mlg 主要为 mlgM 和 mlgD）同时 检测

2、CD5 分子，可分为 B1 细胞和 B2 细胞。 B 细胞功能检测方法：溶血空斑形成试验（体液免疫功能） 。 5、 T 细胞：介导细胞免疫。共同表面标志是 CD3（多链糖蛋白）；辅助 T 细胞的标志是 CD4； 杀伤 T 细胞的标志是 CD8； T 细胞受体=TCR T 细胞和 NK 细胞的共同表面标志是 CD2（绵羊红细胞受体）； CD3+ CD4+ CD8-=辅助性 T 细胞（Th） CD3+ CD4- CD8+ =细胞毒性 T 细胞（Tc 或 CTL） （T 细胞介导的细胞毒试验） CD4+ CD25+ =调节性 T 细胞（Tr 或 Treg） T 细胞功能检测：植物血凝素（PHA）刀豆

3、素（CONA）刺激 T 细胞增殖。增殖试验有：形态 法、核素法。 T 细胞亚群的分离：亲和板结合分离法，磁性微球分离法，荧光激活细胞分离仪分离法 *E 花环试验是通过检测 SRBC 受体而对 T 细胞进行计数的一种试验； 6、 NK 细胞：具有细胞介导的细胞毒作用。直接杀伤靶细胞（肿瘤细胞和病毒感染的细胞） 表面标志： CD16（ ADCC）、 CD56。 测定人 NK 细胞活性的靶细胞多用 K562 细胞株，而测定小鼠 NK 细胞活性则常采用 YAC-1 细 胞株。 7、 吞噬细胞包括：单核-吞噬细胞系统（MPS,表面标志 CD14，包括骨髓内的前单核细胞、 外周血中的单核细胞和组织内的巨噬

4、细胞）和中性粒细胞。 （表达 MHCH类分子） &人成熟树突状细胞（DC）（专职抗原呈递功能）：表面标志为 CD1a、CD11c 和 CD83。 9、 免疫球蛋白可分为分泌型（sig,主要存在于体液中，具有抗体功能）及膜型（ mlg，作 为抗原受体表达于 B 细胞表面，称为膜表面免疫球蛋白） 10、 免疫球蛋白按 含量多少排序：lgG lgA lgM lgD lgE 五类（按重链恒定区抗原性 （ CH ）排序） 免疫球蛋白含量测定：单向环状免疫扩散法、免疫比浊法。 11、 免疫球蛋白的同种型抗原决定簇位于 恒定区（CH、CL ） 12、 抗体由浆细胞产生。抗体分子上 VH 和 VL （

5、高变区）是抗原结合部位。 13、 IgG :血清中含量最高的免疫球蛋白（lgG1 最高），血液和细胞外液中的主要抗体。 也是再次免疫应答 的主要抗体，是唯一能通过胎盘的抗体，大多数抗菌抗体、抗病毒抗体是 IgG，某些自身抗体及超敏n型抗体是 IgG，免疫学检测中第二抗体也以 IgG 为主。 14、 IgA :分血清型（单体存在）及分泌型；分泌型 IgA （sIgA ）为二聚体，性能稳定，主 要存在于胃肠道、支气管分泌液、 初乳、唾液、泪液中，局部浓度高，是参与 黏膜局部免疫 的主要抗体。 15、 IgM :为五聚体，主要存在于血液中，是 lg 中分子量最大 的（又称巨球蛋白）。个体 发育最早合

6、成和分泌的抗体。抗原刺激后体液免疫应答中 最先产生的抗体，感染过程中血清 IgM 水平升高，说明 近期感染。新生儿脐血中若 IgM 增高，提示有宫内感染。 16、 IgE :为单体结构，正常人血清中 含量最低。IgE 为亲细胞抗体，介导I型超敏反应。 特异性过敏反应和寄生虫早期感染患者血清中可升高。 17、 补体：具有酶样活性的球蛋白（肝细胞、巨噬细胞产生）；激活途径主要有三种：经 典途径（以结合抗原后的 IgG 或 IgM 类抗体为主要 激活剂（双链 DNA） , C1C9 全部参 与）、替代途径（病原微生物 细胞壁成分（脂多糖）直接激活补体 C3，然后完成 C5C9 的激活过程）、MBL

7、途径（由急性炎症期产生的甘露糖结合凝集素（ MBL ）与病原体结合 后启动激活）。 18、 补体系统中 C3 含量最多，C2 含量最少。 19、 灭活：加热 56 C 30 分钟，补体丧失活性 20、 补体清除免疫复合物的方式：吞噬调理；免疫粘附；免疫复合物抑制。 21、 完全抗原=反应原性+免疫原性。半抗原=反应原性（无免疫原性） 22、 抗原抗体结合力 （分子间引力）：静电吸弓 I、范德华力、氢键、 疏水作用力（最强） 23、 抗原抗体反应 的四大特点：特异性、可逆性、比例性、阶段性；受反应条件（如温度、 pH、电解质、抗原抗体比例等）的影响。 24、 抗体过量一一前带；抗原过量一一后带（

8、钩状效应） 25、 抗原抗体反应 可分为两个阶段： 第一阶段为抗原与抗体发生特异性结合的阶段，此阶 段反应快，仅需几秒至几分钟， 但不出现可见反应；第二阶段为可见反应阶段，此阶段 反应 慢，往往需要数分钟至数小时。 26、 颗粒性抗原出现凝集反应。可溶性抗原出现沉淀反应。单价抗原与相应抗体结合不出 现沉淀现象。 27、 木瓜酶水解 IgG 为 2Fab+Fc ；胃蛋白酶水解 IgG 为 F（ab）2+nFc。 28、 最常用于免疫动物的佐剂是弗氏佐剂，弗氏佐剂分为弗氏完全佐剂（弗氏不完全佐剂 加卡介苗）和弗氏不完全佐剂两种。 29、 R （兔子）型抗血清是用家兔及其他动物免疫产生的抗体，抗原抗

9、体反应比例合适 范围 较宽，适于作诊断试剂。 H （马）型抗血清是用马等大动物免疫获得的抗体，抗原抗体反应比例合适范围较 窄，一般 用作免疫治疗。 30、 抗血清常见保存条件：2-8 C保存；冷冻保存（最常用）；真空干燥保存（ 5-10 年）。 31、 杂交瘤细胞 放入液氮（-196 C）前，需要 逐步降温。复苏细胞时，从液氮罐内取出冻 存管，立即浸入 37 C水浴。 32、 凝集反应分为两个阶段：抗原抗体的特异性结合；出现可见的颗粒凝聚。 33、 直接凝集反应的原理是细菌、螺旋体和红细胞等颗粒性抗原，在适当的 电解质（0.85% 氯化钠）参与下可直接与相应抗体结合出现凝集。抗原 =凝集原，抗

10、体=凝集素。 34、 玻片凝集试验：主要用于抗原的定性分析， ABO 血型的测定。 试管凝集试验：肥达氏试验、外斐试验、输血交叉配血试验； 35、 红细胞包被抗原，用以检测抗体的血凝反应，称为 正向间接血凝反应（PHA ）。 红细胞包被 抗体，用以检测抗原的血凝反应，称为 反向间接 血凝反应（RPHA ）。 36、 间接血凝抑制试验：可用于检测抗体、自身抗体、变态反应性抗体，也可测定抗原。 37、 金黄色葡萄球菌 A 蛋白（SPA ） 38、 血凝试验可在微量滴定板或试管中进行，将标本倍比稀释，一般为 1:64，同时设不含 标本的稀释液为对照孔。凡红细胞沉积于孔底， 集中呈一圆点的为 不凝集。

11、如红细胞 凝集, 则分布于孔底周围。39、明胶凝集试验（间接）： HIV-1 抗体和抗精子抗体检测 40、 抗球蛋白试验，又称 Coombs 试验，是检测抗红细胞不完全抗体的一种很有用的方法。 包括直接 Coombs 试验（检测红细胞上的不完全抗体）和 间接 Coombs 试验（游离在血清 中的不完全抗体） 41、 沉淀反应分两个阶段：第一阶段为抗原抗体发生特异性结合， 几秒到几十秒即可完成， 出现可溶性小的复合物，肉眼不可见。第二阶段为形成可见的免疫复合物， 约需几十分钟到 数小时才能完成，如沉淀线、沉淀环。 42、 免疫比浊：最适 pH 为 6.58.5，磷酸盐缓冲液。 43、 对流免疫电

12、泳：抗体流向负极，抗原流向正极 44、 免疫固定电泳 也用予尿液中 本-周蛋白的检测及K入分型，脑脊液中寡克隆蛋白的检测 及分型。 45、 RIA （放免）核素（125 I）标记抗原，竞争抑制（标记抗原和非标记抗原竞争限量抗 体）；IRMA （免疫放射）核素标记抗体，非竞争结合（过量标记抗体，反应速率比 RIA 快， 灵敏度明显高于 RIA。） RIA 可以测定大分子和小分子抗原，但 IRMA 则只能测定至少有两个抗原决定簇的抗原。 46、 常用的荧光素有： 异硫氰酸（FITC ）黄绿色，最常用；四乙基罗丹明（RB200 ）橘红 色；四甲基异硫氰酸罗丹明（TRITC ）橙红色；藻红蛋白（R-R

13、E ）橙色。其他：铕（Eu3 + ） 47、 荧光标记蛋白的常用方法：搅拌法和透析法。 荧光抗体效价鉴定：抗原含量为 1g / L 时，抗体效价1 : 16 48、 时间分辨荧光 免疫测定（TRFIA ）以镧系元素（如： 铕）化合物为荧光标记物。 49、 偏振免疫测定的偏振波长是 485nm （蓝光）。 50、 辣根过氧化物酶 （HRP ）:底物（1）邻苯二胺（OPD ）, （ 2）四甲基联苯胺（TMB ） ELISA中应用最广泛的底物。 碱性磷酸酶（ALP ）:底物：对-硝基苯磷酸脂（p-NPP ） 伊半乳糖苷酶（B-Gal）:底物：4-甲基伞酮基-R-D 半乳糖苷（4-MUU ） 51、异

14、相法：先分离，后测定；均相法：不分离，直接测。 52、 酶联免疫吸附试验（ELISA ）: 必要的试剂：固相的抗原或抗体；酶标记的抗原或抗体；酶反应的底物。 抗原测定：蛋白大分子抗原用得最多的是 双抗体夹心法（HBsAg ）。只有单个抗原决定簇 的小分子，则使用竞争抑制法。 抗体测定：通常使用 间接法（HCV、HIV）、双抗原夹心法（HBsAb ）、竞争法（HBcAb、HBeAb） 和捕获法（IgM ）等 *待测孔最后显示的颜色深浅与标本中的待测抗原或抗体呈正相关的是：双抗体夹心法、双 位点一步法、间接法测抗体； 53、 化学发光底物 有：直接化学发光剂：吖啶酯和三联吡啶钉；酶促反应发光剂：（

15、标记 酶 HRP ）鲁米诺及其衍生物、（标记酶为碱性磷酸酶） AMPPD ； 54、 免疫印迹实验中常选用多克隆抗体。 55、 外周血单个核细胞的分离的分层液常用： Ficoll （由上到下为血浆，单个核细胞，粒， 红）和Percoll （由上至下：死细胞，单个核细胞，淋，红，粒）。 56、 纯淋巴细胞群的采集有： 黏附贴壁法，吸附柱过滤法，磁铁吸引法，Percoll 分离液法。 57、 T 细胞和 B 细胞的分离：E 花环沉降法，尼龙毛柱分离法 58、 淋巴细胞 活力测定：台盼蓝染色法，死细胞为蓝色。 59、 CD4 是 HIV 受体，HIV 感染时 CD4 / CD8 比值明显降低。 60

16、、 CD4 / CD8 升高常见于自身免疫性疾病；而 CD4 / CD8降低常见于病毒感染、恶性肿 瘤和再生障碍性贫血等。 61、 （ ELISA ）双抗体夹心法是用于 细胞因子测定的最常用方法。 62、 流式细胞仪：前向散射光（FS ）反映颗粒的大小。侧向散射光（SS ）反映颗粒内部结 构复杂程度、表面的光滑程度。荧光（ FL）反映颗粒被染上荧光部分数量的多少。 63、 免疫荧光标记最常用的荧光染料：异硫氰酸荧光素（ FITC ）亮绿色荧光。德州红红色 荧光。藻胆蛋白类橙色至红色荧光。 64、临床上常用三色荧光抗体标记将 CD3-CD16+CD56+淋巴细胞确定为 NK 细胞。 65、AID

17、S 患者的一个特征性免疫诊断指标表现为： T 淋巴细胞总数减少，T 细胞亚群 CD4Th /CD8TC 比例倒置，Th /Tc V 1.0 , Th细胞数量显著下降甚至测不出，而 Tc 细胞数量可 正常或增加，NK 细胞减少或活力下降，B 淋巴细胞群则处于正常范围。 65、 强直性脊柱炎HLA-B27 66、 SLE 患者以 IgG、IgA 升高较多见。类风湿关节炎患者以 IgM 增高为主。 67、 M 蛋白（MP ）是 B 淋巴细胞或浆细胞单克隆异常增殖（ 30g / L ）所产生的一种在 氨基酸组成及顺序上十分均一的异常单克隆免疫球蛋白。 多无免疫活性，故又称副蛋白。临 床上多见于多发性骨

18、髓瘤、高丙种球蛋白血症、恶性淋巴瘤、重链病、轻链病等 68、 M 蛋白-最基本方法：血清蛋白区带电泳技术 M 蛋白-粗筛试验：血清 免疫球蛋白定量 （单向琼脂免疫扩散法和免疫比浊法） M 蛋白-鉴定，首选方法：免疫固定电泳（IFE ）技术（区带电泳技术与特异性抗血清的免疫 沉淀反应相结合）是临床最常用的方法。 69、 IgD 降低见于原发性无丙种球蛋白血症、矽肺 70、 CSF 中的浓度：IgG IgA IgM。神经系统肿瘤时，以 IgA 和 IgM 升高为主。 （感染、血管病变、系统性疾病 =IgG 升高） 71、 本-周蛋白即尿中游离的免疫球蛋白轻链。尿中可测得，血中呈阴性（原因是本 -周

19、蛋白 分子量小，极易迅速自肾脏排出，血中含量并不升高） 72、 冷球蛋白又称冷免疫球蛋白，在-4 C时发生沉淀，于 37 C时又复溶解。采血是冷球蛋 白检测的关键，宜在体温条件下采集和保存静脉血。 73、 补体结合试验（CFT ），梅毒的诊断，华氏反应。 74、 非均相荧光免疫测定：时间分辨荧光免疫测定法。 均相荧光免疫测定：荧光偏振免疫测定法。 75、链球菌感染：ASO （胶乳凝集试验、免疫散射比浊法） 76、 伤寒沙门菌有菌体（0）抗原、鞭毛（H）抗原和表面（Vi）抗原。肥达反应，效价1:80 为阳性 77、 卡氏肺孢菌，又称卡氏肺孢子虫，为类真菌。 78、 I型超敏反应：由特异性 IgE

20、 抗体介导产生，其发生速度最快。（ 青霉素、支气管哮 喘） 提高 Th1 细胞活性，减少 IL-4 的分泌，可降低 IgE 的产生，阻断 IgE 介导的I型超敏反应。 参与I型超敏反应：肥大细胞、嗜碱性粒细胞、嗜酸性粒细胞。 79、 n型超敏反应：又称细胞毒型或细胞溶解型超敏反应，它是由靶细胞表面的抗原与相 应 IgG 或 IgM 类抗体结合后，在补体（细胞溶解）、巨噬细胞（吞噬）和 NK 细胞（ADCC 作用）参与下，引起的以细胞溶解或组织损伤为主的病理性免疫反应。 （输血反应、新生儿 溶血症、自身免疫性溶血性贫血、药物过敏性血细胞减少症、肺出血肾炎综合征、甲状腺功 能亢进） 80、 川型超

21、敏反应： 由可溶性免疫复合物 沉积于局部或全身多处毛细血管基底膜，通过激 活补体，并在血小板、嗜碱性粒细胞、中性粒细胞 等的参与下，引起的以充血水肿、局部坏 死和中性粒细胞浸润为主要特征的炎症反应和组织损伤。（ Arthus 反应、类 Arthus 反应、 血清病、链球菌感染后肾小球肾炎、 类风湿关节炎、SLE ） /81、W型超敏反应： 又称迟发 型超敏反应（DTH ），是效应 T 细胞与特异性抗原结合后，引起的以单个核细胞浸润和组 织损伤为主要特征的炎症反应。 （细胞免疫）效应性 CD4+Th1 细胞识别抗原后活化，可释 放 IFN- 丫、TNF、淋巴毒素（LT）、IL-3、GM-CSF、

22、单核细胞趋化蛋白 -1 （ MCP-1 ）等多 种细胞因子。 常见W型超敏反应性疾病： 感染性迟发型超敏反应（结核分枝杆菌、病毒、原虫）、 接触性 皮炎、移植排斥反应。（结核菌素皮试、斑贴试验） 82、 变性的 IgG 可刺激机体产生抗变性 IgG 抗体（类风湿因子） 83、 ITP 患者血清中存在有抗血小板抗体，该抗体可以缩短血小板的寿命。 84、 抗乙酰胆碱受体抗体：对重症肌无力（MG）具有诊断意义。 85、 毒性弥漫性甲状腺肿患者血清中有抗促甲状腺激素受体 （TSHR ）的 IgG 型自身抗体。 （甲状腺功能的亢进） 86、 多发性肌炎是以损害肌肉为主要表现的自身免疫性疾病，如果同时有皮

23、肤损害，则称 为皮肌炎。 87、 75%的 PSS 患者有抗核抗体阳性， 抗 Scl-70 抗体是 PSS 的特异性抗体， 80%95% 的局限性硬皮病患者抗着丝点抗体阳性。 88、 自身免疫病（AID）的特征：高滴度自身抗体，病理特点为免疫炎症损伤与抗原分布一 致，能建动物模型。 89、 抗 DNP 抗体（抗核蛋白抗体）通常完全被 DNA 和组蛋白吸收，是形成 狼疮细胞 的因 子。 90、 ANA 阳性的荧光现象分：核膜型、均质型、斑点型、核仁型。 ANA 常为自身免疫病的 初筛试验。 91、 ENA 是可提取核抗原的总称，分子中 不含 DNA。 92、 抗 dsDNA 抗体对 SLE 有较

24、高的特异性。 抗 Sm 抗体也是 SLE 的特异性标志之一。此 两项常为SLE 确诊指标。（对疑为 SLE 的患者，应先进行 ANA 和抗 dsDNA 抗体的检测， 当 ANA 和（或）抗dsDNA 抗体阳性时，再作抗 ENA 抗体谱的检测。如有抗 Sm 抗体和（或） 抗 RNP 抗体阳性，可实验室诊断为 SLE） 93、 抗核 RNP 抗体：为 MCTD （混合性结缔组织病）的诊断指标。 94、 抗 SSA/抗 SSB 抗体：为干燥综合征（SS ）的诊断指标。（当 ANA 阳性而抗 dsDNA 抗体阴性，抗 ENA 抗体谱中抗 SsA 抗体和（或）抗 ssB 抗体阳性，可实验室诊断为干燥 综

25、合征。） 95、 抗 Jo-1 抗体：多发性肌炎（PM ）患者常为阳性。 96、 抗 Scl-70 抗体：进行性系统性硬皮症（ PSS ）的诊断指标。 97、 NCA :原发性小血管炎的特异性血清标志物 98、 内风湿性关节炎 （RA ） :自身抗体有 RF、 抗角蛋白抗体 （AKA ） 、 抗环瓜氨酸肽抗 体 （anti-CCP ） 。 99、 Farr 法测定 dsDNA 抗体的特异性高，为公认标准法，当抗 dsDNA 抗体结合率大于 20% 时对 SLE有意义。 100、 抗线粒体抗体（AMA ）:原发性胆汁性肝硬化 101、 巨球蛋白血症：以分泌 IgM 的浆细胞恶性增殖为病理基础的疾病。 好发于老年男性， 主要表现骨髓外浸润， 以肝、脾和淋巴结肿大为主要体征并伴有血黏滞过高综合征， 如表现 为视网膜出血。（血清呈胶冻状难以分离，电泳时血清有时难以泳动， 集中于原点是该病的 电泳特征） 102、 异常免疫球蛋白检测的