蒲公英注射液中细菌内毒素动态比浊法探究

1、蒲公英注射液中细菌内毒素动态比浊法探【摘要】目的应用动态比浊法定量测定蒲公英注射液中细菌内毒素含量。方法 通过对样品中定量添加标准细菌内 毒素进行干扰试验。以40倍稀释为最佳的检测浓度，进行 三个批号蒲公英注射液干扰试验 其回收率分别为163 .1% , 1886% , 132 . 4% o结果 回收率均在50%200%之间， 样品对壷试剂反应无干扰作用，可用于日常检查。结论 动 态比浊法堂试剂试验可以有效的测定蒲公英注射液中的细 菌内毒素含量。【关键词】动态比浊法堂试验；蒲公英注射液；细菌内毒素口the research on dynamic turbidimetic quantitive

2、method of endotoxin on dandlion injection wu shao-xin, shi xin-ying, han wen-hua institute for drug control of hebei province , shijiazhuang 050011 , chinadabstract 1 objective use the dynamic turbidimetic method to measure the quantity of endotoxin on dandlion injection . method use the method to a

3、dded certain quantitive standard endotoxin to interfere factors test.the best inspective consisitency was 40 times dilution of the injection.the recoveries of interfere factors test by 3 batches were 163 1 % , 188 . 6% , 132 . 4%result recoveries between 50%200%, dandlion injection had no interfere

4、fuction to tachypleus amebocyte lysate.the method can be used for daliy examine.c on elusion tachypleus amebocyte lysate for dynamic turbidimetic method could test the quantity of endotoxin effectively on dandlion injection.key words tachypleus amebocyte lysate for dynamic turbidimetic method, dandl

5、ion injection, endotoxin, interfere factors test蒲公英注射液为淡棕色液体，是由蒲公英全草制成。有 清热、解毒、消痛散结之功效。本研究采用动态比浊法堂试 验进行蒲公英注射液细菌内毒素测定，探讨其可行性。口1试验材料及仪器口蒲公英注射液批号：051223 , 051226 , 051229 ;规格：2 ml （ 1 ml含生药1g ）,（河北省药品检验所制）；细菌内毒 素检查用水批号：0603070 ,规格25 ml （湛江安度斯生物有限公司）；动态比浊蛍试剂（tal ）批号：0604252 ;规格1 .26 ml，灵敏度入二003eu/ml（湛江安

6、度斯生物有限公司）; 细菌内毒素国家工作标准品批号：2006-5规格:120eu（中 国药品生物制品检定所）；动态试管仪lkl-064,英国莱伯金 耐特公司。电热恒温水浴箱hh . w21 . 600 ,天津泰斯特仪 器有限公司。口2方法与结果口ml/60kg=30eu/mlmvd=lc/a=30/0 .03=1000（动态比浊法堂试验中入为标准 曲线最低点浓度，本试验中入=0 . 03 eu/ml ' 22标准曲线建立及可靠性 用细菌内毒素检查用水对2 . 1试验参数的计算1本试验依照中国药典2005 年版（二部）附录xie “细菌内毒素检查法”，蒲公英注射液 细 菌内毒 素限值 l

7、=k/m=5 0eu/（kg•h）/10 最大有效稀释倍数细菌内毒素国家工作标准品进行稀释，浓度分别为2、0 .25、 003 eu/ml ,每个浓度3管，同时作阴性对照3管。回归方程：lgtg=2 8900-0 . 3274lgc ,相关系数 r=-0 . 998 9 , 达限值：92% ,工作波长：405 nm ,结果见表1o 23干扰试验蒲公英注射液的最大有效稀释倍数为1000倍。将其分别稀释20、40、80倍，进行干扰试验，ppc中内毒素的浓度为025 eu/ml ,平行2管见表2 , 3。2 . 4定量检查为确保蒲公英注射液40倍稀释的有效 性，进行3个批号蒲公英注射液（批号051223 , 051226 , 051229 ）正式干扰试验，以稀释40倍的蒲公英注射液作为 样品，其他操作参照预试验，干扰试验得到的结果表明蒲公 英注射液所含的内毒素值远远小于参考限值l=30 eu/ml，为 严格控制产品质量暂定蒲公英注射液的内毒素限值为：取本品，依法检查（中国药典2005年版二部附录xie ）,用细菌 内毒素检查用水稀释至40倍，其内毒素限值不得大于10eu/mlo结果见表3。其干扰试验添加内毒素