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文档简介

1、1会计学CD在胃癌细胞在胃癌细胞SGC增殖增殖CD147在胃癌组织中高表达在胃癌组织中高表达技术路线技术路线技技 术术 路路 线线shRNA15-GATCCGTCGTCAGAACACATCAACTTCAAGAGAGTTGATGTGTTCTGACGACTTTTTTGGAAA-35-AGCTTTTCCAAAAAAGTCGTCAGAACACATCAACTCTCTTGAAGTTGATGTGTTCTGACGACG-3shRNA2 5GATCCGTGACAAAGGCAAGAACGTCTTCAAGAGAGACGTTCTTGCCTTTGTCATTTTTTGGAAA-3 5AGCTTTTCCAAAAAATGAC

2、AAAGGCAAGAACGTCTCTCTTGAAGACGTTCTTGCCTTTGTCACG-3shRNA-control5GATCCACTACCGTTGTTATAGGTGTTCAAGAGACACCTATAACAACGGTAGTTTTTTTGGAAA-3 5AGCTTTTCCAAAAAAACTACCGTTGTTATAGGTGTCTCTTGAACACCTATAACAACGGTAGTG-3pSilencer/shRNA1测序图（红线为插入片段） 脂质体转染48h后用含0.4g/ml的G418的完全培养基筛选2周，然后改为半量维持。将抗G418的阳性细胞克隆用有限稀释法分离出来并逐步扩增以待进一步分析

3、。筛选出的细胞克隆分别命名为SGC7901/shRNA1，SGC7901/shRNA2和SGC7901/shRNA-control。 1 2 3 4HGLGCD147-actinLane 1: SGC7901.Lane 2: SGC7901/shRNA-controlLane 3: SGC7901/shRNA1Lane 4: SGC7901/shRNA2接种细胞接种细胞 培养细胞培养细胞 加入加入MTT呈色呈色 终止培养终止培养 比色比色 结果计算结果计算 抑制率抑制率(%)=(对照组对照组A 值值-实验组实验组A 值值)对照组对照组A 值值100% 24h、48h、72h 时间点时间点MMP-2MMP-9 1 2 3Lane 1:SGC7901. Lane 2:SGC7901/shRNA-control.Lane 3:SGC7901/shRNA2*BSGC7901/shRNA2细胞上清液中细胞上清液中MMP-2和和MMP-9的活性明显降

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