ch细胞工程的基本技术

1、1会计学ch细胞工程的基本技术细胞工程的基本技术1.铬酸洗液（重铬酸钾硫酸洗液，或简称洗液成成 分分强酸溶液强酸溶液中酸溶液中酸溶液 弱酸溶液弱酸溶液重铬酸钾重铬酸钾/g63120100浓硫酸浓硫酸/ml1000200100蒸馏水蒸馏水/ml2002001000注意事项注意事项在蒸馏水中缓慢加入浓硫酸，在蒸馏水中缓慢加入浓硫酸，加热的同时分次加入磨碎的加热的同时分次加入磨碎的重铬酸钾至其完全溶解重铬酸钾至其完全溶解重铬酸钾加蒸馏水后加热溶重铬酸钾加蒸馏水后加热溶解，冷却后再缓慢加入浓硫解，冷却后再缓慢加入浓硫酸酸2. 浓盐酸：可洗去水垢或某些无机盐沉淀浓盐酸：可洗去水垢或某些无机盐沉淀3. 5

2、草酸溶液：用数滴硫酸酸化，可洗去高草酸溶液：用数滴硫酸酸化，可洗去高锰酸钾的痕迹锰酸钾的痕迹4. 510乙二胺四乙酸二钠乙二胺四乙酸二钠（EDTA-Na2）溶液：加热煮沸可洗脱玻璃仪器内壁的白溶液：加热煮沸可洗脱玻璃仪器内壁的白色沉淀色沉淀5. 尿素洗涤液：为蛋白质的良好溶剂，适用尿素洗涤液：为蛋白质的良好溶剂，适用于盛蛋白质制剂及血样的容器于盛蛋白质制剂及血样的容器6. 有机溶剂：丙酮、乙醇、乙醚等可用于洗有机溶剂：丙酮、乙醇、乙醚等可用于洗脱油脂、脂溶性染料等的污迹脱油脂、脂溶性染料等的污迹二、玻璃器皿的洗涤二、玻璃器皿的洗涤n初次使用初次使用附有游离的碱性物质附有游离的碱性物质清洗方法：

3、清洗方法：1%盐酸浸泡一昼夜，再用盐酸浸泡一昼夜，再用合成洗涤剂洗刷，然后用清水反复冲合成洗涤剂洗刷，然后用清水反复冲洗，最后用蒸馏水冲洗洗，最后用蒸馏水冲洗12次，干燥次，干燥后即可使用后即可使用n已使用过的已使用过的试管、烧杯、三角瓶：现将器皿中的残渣试管、烧杯、三角瓶：现将器皿中的残渣除去，用合成洗涤剂洗刷，用清水冲洗干除去，用合成洗涤剂洗刷，用清水冲洗干净，最后用蒸馏水冲洗净，最后用蒸馏水冲洗12次次吸管、滴管、移液管：先放入铬酸洗涤液吸管、滴管、移液管：先放入铬酸洗涤液中浸泡中浸泡2 h以上，取出后经流水冲洗以上，取出后经流水冲洗0.5 h左左右，再用蒸馏水冲洗右，再用蒸馏水冲洗12

4、次，晾干备用次，晾干备用载玻片、盖玻片：先用清水冲洗，然后放载玻片、盖玻片：先用清水冲洗，然后放入铬酸洗涤液中浸泡几个小时或用稀铬酸入铬酸洗涤液中浸泡几个小时或用稀铬酸洗涤液煮沸洗涤液煮沸0.5 h，取出后清水冲洗干净，取出后清水冲洗干净，储藏于储藏于95的酒精中备用的酒精中备用 危险！危险！三、塑料用品的洗涤三、塑料用品的洗涤n用合成洗涤剂洗涤，并反复冲洗多次，最用合成洗涤剂洗涤，并反复冲洗多次，最后用蒸馏水冲洗后用蒸馏水冲洗n或：或：2% NaOH浸泡过夜，自来水冲洗，浸泡过夜，自来水冲洗，25% HCl浸泡浸泡30 min，再用自来水和蒸，再用自来水和蒸馏水依次冲洗馏水依次冲洗三、橡胶制

5、品的洗涤三、橡胶制品的洗涤n新购置胶塞、胶管等：先用新购置胶塞、胶管等：先用0.5 mol/L NaOH煮沸煮沸15 min，然后流水冲洗，再用，然后流水冲洗，再用0.5 mol/L HCl煮沸煮沸15 min，流水冲洗，自，流水冲洗，自来水煮沸两次，最后用蒸馏水煮沸来水煮沸两次，最后用蒸馏水煮沸20 min，50 烘干备用烘干备用（除去胶塞上的滑石粉等有毒物（除去胶塞上的滑石粉等有毒物质）质）n用过的胶塞可按玻璃器材的方法清洗用过的胶塞可按玻璃器材的方法清洗四、金属器械的洗涤四、金属器械的洗涤n新的金属器械常涂有防锈油，可先用沾有新的金属器械常涂有防锈油，可先用沾有汽油的纱布擦去，再用自来水

6、和蒸馏水洗汽油的纱布擦去，再用自来水和蒸馏水洗净，最后用酒精棉棉球擦拭晾干净，最后用酒精棉棉球擦拭晾干n使用过的：用自来水和蒸馏水洗净，再用使用过的：用自来水和蒸馏水洗净，再用酒精棉球擦拭晾干酒精棉球擦拭晾干根据对微生物的杀灭程度，杀菌可分为根据对微生物的杀灭程度，杀菌可分为3 3个等级：灭个等级：灭菌、消毒和防腐菌、消毒和防腐灭菌：灭菌：彻底杀菌，杀灭一切微生物的营养体及芽孢和孢子彻底杀菌，杀灭一切微生物的营养体及芽孢和孢子消毒：消毒：非彻底杀菌，消灭病原菌和有害微生物的营养体，但不能杀死全部芽孢或非彻底杀菌，消灭病原菌和有害微生物的营养体，但不能杀死全部芽孢或孢子孢子防腐：防腐：抑菌过程，

7、防止或抑制微生物的生长繁殖抑菌过程，防止或抑制微生物的生长繁殖消毒、灭菌与防腐的区别消毒、灭菌与防腐的区别一、热力灭菌一、热力灭菌n热力灭菌：利用高温杀死微生物的方法热力灭菌：利用高温杀死微生物的方法n原理：当高温作用于微生物细胞时，首先引原理：当高温作用于微生物细胞时，首先引起微生物细胞内原生质的变性、酶结构的破起微生物细胞内原生质的变性、酶结构的破坏，从而使细胞失去了生活机能上的协调，坏，从而使细胞失去了生活机能上的协调，停止生长发育；随着高温的继续作用，细胞停止生长发育；随着高温的继续作用，细胞内原生质便发生凝固、新陈代谢活动停止，内原生质便发生凝固、新陈代谢活动停止，细胞死亡细胞死亡湿

8、热灭菌湿热灭菌n利用蒸汽或沸水灭菌称为湿热灭菌利用蒸汽或沸水灭菌称为湿热灭菌n湿热穿透力强，蛋白质、原生质胶体在湿湿热穿透力强，蛋白质、原生质胶体在湿热情况下易变性凝固热情况下易变性凝固n常用湿热灭菌方法：常用湿热灭菌方法：高压蒸汽灭菌法高压蒸汽灭菌法常压蒸汽灭菌法常压蒸汽灭菌法间歇灭菌法间歇灭菌法煮沸消毒法煮沸消毒法巴氏消毒法巴氏消毒法高压蒸汽灭菌法高压蒸汽灭菌法n灭菌效果好、试用面广，是实验室最常用灭菌效果好、试用面广，是实验室最常用的灭菌方法的灭菌方法n使用仪器：高压蒸汽灭菌锅使用仪器：高压蒸汽灭菌锅n注意事项注意事项灭菌锅内冷空气必须排尽（缓慢排气法和集中排灭菌锅内冷空气必须排尽（缓慢

9、排气法和集中排气法）气法）灭菌锅内的物品必须排列疏松，使蒸汽畅通灭菌锅内的物品必须排列疏松，使蒸汽畅通灭菌完毕应缓慢降压灭菌完毕应缓慢降压注意棉塞防湿注意棉塞防湿灭菌时间依容器的体积及培养基的多少而定灭菌时间依容器的体积及培养基的多少而定根据对微生物的杀灭程度，杀菌可分为根据对微生物的杀灭程度，杀菌可分为3 3个等级：灭个等级：灭菌、消毒和防腐菌、消毒和防腐灭菌：灭菌：彻底杀菌，杀灭一切微生物的营养体及芽孢和孢子彻底杀菌，杀灭一切微生物的营养体及芽孢和孢子消毒：消毒：非彻底杀菌，消灭病原菌和有害微生物的营养体，但不能杀死全部芽孢或非彻底杀菌，消灭病原菌和有害微生物的营养体，但不能杀死全部芽孢或孢子孢子防腐：防腐：抑菌过程，防止或抑制微生物的生长繁殖抑菌过程，防止或抑制微生物的生长繁殖消毒、灭菌与防腐的区别消毒、灭菌与防腐的区别高压蒸汽灭菌法高压蒸汽灭菌法n灭菌效果好、试用面广，是实验室最常用灭菌效果好、试用面广，是实验室最常用的灭菌方法的灭菌方法n使用仪器：高压蒸汽灭菌锅使用仪器：高压蒸汽灭菌锅n注意事项注意事项灭菌锅内