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文档简介
1、会计学1灌注层析灌注层析高等生物分离技术高等生物分离技术2第1页/共32页3第2页/共32页色谱操作压力下,流体不能对流进入固相介质的孔内。所以,固相介质内部的传质仅靠溶质的内扩散来完成。4第3页/共32页的流速下操作。即使是使用粒径数微米的高效液相色谱,分析柱的流速不超过500cm/h,大规模制备分离受操作压力的限制,流速更低。5第4页/共32页溶质的对流作用,降低了溶质在介质内滞留的限制,明显缩短了蛋白质的分离时间。6第5页/共32页7担体即一种多孔性化学惰性固体。第6页/共32页8第7页/共32页9第8页/共32页10第9页/共32页n分离速度极快,几分钟内完成11第10页/共32页相,
2、孔径在亚微米级至微米级之间,在中低压力下,液体可高速透过连续床的孔隙,两相间发生对流传质。故可基本消除颗粒内传质阻力,相间传质速度快,柱效高;整体柱介质为连续相,内部孔隙率大,大大提高了色谱柱的有效利用空间(即色谱柱的吸附容量),有利于提高色谱分离能力。12第11页/共32页很强的苯乙烯-二乙烯基苯的共聚物,对蛋白质等生物物质的非特异性吸附极强。13第12页/共32页14第13页/共32页15第14页/共32页16两种介质的性能表征第15页/共32页17第16页/共32页18第17页/共32页19第18页/共32页20第19页/共32页21第20页/共32页22第21页/共32页23第22页/
3、共32页24注:背压即后端的压力。通常是指运动流体在密闭容器中沿其路径流动时,由于受到障碍物或急转弯道的阻碍而被施加的与运动方向相反的压力。第23页/共32页速下快速分离蛋白质提供了条件。25第24页/共32页条 件 下 ( 1 0 m m o l / L Na3PO4),在POROS R/H 柱上2 min内即得到很好的分离。另外,用POROS R/M 填料能在较短时间内完成含有核糖核酸酶、卵清蛋白等蛋白质标准品混合物的分离。26R型:反相 M型:粒径为20um第25页/共32页27Q型:强阴离子交换 H型:粒径为10umR型:强阳离子交换 积上可在1天内得到5 g血清蛋白质。用阳离子交换柱POROS S(100 mm 4.6 mm i.d.),在5 mL/min的流速下,经梯度冲洗,5 min内能分离200 g脉管活化肠多肽(VIP)。第26页/共32页28第27页/共32页29第28页/共32页30微型柱在快速分离时的线性范围是1-50 g,大体积的
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