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会计学1大肠杆菌感受态细胞的制备与质粒大肠杆菌感受态细胞的制备与质粒DNA的转化的转化第1页/共20页一、实验目的一、实验目的第2页/共20页第3页/共20页转化（转化（transformation）是将异源是将异源DNA分子引分子引入一细胞株系，使受体入一细胞株系，使受体即不含限制性内切酶和即不含限制性内切酶和甲基化酶的突变株。甲基化酶的突变株。第4页/共20页第5页/共20页第6页/共20页第7页/共20页重组重组DNADNA转化转化细菌过程示意图细菌过程示意图第8页/共20页第9页/共20页步开始，所有操作均在冰上进行，速度尽量快而稳）；第10页/共20页第11页/共20页第12页/共20页第13页/共20页第14页/共20页第15页/共20页第16页/共20页对对策策 原原 因因1.感受态细胞低效2.抗生素使用错误3.转化后立即涂板忘记温浴1.使用高效率的感受态细胞（106以上）2.复查质粒抗性，使用正确的抗生素3.转化后温浴30min左右，让抗性基因得以表达第17页/共20页第18页/共20页LB长，如图2。图图1 1图图2 2第19页/共20页

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