PCR实验及结果分析学习教案

1、会计学1PCR实验及结果实验及结果(ji gu)分析分析第一页，共44页。第1页/共43页第二页，共44页。PCR技术(jsh)简史DNA的复制(fzh)核酸体外扩增的设想聚合酶链反应的发明ATCGCGATAGCGTAGCTGCGACCTAGC53TAGCGCTATCGCATCGACGCTGGATCG35解旋酶解链酶DNA解旋解链合成引物子链延长第2页/共43页第三页，共44页。PCR技术(jsh)简史DNA的复制核酸(h sun)体外扩增的设想聚合酶链反应的发明ATCGCGATAGCGTAGCTGCGACCTAGC53TAGCGCTATCGCATCGACGCTGGATCG35DNA解旋解链合

2、成引物子链延长GGAUCG5AUCGCG5引物酶引物酶RNA引物RNA引物第3页/共43页第四页，共44页。PCR技术(jsh)简史DNA的复制(fzh)核酸体外扩增的设想聚合酶链反应的发明ATCGCGATAGCGTAGCTGCGACCTAGC53TAGCGCTATCGCATCGACGCTGGATCG35DNA解旋解链合成引物子链延长GGAUCG5AUCGCG5TAGCGCTATCGCATCGACGCT3ATAGCGTAGCTGCGAGGATCG3DNA聚合酶DNA聚合酶第4页/共43页第五页，共44页。PCR技术(jsh)简史DNA的复制核酸(h sun)体外扩增的设想聚合酶链反应的发明19

3、71年，Khorana提出：经过DNA变性，与合适引物杂交，用DNA聚合酶延伸引物，并不断重复该过程便可克隆tRNA基因。但由于测序和引物合成的困难，以及70年代基因工程技术的发明使克隆基因成为可能，所以，Khorana的设想被人们遗忘了第5页/共43页第六页，共44页。PCR技术(jsh)简史DNA的复制(fzh)核酸体外扩增的设想聚合酶链反应的发明1985年，美国PE-Cetus公司的Mullis等人发明了聚合酶链反应（PCR）基本原理是在试管中模拟细胞内的DNA复制最初采用E-coli DNA聚合酶进行PCR，由于该酶不耐热，使这一过程耗时，费力，且易出错耐热DNA聚合酶的应用使得PCR

4、能高效率的进行，随后PE-Cetus公司推出了第一台PCR自动化热循环仪1993年，Mullis等因此项技术获诺贝尔化学奖第6页/共43页第七页，共44页。第7页/共43页第八页，共44页。第8页/共43页第九页，共44页。第9页/共43页第十页，共44页。第10页/共43页第十一页，共44页。第11页/共43页第十二页，共44页。40 50 60 70 80 90 100100 80 60 40 20第12页/共43页第十三页，共44页。第13页/共43页第十四页，共44页。1234522557294时间（min）温度（）PCR的基本原理PCR反应条件(tiojin)PCR过程PCR的特点适

5、温延伸3高温变性1低温退火2重复(chngf)13步2530轮目的DNA片段(pin dun)扩增100万倍以上DNA双螺旋DNA单链与引物复性DNA变性形成2条单链子链延伸DNA加倍第14页/共43页第十五页，共44页。第15页/共43页第十六页，共44页。第16页/共43页第十七页，共44页。第17页/共43页第十八页，共44页。30-35cycle第18页/共43页第十九页，共44页。第19页/共43页第二十页，共44页。第20页/共43页第二十一页，共44页。第21页/共43页第二十二页，共44页。第22页/共43页第二十三页，共44页。第23页/共43页第二十四页，共44页。第24页

6、/共43页第二十五页，共44页。第25页/共43页第二十六页，共44页。第26页/共43页第二十七页，共44页。第27页/共43页第二十八页，共44页。第28页/共43页第二十九页，共44页。第29页/共43页第三十页，共44页。第30页/共43页第三十一页，共44页。第31页/共43页第三十二页，共44页。第32页/共43页第三十三页，共44页。第33页/共43页第三十四页，共44页。第34页/共43页第三十五页，共44页。第35页/共43页第三十六页，共44页。第36页/共43页第三十七页，共44页。第37页/共43页第三十八页，共44页。第38页/共43页第三十九页，共44页。第39页/共43页第四十页，共44页。第40页/共43页第四十一页，共44页。第41页/共43页第四十二页，共44页。第42页/共43页第四十三页，共44页。NoImage内容(nirng)总结会计学。第2页/共43页。第3页/共43页。PCR技术是一种体外模拟自然DNA复制过程的核酸扩增技术，亦称为无细胞分子克隆技术。由于该酶会在进行DNA变性的温度下失活，所以在每一轮合成反应中都须重新(chngxn)加1份酶。2.引物浓度