饲料营养成分的测定

1、饲料营养成分的测定1、饲料中水分的测定饲料中的水分存在形式有两种，一是游离水（乂叫初水），二是吸 附水。因此水分的测定一般包括初水和吸附水的测定，总水的计算。 有些饲料如子实、糠款类饲料和秸杆、十草等都处于风十状态，因 此只测吸附水（也就是总水），不测初水和计算总水分的含量。1.1初水分的测定1.1.1 仪器设备工业天秤，电热式恒温烘箱，剪刀，粉碎机，样本瓶，药匙，培养 M ,筛子。1.1.2 测定原理含水分高的新鲜饲料在60-65 C烘箱中烘十至恒重，逸失的重量即为 初水。1.1.3 测定步骤取平均样品200-300g ,置于已知重量的培养皿中，先在80 C条件下， 烘15min ,然后放在

2、60-65 C的烘箱中，进行十燥，十燥到样品容易 磨碎（5-6h ） o将烘十的样品放在室内自然的条件下冷却4-6h （不 少于2h ）,便成为风十状态。称重：重复上述操作，直到两次称重 之差不超过0.5g为止。1.1.4计算：初水分=烘十前后重量之差/鲜样品重*100%1.2吸附水分测定（十物质测定）1.2.1 测定原理在105 C 土 2烘箱内，在大气压下烘十，直至恒重，逸失的重量为试样 吸附水分。在该温度下十燥，不仅饲料中的吸附水被蒸发，同时一 部分胶体水分也被蒸发，另外还有少量挥发油挥发。1.2.2 仪器设备称量瓶，烘箱，药匙，十燥器（用氯化钙或变色硅胶作十燥剂）， 分析天平，土甘埸钳

3、，小毛刷。1.2.3 测定步骤洁净的称量瓶，在105 C烘箱中烘1h,取出，在十燥器中冷却30min , 称重，准确至0.0002g。重复以上动作，直至两次重量之差小于 0.0005g为恒重。在已知重量的称量瓶中称取两份平行试样，每份 2-5g （含水重0.1g以上，样厚4mmt下）,准确至0.0002g ,称量瓶 不盖盖，在105 C烘箱中烘3h （温度到达105 C开始计时）,取出， 盖好称量瓶盖，在十燥器中冷却30min，称重，再同样烘十1h ,冷却， 称重，直到两次重量差小于0.0002g。1.2.4 测定结果的计算1.2.4.1 计算公式见下式：水分=（W1-W2） / （ W1-W

4、0） *100%式中：W仇烘十前试样及称量瓶重（g） ; W以/ 105 C烘十后试样及 称量瓶重（g） ; W（fe已恒重的称量瓶重（g）。1.2.4.2 重复性：每个试样应取两个平行样进行测定，以其算术平 均值为结果。两个平行样测定值相差不得超过0.2% ,否则重做。精密度：含水量在10%以上，允许相对偏差为1%;含水量在5-10%时， 允许相对偏差为3%,含水量在5%以下时，允许相对偏差为5%。相对偏差=每个平行测定结果与两次平行测定结果平均值之差/两次 平行测定结果平均值。1.2.5 注意事项1.2.5.1 加热时样本中有挥发物质可能与样本中水分一起损失，例 如宵贮料中的VFA。1.2

5、.5.2 某些含脂肪高的样品，烘十时间长反而增重，为脂肪氧化 所致，应以增重前那次重量为准。1.2.5.3 含糖分高的易分解或易焦化试样，应使用减压十燥法 （70 C , 600m林柱以下，烘十5h测定水分）。1.3 SC69-02C 型水 分快速测定仪1.3.1 原理：使试样受红外线辐射波的热 能后，游离水分迅速蒸发 后，即能通过仪器上的光学投影装置直接读出试样物质含水率的白 分比。1.3.2 操作步骤1.3.2.1 十燥预热：预热5分钟，关灯冷却至常温。1.3.2.2 开灯20分钟后，用10g石去码校正零点。在加码盘中放置5克 石去码，并在天平或仪器上称取试样5g。1.3.2.3 加热测试

6、：开启红外灯，对试样进行加热，在一定的时间 后刻度移动静止，表示水分蒸十，记录读数即为水分数。1.3.2.4 取下被测物和石去码。1.4饲料总水分的计算饲料分析结果，通常都用风十状态样本的白分含量表示。为了将这 些数字换算成原始饲料或绝十饲料的白分含量，必须计算总水分。计算公式：OB=Y+（100-Y）*X/100式中：O既饲料中总水分的白分数；Y为初水分的白分数；X为吸附 水白分数。2饲料中粗蛋白质的测定2.1国标法2.1.1 测定原理凯氏法测定试样含氮量，即在催化剂存在下，用硫酸破坏有机物， 使含氮物转化成硫酸铉。加入强碱并蒸僻使氨逸出，用硼酸吸收后， 用标准盐酸滴定测得含氮量，乘以氮与蛋

7、白质的换算系数6.25 ,计 算粗蛋白质含量。2.1.2 仪器设备样品粉碎机，常量直接蒸僻装置或半微量水蒸汽蒸留装置，凯氏烧 瓶（100或150ml ），三 角瓶（150或250ml ）,洗瓶（500ml ）,酸式 滴定管（25ml ）,移液管（10ml ）,消化电炉。2.1.3 试剂及配制2.1.3.1 浓硫酸：比重1.84。2.1.3.2 硫酸铜、硫酸钾或硫酸钠。2.1.3.3 40%NaOH 溶液：40gNaOH溶于 100ml 蒸僧 水中。2.1.3.4 标准硫酸胺：优级纯于105 C烘1-2h ,十燥器内冷却备用。2.1.3.5 2% 硼酸溶液：2g硼酸溶于100ml蒸僧水中。2.1

8、.3.6 0.1mol/L 盐酸：8.3mlHCL ,加蒸僧水定容于1000ml容量瓶 中，混合均匀标定。2.1.3.7 甲基红-漠甲酚绿混合指示剂：0.1%甲基红洒精溶液与0.5% 漠甲酚绿洒精溶液，两溶液等体积混合，阴凉处保存3个月以内。2.1.3.8 盐酸溶液的标定：基准物无水碳酸钠于270-300 C灼烧1h至 恒重，称0.2g（准至0.0002g）,溶于50ml蒸僧水中，加2滴指示剂，用HCL溶液滴定至灰红色。C（HCL）=W（Na 2CQ）/0.053V（HCL）2.1.4 测定步骤2.1.4.1 试样的消化取0.5-1g试样(含 氮量5-80mg ),准确至0.0002g ,无损

9、地放入凯氏 烧瓶中，加入0.4g硫酸铜、6g硫酸钾，与试样混合均匀，再加浓硫 酸10ml和2粒玻璃球。把凯氏烧瓶放在通风柜里的电炉上小心加热， 待样品焦化，泡沫消失，再加大火力(360-410 C),直至全部内容 物呈透明的浅蓝色或白色为止。试剂空白测定：另取凯氏烧瓶一个，加入0.4g硫酸铜、6g硫酸钾， 再加浓硫酸10ml和2粒玻璃球。加热消化至瓶内溶液澄活。另称量标准硫酸铉0.2g ,同时按上述方法处理。结果应为21.19 土0.2%。2.1.4.2 氨的蒸僻2.1.4.2.1 常量直接蒸僻法待试样消化液冷却，加蒸僻水60-100ml ,摇匀，冷却。沿瓶壁小心 加入50mlNaOH溶液，立

10、即与蒸僻装置相连，蒸僻装置冷凝管的末端 应浸入25ml硼酸吸收液1cm。加混合指示剂2滴，轻摇凯氏烧瓶，使 溶液混匀，加热蒸僻。直至僻水液体积约150ml。先将吸收液取下， 再停止加热。2.1.4.2.2 半微量水蒸汽蒸僻法待试样的消化液冷却，加蒸僻水20ml,移入100ml容量瓶，冷却后用 水稀释至刻度，摇匀，为试样分解液。取20ml硼酸溶液，加混合指 示剂2滴，使半微量装置的冷凝管末端浸入此溶液。准确移取试样分 解液10-20ml ,注入蒸僻装置的反应室中，用少量蒸僻水冲洗进样入 口，塞好入口玻璃塞，再加10mlNaOH溶液，小心拉起玻璃塞使之进 入反应室，将玻璃塞塞好，且在入口处加水封好

11、，防止漏气，蒸僻 4min ,使冷凝管末端离开吸收液面，再蒸僻1min ,用蒸僻水洗冷凝 管末端，洗液均流入吸收液。注： 上述两种蒸僻法测定结果相近，可任选一种。2.1.4.3 滴定吸收氨后的吸收液立即用0.1mol/L 盐酸标准液滴定，溶液由蓝绿色 变为灰红色即为终点。将试剂空白测定之消化液和测回收率的硫酸 铉的消化液同样处理。2.1.5 测定结果计算2.1.5.1 计算公式粗 蛋白质=C（V i-V2）*0.014*6.25/（WV3/V）*100%式中：C为HCL标准液的浓度（mol/L） ; M样本重（g） ; V为滴定样 品时所用HCL标准液体积数（ml ） ; V2为空白滴定所用盐

12、酸标准液体 积数（ml） ; V为试样分解液总体（ml） ; V3为试样分解液蒸僻用体 积（ml ） ; 0.014为氮的毫克当量；6.25为氮换算成蛋白质的平均系 数。2.1.5.2 重复性每个试样取两平行样进行测定，以其算术平均值为结果。当CP含量 在25%以上，允许相对偏差为1%;当CP量在10-25% ,允许相对偏差 为2%;当CP含量在10%以下，允许相对偏差为3%。2.2凯氏定氮仪法2.2.1 仪器及试剂准备同仲裁法2.2.2 操作步骤2.2.2.1 消化前准备2.2.2.1.1 将抽气泵的螺口同水咀的内螺纹联接牢，然后将蠹气罩上 的胶管一头接在抽气泵的横出口处，抽气泵下端用胶管能

13、止下水道（注：出水胶管长度不得超出30cm并不准弯曲），开足水咀，使抽 气泵有足够的吸力。2.2.2.1.2 接通消化炉上的电源插座，开电源开关。2.2.2.2 消化操作2.2.2.2.1 称取0.3-1g 试样、液体2-5ml （含氮量5-80mg ）准确到 0.0002 ,十净无损失地转入活洗十净的消化、加入催化剂6.4g再加 入浓硫酸8-25ml。2.2.2.2.2 将装有试样的消化管放在消化炉支架上，盖上蠹气罩， 向下压紧蠹气罩锁牢两面锁钩。2.2.2.2.3 手提蠹气罩中间连同装有试样的消化管一起移到电热炉 上保持消化管在电炉中心，开始样品消化，保持消化管中液体连续 沸腾 ，沸酸在瓶

14、颈部下冷凝回流。待溶液消煮至无微小碳粒、呈 兰绿色时继续消煮30-40min。2.2.3 蒸僻2.2.3.1 蒸僻前准备2.2.3.1.1 仪器保持目测水平2.2.3.1.2 接通进水口、排水口，注意 排水胶管出水口，不得高 于仪器底平面，同时关闭排水阀门。2.2.3.1.3 接通电源 ，电源线必须有良好的接地线，时时必须保 持同仪器相同，禁止接地借用零线，再检查电源是否牢靠。2.2.3.2 蒸僻操作2.2.3.2.1 先于电源总开关后开自来水龙头，使自来水经过给水口 分别进入冷凝管和稳压泵，由稳压泵对蒸汽发生炉供水并进行汽的 稳压。注意水流量以保证冷凝管起到冷却作用并预热15分钟。2.2.3

15、.2.2 开蒸僻开关，待蒸汽导出管放出蒸汽时，关闭蒸汽开关， 从观察窗观察待蒸发炉水位稳定（水位保持在电极底部）。2.2.3.2.3 在接收瓶托架上，放上已经加入适量（15ml ）接收液（硼 酸和混合批示剂）的锥形瓶，使蒸僻导出管未端浸入接收液中。2.2.3.2.4 按下消化管托架将消化好并冷却后的消化管，单个套在 防溅管的密封圈上稍加旋转，其保持接口密封，抬上托架，关上防 护罩。2.2.3.2.5 开蒸僻水开关，加蒸僻水约10ml左右，再加碱液开关， 加适量NaOH溶液至蒸僻液碱性颜色变黑为止。2.2.3.2.6 开抽吸开关，抽出消化管内残存废液，然后关抽吸开关， 开蒸僻开关至蒸汽活洗约1m

16、in后关蒸僻开关，取下消化管，按上步 骤可连续蒸僻。2.2.4 滴定吸收氨后的吸收液，用标定后的盐酸溶液进行滴定，溶液由兰绿色 变为灰紫色为终点。2.2.5 空白测定用0.1g糖代替样品或不加样品作空白测定。2.2.6 测定结果计算2.2.6.1 计算公式粗 蛋白质 =（V2-V1）*C*0.014*6.25/W*100式中：V2-滴定试样时消耗酸标准溶液的体积（ml）V2-滴定空白时消耗酸标准溶液的体积（ml）C-酸标准溶液的mol/L浓度W-度样质量2.2.6.2 平等测定的结果用算术平均值表示，保留小数后二位。2.3饲料中真蛋白质的测定2.3.1 原理蛋白质在一定碱性条件下，能与重金届盐

17、类发生盐析作用而析出沉 淀，此沉淀物不溶于热水，而非蛋白氮则易溶于水中。用热水洗沉 淀，将水溶性含氮物洗去，剩下的沉淀再测蛋白，得出真蛋白质的 含量，用真蛋质与粗蛋白质含量之比（蛋白质比率），可判断出鱼粉 中是否掺入水溶性非蛋白含氮物质。鱼粉真蛋白质比率与指标：进口鱼粉中真蛋白质比率不得小于80%, 国产鱼粉中真蛋白质比率不得小于75%。2.3.2 仪器设备样品粉碎机，常量直接蒸僻装置或半微量水蒸汽蒸留装置，凯氏烧 瓶（100或150ml ），三 角瓶（150或250ml ）,洗瓶（500ml ）,酸式 滴定管（25ml ）,移液管（10ml ）,消化电炉，中速定性滤纸，表 面血，玻璃棒，漏斗

18、。2.3.3 试剂与溶液2.3.3.1 浓硫酸：比重1.84。2.3.3.2 硫酸铜、硫酸钾或硫酸钠。2.3.3.3 40%NaOH 溶液：40gNaOH溶于 100ml 蒸僧 水中。2.3.3.4 标准硫酸胺：优级纯于105 C烘1-2h ,十燥器内冷却备用。2.3.3.5 2% 硼酸溶液：2g硼酸溶于100ml蒸僧水中。2.3.3.6 0.1mol/L 盐酸：8.3mlHCL，加 蒸僧水定容于1000ml容量瓶。2.3.3.7 硫酸铜水溶液：100g/L。2.3.3.8 25g/L NaOH 溶液：25gNaOH 溶于 1000ml 蒸僧水中。2.3.3.9 氯化彻试液：50g/L氯化彻水

19、溶液。2.3.4 样品选取与制备同仲裁法2.3.5 测定步骤2.3.5.1 试样的处理：称取试样1-2克（精确至0.0001g）于200ml烧杯中，加水50ml煮沸，加入10%的硫酸铜溶液20ml和2.5%的氢氧 化钠溶液20ml ,边加边搅拌，加完后继续搅拌1min ,放置1小时以 上或静置过夜，沉淀物以中速定性滤纸过滤，用70 C以上热水反复 洗残渣，直至滤液无硫酸根离子为止（取5%氯化彻试液5滴于表面也 中，加2mol/L盐酸1滴，滴入滤液，在黑色背景处观察应无白色沉 淀）。将滤纸与残渣包好，放入烘箱，在65-75 C十燥2h.2.3.5.2 试样的消化：将烘十的试样连同滤纸一起放入消化

20、管中，以 下操作同仲裁法或凯氏定氮仪法。2.3.6 结果计算2.3.6.1 计算公式粗蛋白质与真蛋白质含量计算方法同仲裁法或凯氏定氮仪法。真蛋白质比率（%）=真蛋白质含量/粗蛋白质含量*1002.3.6.2 重复性蛋白质含量在40%以上时允许相对平均偏差2%;蛋白质含量在40%以下时允许相对平均偏差2.5%。3饲料中粗脂肪的测定饲料脂肪的测定，通常是将试样放在特制的仪器中，用脂溶性溶剂 （乙酰、石油酰、氯仿等）反复抽提，可把脂肪抽提出来，浸出的 物质除脂肪外，还有一部分类脂物质也被浸出，如游离脂肪酸、磷 脂、蜡、色素以及脂溶性维生素等，所以称为粗脂肪。测定粗脂肪的方法常用的有油重法、残余法、浸

21、泡法等。3.1粗脂肪测定仪法3.1.1 仪器和用具3.1.1.1 分析天平：感量0.0001g3.1.1.2 实验室用粉碎机或研钵3.1.1.3 十燥箱3.1.1.4 备有变色硅胶的十燥器3.1.1.5 脱脂棉、广口瓶、脱脂细纱、脱脂线3.1.1.6 脂肪测定仪及用具3.1.1.7 滤纸筒：用直径125mm圆形滤纸摺成外径24mm左右，长度50mm左右的滤纸筒3.1.2 试剂无水乙酰，AR级3.1.3 操作步骤3.1.3.1 检查电源 上否完好，水源是否接牢，开电源开关，设定 温控仪和调温旋扭温度，预热15分钟。3.1.3.2 将抽提筒用开水洗净，洗至筒内无任何杂质，置于十燥箱 内烘1小时左右

22、（105 C）取出编号，称重后移入十燥器内冷却备用， 编号并称重。3.1.3.3 试样准备3.1.3.3.1 粮食、饲料等低油样品，可直接称取粉碎样品2克左右， 精确至0.0002克，先在滤纸筒内底部塞一层脱脂棉，然后将样品转 入筒内，再用脱脂棉盖在试样上。3.1.3.3.2 油料等高油样品在备用试样中称取2克左右试样，倒入 烘盒中，放入十燥箱中在105 C温度下烘30分钟趁热加入研钵中进 行研磨，磨粹后，加入适量的脱脂细砂（约2克左右）与试样同磨， 将试样研至出油状后，十净地转入在底部塞脱脂棉滤纸筒内，用脱 脂棉醮少许乙酰，揩净研钵上试样和脂肪，并入滤纸筒内，再用脱 脂棉盖在试样上。3.1.

23、3.4 试样转入仪器，手握提把，使速节通近软轴提至适当位置， 将滤纸筒上口对准速节吸合即可，然后拉下提把，将滤纸筒移至适 当高度（使抽提筒放入时不碰），并观察滤纸筒时否在冷凝管中心。3.1.3.5 将抽提筒从十燥器中取出，置于托架上，在抽提 内加入 适量的无水乙酰约50ml ,然后手握托架手柄将抽提筒移入加热板上， 然后用托架将抽提筒抬上，使抽提筒上口对准下保护套的园柱孔， 保证二平面接触良好，拉下压杆使锁紧勾子同座子锁牢，然后再将 抽提筒稍加旋转，以保证二平面接触良好。3.1.3.6 接通水源给水管、排水管，开启冷凝管旋塞至手柄方向垂 直于水平面。3.1.3.7 手握提把上移，将试样降入抽提

24、筒底浸泡，此时，将温控 仪和调温旋扭温度设置为60-70 C ,具体按溶剂沸点及室温度。3.1.3.8 从溶剂挥发开始浸泡适当时间，将滤纸筒年长约5cm,进行 抽提，再将滤纸筒提升1cm,同时将冷凝管旋塞塞至手柄方向平行于 水平面进行溶剂回收，时间约为15分钟。3.1.3.9 关闭电源，左手握住压杆，拉开锁紧勾子，使冷凝管复位， 同时右手握住托架手柄将托架上抬，等冷凝管复位后，用托架皎抽 提筒在加热板上取出，待溶剂完全挥发后转入十燥箱中烘去水分， 一般为45分钟（105 C）后移入十燥器内冷却称量，计算含油量， 最好使所得油脂达到恒重（即多次烘干、冷却、称量，使最后二次 称重，前后重差在0.0

25、02g以内）。3.1.3.10 将滤纸筒移至适当位置，摘下滤纸筒后，取出回收溶剂， 回收时将溶器放在冷凝管下部，容器口对准冷凝管下口完全打开旋 塞，等到聚集在冷凝管内的溶剂流完为止，取出盛有回收溶剂的容 器，倒入大容器中以备用。3.1.3.11 使用结束 ，关闭电源 ，擦洗干净3.1.4 时间表含油量（%）浸泡时间（h）提抽时间（h）0.5-50.515-151115-2511.525-351.51.535-452.5245-6032.53.1.5 结果计算粗脂肪睥 W1/W2*100W1-粗脂肪重量W2-试样重3.2 国标法3.2.1 测定原理用乙酰等有机溶剂反复浸提饲料样本，使其中脂肪溶丁

26、乙酰，并收 集丁盛酰瓶中，然后将所有的浸提溶剂加以蒸发回收，直接称量盛 酰瓶中的脂肪重，即可计算出饲料样本中的脂肪含量。3.2.2仪器设备索氏脂肪抽提器，包温水浴锅，干燥器，土甘埸土甘，烘箱，镶子，称 量瓶，分析天平，滤纸或滤纸筒（中速脱脂）。3.2.3 试剂无水乙酰（化学纯）。3.2.4 测定步骤3.2.4.1 索氏提取器应干燥无水，将抽提瓶洗净丁 105 C ± 2 C干燥箱 中烘干30min ,然后置丁干燥器中冷却30min ,称重，如此反复进行， 至最后两次重量之差小丁 0.0008g为止。3.2.4.2 精称风干样品2g左右丁滤纸筒中或用滤纸包好，并用铅笔 注明标号，放入1

27、05 C烘箱中烘干2h。滤纸筒应高丁提取器虹吸管的 第10页共34页高度，滤纸包长度。应以可全部浸泡于乙酰中为准。3.2.4.3 将滤纸筒或包放入抽提管中，在抽提瓶中加无水乙酰 60-100ml ,在60-75 C的水浴上加热，使乙酰回流每小时约为8-10次。 浸提时间依样品中脂肪含量而定。一般约需8-16h或检查抽提管流出 的乙酰挥发后不留下油迹为抽提终点。3.2.5 结果计算3.2.5.1 计算公式粗脂肪=（W2-W3）/W 1*100%式中：W为样品重（g） ; W为抽提瓶重（g） ; W为盛有脂肪的抽提 瓶重量（g）。3.2.5.2 重复性每个试样取两平行样进行测定，以其算术平均值为结

28、果。粗脂肪含量在10%以上，允许相对偏差为3%。粗脂肪含量在10%以下 时，允许相对偏差为5%。4饲料中粗纤维的测定4.1粗纤维测定仪4.1.1 仪器和用具4.1.1.1 粗纤维测定仪4.1.1.2 分析天平4.1.1.3 十燥箱4.1.1.4 高温炉4.1.1.5 粉碎机及分样筛4.1.1.6 十燥器4.1.2 试剂硫酸、氢氧化钠、95%乙醇、乙酰、正辛醇4.1.3 操作前准备4.1.3.1 试剂制备4.1.3.1.1 硫酸溶液（0.128mol/L）:取浓硫酸约75ml,用 蒸僧水稀释到1000ml ,用已知浓度的NaOH液标定后，调整其浓度至1.28 土 0.005mol/L 的硫酸原液

29、，用前用蒸僻水稀释10倍即可。4.1.3.1.2 碱溶液（0.312mol/L）:取饱和 NaOH 溶液（680g/L ）约190ml，用不含CQ蒸僻水稀释500ml，用已知浓度的酸液标定后，调 整其浓度至3.12 土 0.005mol/L 的碱原液，用前用蒸僻水稀释10倍即4.1.3.2 样品制备4.1.3.2.1 取有代表性的样品，拣去杂质，按四分法取25g左右。4.1.3.2.2 将样品置在60-65 C烘箱骨十燥8小时左右，冷却后粉碎， 全部通过0.84mm 2（20目）筛子，其中大于40目的不得小于50%,小 于60目不得大于10%04.1.3.2.3 样品中的脂肪含量超过1%需要脱

30、脂，（可用测定粗脂肪 后残渣分析）。4.1.3.2.4 将土甘锅用开水洗净，洗至土甘锅内无杂质，置于十燥箱内 105 C烘1小时，移入十燥器内冷却至室温，编号,再置于十燥箱内 备用。4.1.4 操作步骤4.1.4.1 在已编号后的给锅内准确地称取净十的平均试样或烘干无 水 的脱脂1-3g （谷物2-3g ）准确至0.0001g。4.1.4.2 接通电源、水源、开启主机电源开关（自来水尽是开足保证 冷凝）。4.1.4.3 打开酸、碱预热瓶上盖，分别 加入已制备的酸碱溶液及蒸 僻水，加至预热瓶的90%,盖上冷凝球。4.1.4.4 开启酸预热电源开关，预热酸至微沸。4.1.4.5 将装有试样的土甘锅

31、移入仪器温室中，下部放入土甘锅座中心， 上部对准消煮管下的保护套的内孔，压下手柄并锁紧再一次检查给 锅位置是否准确后，将下阀全部关闭，逐个拉出加热器手柄。4.1.4.6 开启酸阀，逐个开上阀，在消煮管内加入少量约5ml硫酸溶 液，再开吸开关，逐个开下阀，抽尽溶液 ，关吸开关和全部下阀。 然后将乙预热好的硫酸溶液加至150ml后，再在每个消煮管内加入 3-4滴正辛醇，开定时器同时按需要分别开中热器电源开关，调节选 位旋钮可观察单个加热电压。并将电压调至最高（220V）同时开启 蒸僻水预热开关（预热水至沸点）。待消煮液微沸，将电压逐个调至 样品无沉淀时将定时旋钮旋至30min，保持消煮液微沸（如发

32、现试样 粘壁可补加消煮液），到时加温自动停止。4.1.4.7 开吸开关，再逐个开下阀将消煮液快速抽掉（在10min内抽 尽）并用热水洗涤残渣至中性（约三次）后抽尽洗液，在抽滤过程 中如发现给锅被堵塞时关吸开关，开吹开关用气流反冲，发现消煮 管内出现气泡后关吹开关开吸开关继续抽吸4.1.4.8 按4.6步骤进行碱消煮。4.1.4.9 按4.7方法抽洗碱消煮液，逐个推进加热器手柄。4.1.4.10 脱色和胶脂，全部关闭下阀，用胖肚吸管分别在消煮管上 口分三次加入95%乙醇浸泡、抽滤（总共约20ml ,每次泡浸时间约 1min ）后，再分三次加入乙酰冲洗（每次约20ml ），若已脱脂样品不 需要用乙

33、酰冲洗。4.1.4.11 左手压下手柄拉出锁紧勾子缓缓上升，使其复位，带好手 套取出存有试样的土甘锅，待乙酰和乙醇全部挥发完，再移入十燥箱 内在130 C温度下烘2小时，取出置于十燥器内冷却至室温称重（A1 ）。4.1.4.12 将称重后的给锅置 入550 C电阻炉内灼烧30min，待炉温 降至200 C以下，从电阻炉内取邮置于十燥器内冷却至室温称重（A）。4.1.5结果计算CF （ A1-A2） + S1 X 100CF一粗纤维的白分含量（%）Ai一土甘锅+粗纤维+残渣及灰分质量（g）A2一土甘锅+残渣及灰分质量（g）S1-试样重量（g）4.2 国标法4.2.1 测定原理用固定量的酸和碱，在

34、特定条件下消煮样品，再用乙醇除去醇溶解 物，经高温灼烧扣除矿物质量，所余量即为粗纤维。粗纤维不是一 个确切的化学实体，主要由纤维素和少量半纤维素、木质素等组成。4.2.2 仪器设备抽滤装置（抽真空装置、抽滤瓶及漏斗），电炉，马福炉，高型无 嘴烧怀，冷凝球，古氏给埸，十燥箱，量筒（200、50ml）、酸洗石 棉。4.2.3 试剂及配制4.2.3.1 硫酸溶液（0.128mol/L）:取浓硫酸约75ml,用蒸僧水稀释到1000ml,用已知浓度的NaOH液标定后，调整其浓度至1.28 土 0.005mol/L 的硫酸原液，用前用蒸僻水稀释10倍即可。4.2.3.2 碱溶液（0.312mol/L）:取

35、饱和 NaOH 溶液（680g/L ）约 190ml ,用不含CQ蒸僻水稀释500ml ,用已知浓度的酸液标定后，调整其浓 第13 页共34页度至3.12 土 0.005mol/L 的碱原液，用前用蒸僧水稀释10倍即可。4.2.3.3 乙酰、95%乙醇、正辛醇。4.2.4 测定步骤4.2.4.1 酸处理：精称样本1-2g左右（若样本脂肪含量在8帅上， 须先用乙酰脱脂）,小心放入500ml高型无嘴烧杯，用量筒准确加入 200ml硫酸，加一滴防泡沫剂，并在液面处划一刻度线。然后放在电 炉上，装上冷凝球，通入冷水，加热使溶液在1min内沸腾，记时， 维持微沸状态30min ,取下加入蒸僻水200ml

36、,静置15-20min ,待样 品下沉后，在抽滤装置上抽去上活液，再用少量蒸僻水冲洗漏斗。 滤布处附着样本于无嘴烧杯中，然后用NaOH容液中和至沉淀液呈中 性（用广泛试纸检查）。4.2.4.2 碱处理：在无嘴烧杯中加入NaOH容液至200ml刻度处，将无 嘴烧杯在电炉上如酸处理一样微沸处理30min ,取下加入蒸僻水 200ml,静置15-20min ,抽去上层活液，冲洗滤布后，用硫酸调至中 性。4.2.4.3 抽滤：将经酸、碱处理后的中性沉淀液移入辅有石棉的古 氏土甘埸中抽滤，然后将烧杯壁残渣完全洗于土甘埸中抽滤，再用乙醇 25ml冲洗给埸中的残渣。4.2.4.4 烘十灰化：取下给埸，用纱布

37、将其外壁擦净，放入105C烘 箱中烘至恒重，然后于电炉上小心炭化至无烟后，放入550 C高温电 炉灼烧30min ,称重，再灼烧15min ,冷却称重，直至恒重为止。4.2.5 结果计算4.2.5.1 计算公式同粗纤维测定仪法4.2.5.2 重复性：每个试样应取两个平行样测定，以其算术平均值 为结果。粗纤维含量在10%以下，允许绝对值相差0.4 ;粗纤维含量 在10%以上，允许相对偏差为4%。5饲料中粗灰分的测定试样经灼烧完全后，余下的残留物质（如氧化物和盐）称为灰分。 灰分有水溶性与水不溶性，酸溶性、酸不溶性。水溶性灰分大部分 是钾、钠、钙、镁等氧化物和可溶性盐，水不溶性灰分除泥沙外， 还有

38、铁、铝等的氧化物和碱土金届的碱式磷酸盐。酸不溶性灰分大 部分为污染掺入的泥沙和原来存在于动植物组织中经灼烧成的二氧 化硅。5.1 测定原理饲料中灰分的测定一般采用灰化法。将试样在550 C烧灼，使构成饲 料有机物的主要元素C、N、H、等氧化，所余残渣即饲料中所含各种 矿物元素的氧化物、氯化物及碳酸盐，以及混杂在饲料中粘土、砂 粒等，称为粗灰分。5.2仪器设备样品粉碎机，分析天平（感量0.0001g ）,电炉，给埸钳，马福炉， 瓷给埸（50ml）,十燥器（变色硅胶作十燥剂）、40目分样筛。5.3试剂及配制0.5%氯化铁墨水溶液（称0.5g氯化铁溶于100ml蓝墨水中）5.4测定步骤5.4.1 将

39、带盖土甘埸洗净烘十后，用钢笔蘸0.5%氯化铁墨水溶液编号。5.4.2 将给埸和盖一起放入马福炉，在550 C 土 20 C下灼烧30min ,称 重再重复灼烧，冷却、称重，直至两次重量之差小于0.0005g为恒重 里。5.4.3 在已知重量的给埸中称取2g左右试样（不超过给埸容量的一 半，灰分重量应在0.05g以上），在电炉上低温碳化至无烟为止。5.4.4 炭化后将土甘埸移入马福炉中，于550 C下灼烧3h ,使全部样品 变成灰白色或红棕色（含有铤）。待灰化结束后，待炉温降至200 C 下时打开炉门，将给埸取出于空气中冷却1min.,放入十燥器中冷却 30min ,称重。再同样灼烧1h ,冷却

40、，称重，直至两次重量之差小于 0.001g 为恒重量。5.5结果计算5.5.1 计算公式：粗灰分=（W2-W0）/（W 1-W0）*100%式中：W0为已恒重量空土甘埸重（g） ； W为土甘埸加试样重（g） ; W为 灰化后给埸加灰分重（g）。5.5.2 重复性：每个试样应取两个平行样进行测定，以其算术平均 值为结果。粗灰分含量在10%以上，允许相对偏差为0.5% ;粗灰分含量在5-10% 以上，允许相对偏差为1%;粗灰分含量在5%以下，允许相对偏差为 5%。5.6注意事项5.6.1 样品开始炭化时，应打开部分土甘埸盖，便于气流流通；温度 应逐渐上升，防止火力过大而使部分样品颗粒被逸出的气体带

41、走。5.6.2 为了避免样品氧化不足，不应把样品磨得太细，压得过紧， 样品应松松地放在土甘埸内。5.6.3 灼烧温度不宜超过600 C,否则会引起磷、硫等盐的挥发。5.6.4 灼烧残渣颜色与试样中各元素含量有关，含铁高时为红棕色， 含铤高为淡蓝色。但有明显黑色炭粒时，为炭化不完全，应延长灼 烧时间。6饲料中钙的测定钙的测定方法有高铤酸钾氧化还原滴定法、EDTAa合滴定法、原子 吸收分光光度法等。高猛酸钾法操作繁复，但准确度高，重复性好， 为国家标准仲裁分析法。EDT磁合滴定法手续简便、快速、适合于 大批样品的测定，为国家标准快速测定钙方法。6.1高铤酸钾氧化还原滴定法6.1.1 测定原理饲料样

42、品灰化后，用盐酸溶解，然后在溶液中加入草酸铉，使钙成 为草酸钙白色沉淀，然后用硫酸溶解草酸钙再用标准高铤酸钾溶液 滴定游离的草酸根离子。6.1.2 仪器设备烧杯，量筒，吸耳球，定量滤纸，洗瓶，电炉，容量瓶（100ml ）, 漏斗，移液管（10、20ml ）,表面皿，玻璃棒，酸式滴定管（25ml:）。6.1.3 试剂及配制6.1.3.1 1:3盐酸溶液。6.1.3.2 1:3硫酸 溶液。6.1.3.3 1:1氨水溶液。6.1.3.4 4.2% 草酸铉溶液。6.1.3.5 甲基红乙醇溶液（0.1g溶于100ml乙醇中）。6.1.3.6 浓硝酸6.1.3.7 0.05mol/L 高铤酸钾溶液6.1.

43、3.7.1 配制：称取高铤酸钾约1.6克，溶于1000ml水中，煮沸10min ,冷却静置1-2天，用沙芯漏斗过滤，滤液保存于洁净的棕色 瓶中备用。第16 页共34页6.1.3.7.2 标定：准确称取0.1克基准草酸钠（105 C烘十2h）,准确 至0.0002g ,溶于50ml水中，再加硫酸溶液10ml,将此溶液加热至 75-85 C。用配好的高铤酸钾标准溶液滴定。-滴定至溶液呈粉红色 且1min内不褪色为止。滴定结束后，溶液温度应保持在60 C以上。 按以下公式计算：C=m/0.067（V-V 0） C为高铤酸钾标准溶液浓度（mol/L）V滴定时消耗高铤酸钾标准溶液体积（ml）V0空白滴定

44、时消耗高铤酸钾标准溶液体积（ml）M基准草酸钠质量（g）6.1.4 测定步骤在粗灰分测定样本中，加HCL10ml和数滴浓HNO，小心煮沸，将 此液 转入100ml容量瓶中，再加以热水冲洗给埸，冷至室温后，定容混匀 备用。用移液管准确吸取样本液10-20ml于烧杯中加入甲基红两滴，滴加氨 水溶液至溶液由红变橙黄色。再滴加盐酸溶液至溶液乂呈红色（PH 为2.5-3.0 ）为止。加热煮沸后趁热加入草酸铉10ml边加热边搅拌。 若溶液由红变黄（或桔黄），则需滴加HC或呈红色，煮沸3-4min后， 放置过夜（或在水浴上加热2h）。用定量中速滤纸过滤，弃去滤液，用1:50氨水溶液冲洗烧杯及滤纸 上的草酸钙

45、沉淀6-8次，直至草酸钙被洗净为止（接取滤液2-3ml , 加硫酸数滴，加热80 C后，加高铤酸钾1滴，如溶液呈微红色，且 1-2min不褪色即可）。沉淀和滤纸转移入原烧杯中，加硫酸溶液10ml,蒸僻水50ml,加热 至75-85 C,立即用高铤酸钾-滴定至溶液呈微红且30s不褪色为止。 在十净烧杯中加滤纸1张，硫酸10ml,蒸僻水50ml,=# > 1#3 后，加 热至75-85 C ,立即用高铤酸钾-滴定至溶液呈微红且30s不褪色为 止。6.1.5 结果计算6.1.5.1 计算公式：C（Ca）=（V 3-Vo）*C*0.02*V1/V2/WM00%式中：M样本重（g） ; V1为样本

46、灰化液稀释用量（ml） ； V2为测 定钙时样本溶液用量（ml） ； V3为滴定样本高铤酸钾用量（ml）； Vo为滴定空白液高铤酸钾用量（ml） ; C为高铤酸钾溶液浓度（mol/L ）。6.1.5.2 重复性：样品应取两个平行样进行测定，以其算术平均值 为结果°Ca含量在5%以上，允许相对偏差3%;含量在5-1%时，允许相对偏差 5%;含量在1%以下，允许相对偏差10%。6.1.6 注意事项6.1.6.1 高铤酸钾溶液浓度不稳定，至少每月标定一次；6.1.6.2 每种滤纸空白值不同，消耗高铤酸钾标准液的用量不同， 至少每盒滤纸做一次空白测定。6.2 EDTA络合滴定法6.2.1 试

47、剂及配制6.2.1.1 硝酸6.2.1.2 三乙醇胺(分析纯)(1+1)水溶液6.2.1.3 钙红指示剂，1g钙试剂毯酸钠盐与99gNaCl (分析纯)混匀 研细。6.2.1.4 盐酸羟胺(分析纯)6.2.1.5 孔雀绿指示剂：0.1g 指示剂溶于100ml蒸僻水。6.2.1.6 20%NaOH6.2.1.7 EDTA 标准液(0.05mol/L):精称分析纯乙二胺乙酸二钠盐19g溶于水，稀释成1000ml ,摇匀备用。6.2.1.7.1 标定滴定度：含钙1mg的标准液10ml按样品测定法进行， 这时EDTA:对钙 的滴定 度为：T=CV/V 0C为钙标准溶液浓度；V为吸取钙标准溶液的体积；V

48、0为EDTA标准溶液滴定消耗的体积。6.2.1.7.2 浓度标定：称取1克于800 C灼烧至恒重的基准氧化锌， 称准至0.0002g。用少量水湿润，加20%盐酸溶液至样品溶解，移入 250ml容量瓶中，稀释至刻度，摇匀。取30-35ml ,加70ml水，用10% 氨水溶液中和至PH7-8，加10ml氨-氯化铉缓冲溶液(54gNH4CL,溶于 水，加15mol/L氨水394ml,稀释至1L)及5滴铭黑T指示液(5g/L),用 配制好的EDTA滴定至溶液由紫色变为纯蓝色。同时作空白试验。计算 公式为 C=m/(V 1-V 0)*0.08138其中：Vi为EDTQ用量；Vo为空白试验之用量；第18页

49、共34页m为氧化锌之质量。6.3测定步骤按高铤酸钾法制各样本分解液后，准确吸取分解液10ml于150ml三角 瓶中，加三乙醇胺溶液2ml,蒸僻水50ml ,孔雀绿指示剂1滴，用 20%NaO带解至无色，再加以NaOH夜2ml,立即加0.1g盐酸羟胺和少 量钙红指示剂，并立即用EDTAfe准液滴定至溶液由紫红色变为纯蓝 色为止。6.4结果计算C(Ca)=TV 2V°/(10mV 1)式中：T为滴定度V2实际消耗EDTA标准液的体积Vi分取试样分解液的体积V。试样分解液的部体积m试样的质量或 C(Ca)=C edta(V-V 0)40.1/m式中V为消耗EDTA的体积,V0为空白试验之用

50、量m为试样的质量。7总磷的测定7.1 测定原理先将试样中有机物破坏，在酸性溶液中使磷酸与偏钮酸和钳酸铉生 成黄色化合物，在波长420mm下进行比色测定。7.2仪器设备分光光度计，容量瓶或具塞比色管(50ml ),容量瓶(100ml或1000ml ), 刻度移液管。7.3试剂及配制7.3.1 盐酸(1:1水溶液)7.3.2 浓硝酸7.3.3 钮钳酸铉显色剂：称取偏钮酸铉1.25g ,加硝酸250ml;另取 钳酸铉25g ,加蒸僻水100ml溶解之，在冷却条件下将此溶液倒入上 溶液，且加蒸僻水调至1000ml,避光保存。如生成沉淀则不能使用。7.3.4 磷酸标准溶液：将磷酸二氢钾在105C十燥1h

51、 ,在十燥器中冷 却后称0.2197g ,溶解于蒸僻水中定量转入1000ml溶量瓶中，加硝酸第19 页共34页3ml ,用蒸僻水稀释到刻度，即成50ug/ml的磷标准溶液。7.4测定步骤在粗灰分测定样本中，加HCL10ml和数滴浓HNO，小心煮沸，将 此液 转入100ml容量瓶中，再加以热水冲洗给埸，冷至室温后，定容混匀 备用。7.4.1 标准曲线绘制：准确移取磷标准溶液0、1.0、2.0、4.0、6.0、 8.0、10.0、15.0ml于50ml容量瓶中，各加入机钳酸铉显色试剂10ml , 用蒸僻水稀释至刻度，摇匀，放置10min以上。以0ml溶液作参比， 用1cm比色池，在420波下，用分

52、光光度计测各溶液的吸光度，以 磷含量为横坐标，吸光度为纵坐标绘制标准曲线。7.4.2 试样测定：准确移取试样分解液1-10ml （含磷量50-500ug ）于50ml容量瓶中，加入钮钳酸铉显色试剂10ml,按标准曲线绘制的 方法显色和比色测定，测得试样分解液的吸光度，由标准曲线查得 试样分解液的含磷量。7.5结果计算7.5.1 计算公式:P（%）=100X/mV式中：m为试样重（g） ; V为比色测定时所移取试样分解液体积（ml ）； X为由标准曲线查得试样分解液含磷量（ug ）。7.5.2 重复性：每个试样称取两个平行样进行测定，以其算术平均 值为结果。含磷量在0.5%以上允许相对偏差3%;

53、含磷量在0.5%.以下， 允许相对偏差10%。7.6 注意事项7.6.1 比色时，待测液磷含量不宜过浓，最好控制在每毫升含磷0.5mg以下o7.6.2 待测液在加入试液后应静置10min ,再进行比色，但不能静置 过久。8饲料级DL-蛋氨酸的测定8.1 测定原理在中性介质中准确加入过量的碘溶液，将两个碘原子加到蛋氨酸的 硫原子上，过量的碘溶液用硫代硫酸钠标准滴定溶液回滴。8.2 试剂与材料8.2.1 磷酸氢二钾溶液：500g/L8.2.2 磷酸二氢钾溶液：200g/L。8.2.3 碘化钾 溶液：200g/L。8.2.4 碘溶液：C（1/2 I 2）约 0.1mol/L 。8.2.5 硫化硫酸钠

54、标准滴定溶液：C（NaS2Q）约0.1mol/L 。8.2.6 淀粉溶液：10g/L 。8.3分析步骤称取试样0.23-0.25g（ 精确至0.0002g） 移入500ml碘量瓶中，加入70ml无离子水，然后分别加入下列试剂：10ml磷酸氢二钾溶液、10ml 磷酸二氢钾溶液、10ml碘化钾溶液，待全部溶解后准确加入50ml碘 溶液，盖上瓶盖，水封，充分摇匀，于暗处放置30min.,用硫代硫 酸钠标准滴定溶液滴定过量的碘，近终点时加入1ml淀粉指示剂，滴 定至无色并保持30s为终点，同时做空白试验。8.4结果计算8.4.1 计算公式以质量分数表示的蛋氨酸含量（Xi）按下式计算：Xi=C（V-V

55、0）*0.0746/m式中：C为硫代硫酸钠标准滴定溶液的实际浓度（mol/L ） ; V为滴定 试样时消耗的硫代硫酸钠标准滴定溶液的体积（ml） ; V0为空白消 耗的硫代硫酸钠标准滴定溶液的体积（ml） ； m为试术的质量（g） 0.0746为与1.0ml硫代 硫酸钠标准滴定溶液C（NaS2O4）=1mol/L 相当 的、以克表示的蛋氨酸的质量。所得结果应表示至一位小数。8.4.2 允许差取平行测定结果的算术平均值为测定结果，两次平行测定结果的绝 对差值不得大于0.1%。9饲料级L-赖氨酸盐酸盐含量的测定9.1 试剂和溶液甲酸、冰乙酸、a-蔡酚苯基甲醇指示剂0.2%（m/v）冰乙酸指示液、高

56、 氯酸：浓度约为0.1mol/L 的冰乙酸标准溶液。9.2测定步骤试样预先在105 C十燥至恒重，称取十燥试样式0.2g ,称准至0.0002g ,加3ml甲酸和50ml冰乙酸，再加入5ml乙酸汞的冰乙酸溶液， 加入10滴a-蔡酚苯基甲醇指示液，用0.1mol/L高氯酸的冰乙酸标准 溶液滴定，试样液由橙黄色变为黄绿色即为滴定终点。用同样方法 另作空白试验以校正之。9.3结果计算9.3.1 计算公式：赖氨酸盐酸盐的白分含量按下式计算：0.09132*C*（V-V0）/m式中：c为高氯酸标准溶液之浓度（mol/L ） ; V为试样消耗高氯酸标 准液之体积（ml） ; V0为空白试验消耗高氯酸标准溶

57、液之体积（ml ）; m为试样之质量（mg） ； 0.09132为每毫摩尔赖氨酸盐酸盐之质量（g ）。9.3.2 两个平行试样测定结果之差不得大于0.2% ,以其算术平均值 报告结果。10饲料中水溶性氯化物的测定方法本方法适用于配合饲料、浓缩饲料和单一饲料。检测范围氯元素含 量为 0-60mg 。10.1 方法原理溶液澄活，在酸性条件下，加过量标准硝酸银使样品溶液中的氯化 物形成氯化银沉淀，除去沉淀后，用硫割酸铉滴定过量的硝酸银， 根据消耗的硫割酸铉的量，计算出其氯化物的含量。10.2 试剂实验室用水应符合GB6682中三级水用水的规格。使用的试剂除特殊 规定外应为分析纯。10.2.1 硝酸。10.