临床PCR检验的室内质控方法PPT学习教案

1、会计学1临床临床PCR检验的室内质控方法检验的室内质控方法第1页/共54页第2页/共54页批测定的有效性，报告可否发出。批测定的有效性，报告可否发出。是对实验室测定的是对实验室测定的即时性评价即时性评价。第3页/共54页第4页/共54页第5页/共54页第6页/共54页理想的理想的PCR实验室设计实验室设计A产物分析区产物分析区空气流向空气流向空气流向空气流向空气流向空气流向空气流向空气流向缓冲间缓冲间缓冲间缓冲间缓冲间缓冲间专用走廊专用走廊工作流向工作流向扩增区扩增区标本制备区标本制备区试剂准备区试剂准备区第7页/共54页产物分析区产物分析区空气流向空气流向空气流向空气流向空气流向空气流向空气

2、流向空气流向缓冲间缓冲间缓冲间缓冲间缓冲间缓冲间专用走廊专用走廊工作流向工作流向扩增区扩增区标本制备区标本制备区试剂准备区试剂准备区理想的理想的PCR实验室设计实验室设计B第8页/共54页“十六字口诀十六字口诀”第9页/共54页产物分析区产物分析区空气流向空气流向空气流向空气流向空气流向空气流向空气流向空气流向缓冲间缓冲间缓冲间缓冲间缓冲间缓冲间专用走廊专用走廊工作流向工作流向扩增区扩增区标本制备区标本制备区试剂准备区试剂准备区传递窗传递窗传递窗第10页/共54页第11页/共54页第12页/共54页第13页/共54页第14页/共54页第15页/共54页第16页/共54页考核、讨论心得、论文、综

3、述等。第17页/共54页第18页/共54页第19页/共54页间内，可以尽可能的监测每一个孔的扩增有效性。第20页/共54页第21页/共54页第22页/共54页第23页/共54页第24页/共54页第25页/共54页第26页/共54页第27页/共54页第28页/共54页第29页/共54页第30页/共54页第31页/共54页第32页/共54页第33页/共54页第34页/共54页第35页/共54页第36页/共54页第37页/共54页第38页/共54页第39页/共54页第40页/共54页n性标本可以发出报告，所有阳性标本在查清原因后重做。第41页/共54页第42页/共54页第43页/共54页第44页/共

4、54页第45页/共54页第46页/共54页阳性质控样本测定结果偏低或为阴性阳性质控样本测定结果偏低或为阴性结果偏低结果偏低阴性阴性临床标本临床标本中无强阳中无强阳性性临 床 标 本临 床 标 本中 有 较 强中 有 较 强阳性阳性临 床 标临 床 标本 中 有本 中 有阳性阳性临 床 标临 床 标本 全 为本 全 为阴性阴性观察临床标本情况观察临床标本情况所 用所 用离 心离 心管 含管 含抑 制抑 制物物Taq酶酶活 性活 性降低降低核 酸核 酸提 取提 取试 剂试 剂效 率效 率低低更 换更 换进 口进 口离 心离 心管管更 换更 换Taq酶酶再 检再 检测测更 换更 换核 酸核 酸提 取

5、提 取试剂试剂所有标本重新检测所有标本重新检测核 酸核 酸提 取提 取中 靶中 靶核 酸核 酸丢失丢失核 酸核 酸提 取提 取中 抑中 抑 抑 物抑 物残留残留核 酸核 酸提 取提 取试 剂试 剂混入混入扩 增扩 增仪 孔仪 孔间 温间 温度 差度 差异异随机误差检测质控样本及检测质控样本及35份份已知阳性样本已知阳性样本质 控 样质 控 样本 测 定本 测 定正 常 且正 常 且阳 性 样阳 性 样本 有 些本 有 些值增加值增加质 控 及质 控 及已 知 阳已 知 阳性 样 本性 样 本测 定 仍测 定 仍异常异常按 系 统按 系 统误 差 途误 差 途径分析径分析重新提取或已知浓度重新提

6、取或已知浓度DNA在同一孔内扩增在同一孔内扩增结果正常结果正常结果仍低结果仍低进 行 扩进 行 扩增 仪 孔增 仪 孔温 度 校温 度 校准 后 再准 后 再检测检测Taq酶或酶或逆 转 录逆 转 录酶失活酶失活第47页/共54页第48页/共54页第49页/共54页阴性质控样本测定为阳性阴性质控样本测定为阳性临床标本亦全为阳性临床标本亦全为阳性临床标本中有阳性也有阴性临床标本中有阳性也有阴性扩增产物扩增产物“污染污染”试剂试剂“污染污染”同时检测的标本情况同时检测的标本情况扩增产物轻扩增产物轻度度“污染污染”标本间交叉标本间交叉“污染污染”3 5 空 管空 管室内静置室内静置5 8 份 水份 水样本检测样本检测试 剂 直试 剂 直接 扩 增接 扩 增检测检测验证验证验证验证58份水份水样 本 检样 本 检测测暂停日常检验，实暂停日常检验，实验室清洁、通风验室清洁、通风更换试剂更换试剂措施措施有阳性，则确认有