毕业开题报告模板

1、Designed by Danny复合硫酸锌/枸杞多糖对酒精肝损伤中酶活性的影响汇报人：邓* *选题依据、研究现状选题依据、研究现状协同作用的评价以及对酶活的影响协同作用的评价以及对酶活的影响协同作用及机制（部分）的研究协同作用及机制（部分）的研究 研究方法与技术路线研究方法与技术路线揭示协同作用下酶活的变化揭示协同作用下酶活的变化背景及意义研究内容研究创新点技术实施路线预期成果Contents 工作进展及安排工作进展及安排计划安排背景及意义（一）背景及意义（一）1、如何能在肝细胞功能性损伤之前，从源头上进行早期的预防和干预措施、防止肝脏损伤的增加，对酒精性肝病的防治具有深刻意义。2、枸杞中含

2、有的LBP能够进行免疫调节、清除自由基及抗衰老、抗肿瘤、降血糖、保护心血管等，同时具有低系统毒性的优点。已有研究表明其对酒精肝的抑制和治疗有显著疗效。3、研究表明，补锌能够通过非MT依赖性的方式抑制生成活性氧的产生（P4502E1）和提高抗氧化酶活性的途径防止酒精性肝损伤。4、肝损伤最突出的结果的是向血液中释放胞内酶,因此血清ALT和AST以及ADH和CYP2E1可以作为衡量肝状态的指标。背景及意义（二）背景及意义（二）酒精在肝脏中的代谢及诱导肝损伤途径 适量酒量乙醛乙酸CO2+H2O乙醇脱氢酶过氧化氢酶细胞色素氧化酶乙醛脱氢酶过量酒量诱导细胞色素氧化酶过表达(CYP2E1)产生大量ROS，引

3、起氧化应激反应。炎症肝损伤研究创新点研究创新点1、ZnSO4和LBP均对酒精肝有强烈的抑制和帮助恢复作用，但当前研究仅停留在对单一成分作用效果的研究，而鲜有其复配效果的研究，因此我们将其进行复配来研究其对肝损伤的保护是否具有协同作用。2、本实验对复配之后的药剂在体内酶活性影响层面上进行研究，深层次地揭示了其作用机理。研究内容（一）研究内容（一） DPPH自由基清除能力的测定对自由基诱导蛋白氧化损伤的保护作用LBP/ZnSO4体外抗氧化活性协同作用的评价。对自由基诱导脂质氧化损伤的保护作用 协同作用检测研究内容（一）研究内容（一）注：1、 DPPH自由基清除能力的测定2、对自由基诱导蛋白氧化损伤

4、的保护作用 1)实验试剂配制 2)对 Cu2+/H2O2诱导蛋白羰基化的保护作用3、对自由基诱导脂质氧化损伤的保护作用 1)实验试剂配制 2)羟自由基诱导亚油酸氧化反应体系的建立 3)TBA法4、 协同作用的检测 CDI（曹臻1989万等，2008）的计算公式如下：CDI= AB/（AB）。AB是组合团队比毒素对照组的相应的参数，A或B为单剂组比毒素对照组的相应参数参数的比例。因此，CDI值小于，等于或大于1表明，该药物是协同，相加或拮抗，。CDI小于0.7表明，该药物是显着的协同作用研究内容（二）研究内容（二）动物实验 (酶活)ALT、AST （血清）MDA、SOD、GSH-Px（肝匀浆）酒

5、精性肝损伤大鼠肝脏 TNF-和 IL1-表达的测定酒精性肝损伤大鼠肝脏 CYP2E1 表达的变化肝组织固定、切片、 染色 （HE染色）协同作用研究方法与技术路线研究方法与技术路线1、实验大鼠的喂养与药剂灌胃36只雄性大鼠250-280克，在221，湿度:59%一61%，每天光照与黑暗时间各为12h，适应性喂养7天。适应过程中，给予大鼠水和的标准实验室食品（大鼠饲料）自由采食。分组设置模型对照组 空白对照组（同剂量生理盐水） ZnSO4 +LBP组（24mg/kg+500mg/kg） 单一ZnSO4 组（24mg/kg） 单一枸杞多糖组（LBP 500mg/kg） ZnSO4 +LBP组（12m

6、g/kg+250mg/kg）灌胃次数1次/天，酒精剂量为1ml/100g。研究方法与技术路线研究方法与技术路线2、实验指标观察与测定病理学观察 肝组织固定、切片、染色，肝组织固定、切片、染色，HE HE 染色后于光学显微镜下观察肝组织病理学改变。染色后于光学显微镜下观察肝组织病理学改变。（预测（预测5 5周末，会产生肝细胞脂肪变部分大鼠肝小叶中心带肝细胞中出现大小周末，会产生肝细胞脂肪变部分大鼠肝小叶中心带肝细胞中出现大小不等的脂肪滴，肝小叶可见点状或灶状坏死以及轻度炎症细胞浸润）。不等的脂肪滴，肝小叶可见点状或灶状坏死以及轻度炎症细胞浸润）。血清肝功能生化指标测定 甘油三酯（甘油三酯（TGT

7、G）、丙氨酸氨基转移酶）、丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase(alanine aminotransferase，ALT)ALT)、天门冬酸氨基转移酶天门冬酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase(aspartate aminotransferase，AST)AST)含量测定。含量测定。肝组织匀浆中脂质过氧化指标的测定 超氧化物歧化酶超氧化物歧化酶(SOD)(SOD)、GSH-PXGSH-PX活性，活性，GSHGSH、 MDA MDA 含量和金属硫蛋白（含量和金属硫蛋白（MTMT）、）、CYP2E1CYP2E1、ADHADH、ALDHAL

8、DH表达量的测定。表达量的测定。研究方法与技术路线研究方法与技术路线3、技术实施路线预期成果预期成果 1、LBP和ZnSO4有协同作用。用两者复配的溶液的抗氧化能力比单因子的抗氧化能力强。2、复配溶液其抑制酒精所致肝损伤的作用机制可能与抗氧化应激、抑制脂质过氧化、抑制 TNF-、IL-1 等细胞因子以及 CYP2E1 的表达有关。3、酒精肝病后，血清中丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)增加,而乙醇脱氢酶（ADH）在酒精肝病发生后，其活性显著降低。同时酒精可以增加分解色素氧化酶（CYP2E1）的代谢途径。但是在LBP和ZnSO4有协同作用后，以上现象均有所缓解。计划安排计划安排2013.92013.10 文献查阅，实验方法初步拟定2