紫外-可见分光光度计

1、.紫外可见分光光度计（一）仪器特点与用途紫外-可见光谱仪涉及的波长范围是0.20.8微米（对应波数5000012500cm-1），它在有机化学研究中得到广泛的应用。通常用作物质鉴定、纯度检查，有机分子结构的研究。在定量方面，可测定结构比较复杂的化合物和混合物中各组分的含量，也可以测定物质的离解常数，络合物的稳定常数，物质分子量鉴别和微量滴定中指示终点以及在高效液相色谱中作检测器等。 （二）基本工作原理利用一定频率的紫外-可见光照射被分析的有机物质，引起分子中价电子的跃迁，它将有选择地被吸收。一组吸收随波长而变化的光谱，反映了试样的特征。在紫外可见光的范围内，对于一个特定的波长，吸收的程度正比于

2、试样中该成分的浓度，因此测量光谱可以进行定性分析，而且根据吸收与已知浓度的标样的比较，还能进行定量分析。 （三）仪器的基本组成部件紫外-可见分光光度计的基本结构：是由五个部分组成：即光源、单色器、吸收池、检测器和信号指示系统。u 测定过程：由光源发出的光，经单色器获得一定波长单色光照射到样品溶液，被吸收后，经检测器将光强度变化转变为电信号变化，并经信号指示系统调制放大后，显示或打印出吸光度A（或透射比T），完成测定。样品槽电源插座打印机接口RS232接口电源开关TU-1810SPC紫外可见分光光度计（四）操作步骤TU-1810SPC紫外可见分光光度计操作规程一、开机：开打印机电源开光度计电源开

3、计算机电源。二、点击UVWin图标进行仪器自检。（一）光谱扫描：1.点击光谱扫描窗口选择测量菜单下参数设置：（1）参数设置：在M测量下光谱扫描光度方式处选Abs在显示范围的最大处填1.000，最小处填0.000在扫描参数的起点、终点输入相应波长（小、大），在速度处选快，间隔处选0.1nm在扫描方式的自动扫描处打在自动切换样品池处打在扫描完成自动适应窗口处打在显示全部光谱处打点击确定。（2）附件设置：在样品池中放入标准样品样品池选八联池将置于位置第一位置，在类型（序号1）处选空白将置于位置的第二位置，在类型（序号2）处选样品，依次类推将置于位置的不使用的位置上，点击类型选未使用将置于第一位置点击

4、复位点击确定。2.光谱扫描：点击基线放入空白样品池点击确定点击开始放入空白样品池点击确定。3.查看光谱信息：选择图形菜单下的光谱信息或点击 按纽点击任意一条光谱线，在右侧的详细信息窗口中会显示其详细信息。4. 保存测量文件：（1）点击文件点击另存为保存在B8Z盘上文件名标准曲线保存文件类型光度测量数据。（2）点击注释在分析员处输入实验人员名字在样品名处输入所做标准曲线名称在注释处输入要注释的内容点击确定点击保存。（二）、光度测量：1.点击定量光度窗口选择测量菜单下参数设置：（1）参数设置：在M测量下的波长处输入波长值点击添加在重复测量下选自动在根据样品池数量自动重复测量处打在光度模式处选Abs

5、在起始标号选1点击确定。（2）附件设置：在样品池中放入标准样品样品池选八联池将置于位置第一位置，在类型（序号1）处选空白将置于位置的第二位置，在类型（序号2）处选样品，依次类推将置于位置的不使用的位置上，点击类型选未使用将置于第一位置点击复位点击确定。2.光度测量：点击自动校零放入空白样品池点击确定点击开始放入空白样品池点击确定。3. 保存测量文件：同上。（三）定量测定：1.点击 定量测定窗口选择 测量菜单下 参数设置： （1）参数设置：点击 单波长法在 主波长处输入测定波长在样品编号在标准样品和未知样品标号处输入1长在其他设置下自动切换样品池处打点击确定。（2）校正曲线选项：在曲线方程选Ab

6、s=f(c) 在方程次数选一次浓度单位选mg/L零点插入打曲线评估选R2校正方法选浓度数法点击确定。2.标准曲线测定：（1）在样品池中放入标准样品。（2）附件设置：在样品池选八联池将置于位置第一位置，在类型（序号1）处选空白将置于位置的第二位置，在类型（序号2）处选样品，依次类推将置于位置的不使用的位置上，点击类型选未使用将置于第一位置点击复位点击确定。（3）在定量测定窗口的标准样品表格处点击编号输入1在浓度输入浓度点击编号输入2在浓度输入浓度。依次类推点击校零在插入空白样处点击确定）点击开始在插入标准样处点击确定。3.未知样测定：（1）在样品池中放入标准样品。（2）附件设置：在样品池中放入未

7、知样品样品池选八联池将置于位置第一位置，在类型（序号1）处选空白将置于位置的第二位置，在类型（序号2）处选未知样，依次类推将置于位置的不使用的位置上，点击类型选未使用将置于第一位置点击复位点击确定。3.保存测量文件：同上。（四）时间扫描：1.点击 时间扫描窗口选择测量菜单下参数设置：（1）在M测量采单下时间扫描光度模式处选Abs在测量波长点处输入扫描波长在时间选项的时间单位处选秒在自动模式打在扫描时间处填扫描时间。（2）点击扫描方式在自动扫描处打工作模式选单样品池顺序扫描。（3）在显示范围的最大处填1.000最小处填0.000点击确定。2.附件选项：样品池选八联池。 将置于位置第一位置，在类型（序号1）处选空白。将置于位置第二位置，在类型（序号2）处选标样。依次类推。最后将置于第一位置，点击复位点击确定。3.测定：放入空白和样品点击测量采单下的校零点击确定点击开始点击确定。（五）紫外可见分光光度计使用注意事项1. 使用前请详细阅读“分光教程”。2. 确认样品池内无比色