蛋白质综合实验

1、会计学1蛋白质综合实验蛋白质综合实验作图作图以以OD650为纵坐标，标准蛋白含量为横坐标，在坐标为纵坐标，标准蛋白含量为横坐标，在坐标纸上绘制一条过原点的标准曲线。纸上绘制一条过原点的标准曲线。求算标本血清中的蛋白质浓度求算标本血清中的蛋白质浓度 查图：利用测定管读数在标准曲线上查出蛋白量查图：利用测定管读数在标准曲线上查出蛋白量（X），最后如下算出标本的蛋白含量：），最后如下算出标本的蛋白含量：gX*（100/0.002）*10-6 以标准管和测定管的吸光数，按下列公式计算：以标准管和测定管的吸光数，按下列公式计算：g（OD测定测定/OD标准标准*标准管蛋白量）标准管蛋白量）*（100/0.

2、002）注意事项注意事项1）加入酚试剂时动作要快并立即摇匀，不应出现混）加入酚试剂时动作要快并立即摇匀，不应出现混浊浊2）标准曲线制备：）标准曲线制备：至少要有五个点以上。一条理想的标准至少要有五个点以上。一条理想的标准曲线应该是斜率接近曲线应该是斜率接近l，且通过原点的直线，其范围应在被，且通过原点的直线，其范围应在被测物浓度的一半到二倍之间。吸光度在测物浓度的一半到二倍之间。吸光度在0.050.8之间。如之间。如果待测样品浓度超过标准曲线浓度范围，应将样品稀释再果待测样品浓度超过标准曲线浓度范围，应将样品稀释再测。测。临床意义临床意义总蛋白增加：血液浓缩（严重腹泻、呕吐、高热、休克）总蛋白

3、增加：血液浓缩（严重腹泻、呕吐、高热、休克）；合成增多（多发性骨髓瘤；合成增多（多发性骨髓瘤G）总蛋白减少：总蛋白减少：血液稀释（补水过多、水钠潴留）血液稀释（补水过多、水钠潴留）各种原因所至的白蛋白减少，如：各种原因所至的白蛋白减少，如：合成不足（肝脏功能下降）合成不足（肝脏功能下降）合成原料不足（饥饿、腹泻、消化道肿瘤）合成原料不足（饥饿、腹泻、消化道肿瘤）去路增多去路增多(肾病综合症、大量胸腹水、烧伤、大出血肾病综合症、大量胸腹水、烧伤、大出血)消耗过多（糖尿病、甲亢、肿瘤等）消耗过多（糖尿病、甲亢、肿瘤等）基本实验步骤基本实验步骤 分离胶和浓缩胶配制分离胶和浓缩胶配制 10%分离胶(l

4、) 4%浓缩胶(l)H2O 4200 305030.8%Acr/Bis 3250 6501.5Tris-HCL PH8.8 2500 0.5Tris-HCL PH6.8 125010%APS 100 50TEMED 10 4.5电泳条带电泳条带 聚丙烯酰胺凝胶电泳血聚丙烯酰胺凝胶电泳血清蛋白质区带分布图清蛋白质区带分布图作图作图以以OD650为纵坐标，标准蛋白含量为横坐标，在坐标为纵坐标，标准蛋白含量为横坐标，在坐标纸上绘制一条过原点的标准曲线。纸上绘制一条过原点的标准曲线。求算标本血清中的蛋白质浓度求算标本血清中的蛋白质浓度 查图：利用测定管读数在标准曲线上查出蛋白量查图：利用测定管读数在标准曲线上查出蛋白量（X），最后如下算出标本的蛋白含量：），最后如下算出标本的蛋白含量：gX*（100/0.002）*10-6 以标准管和测定管的吸光数，按下列公式计算：以标准管和测定管