莲房中金丝桃苷的分离鉴定及药材质量标准研究

1、莲房中金丝桃昔的分离鉴定及药材质量标准研究【摘要】目的制定莲房药材质量标准,为该药资源的开发利用提供 科学依据。方法 药材对照品的分离鉴定，建立tlc鉴别方法及hplc含量测定方 法。结果分离得到对照品金丝桃昔；tlc鉴别斑点清晰；hplc含量测定金丝 桃昔在0.04160.832 pg范围内线性关系良好，平均回收率为99.5%(n=6)o 结论 可较全面反映其内在质量，为有效评价莲房质量和开发莲房资源提供依据。【关键词】莲房金丝桃昔质量标准the research on the isolation and identification of hyperin inreceptaculum ne

2、lumbinis and quality standard of receptaculum nelumbiniswang ji-sen,liu you-ping,cheng bei,shi yu-hua,chen hong-ping(school of pharmacy,chengdu university of tcm,chengdu 61仃30 , china)abstract : objective to establish the quality standard of the receptaculum nelumbinis to provide the scienee evidene

3、e for the development and exploitation of the resources of this herb.method the ref ere nee substa nee had been isolated and identified.the tlc identified method and the hplc assayi ng method had bee n established.results the ref ere nee substa nee hyperin had been successfully isolated and tlc diff

4、erential spots were distinct.the linear correlation of the hyperin determined by hplc method was good in the range of 0.0416 0.832 pg.the average recovery rate of hyperin was 99.5%(n=6).conclusions it can overall reflect the internal quality control,effectively estimate the quality of receptaculum n

5、elumbinis and provide the evidenee for the develop!ng the resources of receptaculumnelumbinis.key words:receptaculum nelumbinis;hypein;quality standard莲房为睡莲科植物莲nelumbo nucifera gaertn.的干燥花托，具有化瘀止血 的功效。中国药典xxxx年10月购自湖南省湘潭市。1.3试剂柱层析用聚酰胺（江苏临江试剂化工厂）；薄层层析硅胶g （青岛海洋化工集团有限公司）；薄层层析聚酰胺薄膜（浙江省台州市路桥四甲生化塑料厂）；色 谱甲

6、醇、乙膳（美国fisher公司）;其它试剂均为分析纯（成都化学试剂厂l2方法与结果2.1对照品的提取分离及鉴定取莲房粗粉8 kg ,用95%乙醇回流提取三次，回收乙醇得浸膏560 g将其悬浮于水中，依次用石油醞，氯仿，乙酸乙酯，正丁醇萃取，回收溶剂。取乙酸 乙酯部位与层析聚酰胺（100 - xxxx年版一部附录vib）试验，吸取上述两种溶液各5 pl，分别点于同一硅胶g薄层板上，以正丁醇乙酸乙酯冰醋酸水（3 : 2:1:1）为展开剂，展开，取岀，晾干。喷以10%三氯化铝乙醇溶液，置紫外灯（365 nm ）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同 颜色的荧光斑点。见图1.2.3金

7、丝桃昔含量测定2.3.1色谱条件与适应性hypersil ods（250 mmx4 mm,5 pm）柱；流动相 为甲醇-zffi-0.3%磷酸（27:9:64 ）;检测波长为355 nm ;流速0.8 ml/mino色 谱图见图线性关系考察精密称取金丝桃昔对照品适量，加甲醇制成每1 ml含52 pg的溶液，作为对照品溶液。再分别精密吸取1、5、10. 15. 20 ml对照品溶液，加甲醇稀释至25 mlo精密吸取上述溶液各20 pl ,注入色谱仪，测计算得回归方定峰面积积分值，以进样量为横坐标，峰面积积分值为纵坐标， 程丫二5944592x19303 , r=0.999 8，金丝

8、桃昔在 0.0416 0.832 0 pg 范围内呈 良好线性关系。2.3.3精密度试验精密吸取同一对照品溶液，重复进样5次，测得峰面积 rsd 为 1.10%.2.3.4稳定性试验 精密吸取同一样品溶液，每隔2 h进样，共5次，测得 峰面积rsd为0.81%2.3.5重复性试验照拟定样品制备方法平行制备5份供试品溶液并测 定，测得平均含量为0.15% , rsd为1.38%.论文联盟www丄wlm.com编辑。2.3.6加样回收率试验 精密称取已知含量的莲房药材，精密添加一定量金 丝桃昔对照品，按样品制备方法制备样品溶液，并按上述色谱条件进行测定，计 算回收率，结果见表1.表1加样回收率试验

9、测定结果2.3.7样品测定取莲房细粉约1 g ,精密称定，加入20 ml 75%甲醇，加热回流提取1 h ,放至室温，过滤，滤液转移至25 ml量瓶中，加75%甲醇溶剂至刻度，摇匀，作为供试品溶液。分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10 ml ,按拟定色谱条件测定，结果见表2.表2不同批次莲房中金丝桃昔含量3讨论本研究中首次使用定性和定量指标进行莲房药材的质量标准研究3控制 药材内在质量，为进一步开发利用莲房资源打下基础。在对照品分离过程中，曾 拟用硅胶进行柱层析分离，但多种洗脱剂均显示有不同程度的脱尾现象，且分离 度不佳。改用聚酰胺后，脱尾现象及分离度均得到明显改善。hplc测定选择流 动相时，也曾用甲醇水(40:60 甲醇0.1%磷酸(40:60 x乙騰0.1%磷酸(20: 80),但都存在基线难于下降、岀峰时间过快导致分离度不理想。后采用甲醇乙0.3%磷酸( 27:9:64 ),效果较好。在收集的6批药材中，其中一批药材表 面呈灰黑色、顶面圆形球孔狭小、残留莲子瘦小，与其他五批药材性状区别明显，hplc测定表明其金丝桃昔含量明显偏少。实验过程中，仅收集到6批药材，