蛋白质分离与纯化_第1页
蛋白质分离与纯化_第2页
蛋白质分离与纯化_第3页
蛋白质分离与纯化_第4页
蛋白质分离与纯化_第5页
已阅读5页，还剩141页未读， 继续免费阅读

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

1、DNARNAProtein反渗透反渗透纯纯水水盐盐水水纯纯水水 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 70 75 80 85 90 95 100(NH4)2SO4(NH4)2SO4(NH4)2SO4(NH4)2SO4(NH4)2SO4(NH4)2SO4蛋白质溶液中带正电荷的分子与阴离子载体作用，称为阳离子交换，常用的固定化材质是羧甲基纤维素；反之，称为阴离子交换，常用的固定化材质是EDTA-纤维素。羧甲基羧甲基纤维素纤维素gel chromatography 间隔臂间隔臂洗涤洗涤样品样品洗脱洗脱S6000080000转/分重力60万80万倍Isopycnic Equili

2、bration(CsCl等密度等密度平衡平衡)Zone Centrifugation(蔗糖区带离心蔗糖区带离心)高高 速速 离离 心心Gravity Centrifugation(无无梯度梯度)样品：多为蛋白质密度相似、分子量不同样品：多为核酸密度不同、分子量相似一般的重力离心仅把颗粒与溶液分离开來超超 速速 离离 心心(Supercoiled)RNAPlasmid DNA(Open circular)Chromosomal DNAProteinDensityDensityDensityDensityLipids( (浓度浓度梯度梯度) )沉降方向沉降方向 S SSSS S+NH3NH3+-O

3、OCQGIVEQCCTSI C SLYLENYCNCOO-FSFVNQHLCGHLVEALYLVCGERGFYTPKT B-chain A-chain动脉动脉静脉静脉血红蛋白对氧的运输血红蛋白对氧的运输灵敏度最高灵敏度最高TLCTLE目前应用最广泛目前应用最广泛PeptideN-PTH-PTH-Amino acidanalysisSecond cycle切除切除N-端端氨基酸氨基酸的的剩余部分剩余部分PTH-氨基酸氨基酸裂解裂解异硫氰酸苯酯异硫氰酸苯酯 (PITC)苯氨基硫甲酰苯氨基硫甲酰多肽多肽苯氨基硫甲酰苯氨基硫甲酰氨基酸氨基酸N-+ PITC(Edman degradation)PTH-

4、鉴定氨鉴定氨基酸基酸种类种类依序排出依序排出氨氨基酸序列基酸序列1-2-3-4-5-6-0 10 20 minIntensityLeuAspThrSerGluGlyAlaCysValMetIleTyrPheHisLysArgNH4+(Pro)胰蛋白胰蛋白酶降解酶降解胰蛋白胰蛋白酶降解酶降解胰蛋白胰蛋白酶降解酶降解蛋白质蛋白质LC谱图谱图肽链肽链LC谱图谱图肽链肽链LC谱图谱图质谱质谱质谱质谱质谱质谱电泳或电泳或电离质谱电离质谱蛋白质蛋白质混合物混合物肽链肽链混合物混合物提取提取收集收集电泳或电泳或电离质谱电离质谱不同标记不同标记气相碎片气相碎片双向凝胶双向凝胶蛋白质蛋白质LC细胞裂解细胞裂解细胞或组织细胞

人人文库> 全部分类> 教育资料 > 课件下载

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论