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文档简介
1、专题2 微生物的培育与运用课题2 土壤中分解尿素的细菌的分别与计数一 研讨思绪二统计菌落数目2.稀释涂布平板计数法: 运用: 统计样品中活菌的数目原理:当样品的稀释度足够高时,培育基外表生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌,经过统计平板上的菌落数,就能推测出样品中大约含有多少活菌。一 研讨思绪二统计菌落数目2.稀释涂布平板计数法: 运用: 统计样品中活菌的数目原理:当样品的稀释度足够高时,培育基外表生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌,经过统计平板上的菌落数,就能推测出样品中大约含有多少活菌。留意:普通选择菌落数在30-300的平板进展记数。一 研讨思绪二统计菌落数目2.稀释涂
2、布平板计数法: 第一位同窗只涂布了一个平板,没有设置反复第一位同窗只涂布了一个平板,没有设置反复组,因此结果不具有压服力。组,因此结果不具有压服力。一 研讨思绪二统计菌落数目2.稀释涂布平板计数法: 第一位同窗只涂布了一个平板,没有设置反复第一位同窗只涂布了一个平板,没有设置反复组,因此结果不具有压服力。组,因此结果不具有压服力。第二位同窗思索到设置反复组的问题,涂布了3个平板,但是,其中1个平板的计数结果与另2个相差太远,阐明在操作过程中能够出现了错误,因此,不能简单地将3个平板的计数值用来求平均值。一 研讨思绪三设置对照一 研讨思绪三设置对照主要目的是排除实验组中非测试要素对实验主要目的是
3、排除实验组中非测试要素对实验结果的影响,提高实验结果的可信度。结果的影响,提高实验结果的可信度。一 研讨思绪三设置对照判别培育基中能否有杂菌污染:判别培育基中能否有杂菌污染:主要目的是排除实验组中非测试要素对实验主要目的是排除实验组中非测试要素对实验结果的影响,提高实验结果的可信度。结果的影响,提高实验结果的可信度。一 研讨思绪三设置对照判别培育基中能否有杂菌污染:判别培育基中能否有杂菌污染:将未接种的培育基同时进展培育。将未接种的培育基同时进展培育。主要目的是排除实验组中非测试要素对实验主要目的是排除实验组中非测试要素对实验结果的影响,提高实验结果的可信度。结果的影响,提高实验结果的可信度。
4、一 研讨思绪三设置对照判别培育基中能否有杂菌污染:判别培育基中能否有杂菌污染:将未接种的培育基同时进展培育。将未接种的培育基同时进展培育。判别选择培育基能否具有挑选作用:判别选择培育基能否具有挑选作用:主要目的是排除实验组中非测试要素对实验主要目的是排除实验组中非测试要素对实验结果的影响,提高实验结果的可信度。结果的影响,提高实验结果的可信度。一 研讨思绪三设置对照判别培育基中能否有杂菌污染:判别培育基中能否有杂菌污染:将未接种的培育基同时进展培育。将未接种的培育基同时进展培育。判别选择培育基能否具有挑选作用:判别选择培育基能否具有挑选作用:完全培育基营养成分齐全接种后培育完全培育基营养成分齐
5、全接种后培育察看菌落数目。察看菌落数目。主要目的是排除实验组中非测试要素对实验主要目的是排除实验组中非测试要素对实验结果的影响,提高实验结果的可信度。结果的影响,提高实验结果的可信度。二 实验设计二 实验设计1. 实验设计的内容包括:实验设计的内容包括:二 实验设计1. 实验设计的内容包括:实验设计的内容包括:实验方案、资料器具、实施步骤和时间安排等。实验方案、资料器具、实施步骤和时间安排等。二 实验设计1. 实验设计的内容包括:实验设计的内容包括:2. 实验流程:实验流程:实验方案、资料器具、实施步骤和时间安排等。实验方案、资料器具、实施步骤和时间安排等。二 实验设计1. 实验设计的内容包括
6、:实验设计的内容包括:2. 实验流程:实验流程:实验方案、资料器具、实施步骤和时间安排等。实验方案、资料器具、实施步骤和时间安排等。1土壤取样土壤取样二 实验设计1. 实验设计的内容包括:实验设计的内容包括:2. 实验流程:实验流程:1土壤取样土壤取样从肥沃、潮湿的土壤中取样。先铲去表层土从肥沃、潮湿的土壤中取样。先铲去表层土3 cm左右,再取样,将样品装入事先预备左右,再取样,将样品装入事先预备好的信封中。好的信封中。实验方案、资料器具、实施步骤和时间安排等。实验方案、资料器具、实施步骤和时间安排等。二 实验设计2样品的稀释样品的稀释二 实验设计2样品的稀释样品的稀释将待测样品经过一系列的稀
7、释,然后选择三个将待测样品经过一系列的稀释,然后选择三个稀释度的菌液均匀涂布在平板上,然后培育。稀释度的菌液均匀涂布在平板上,然后培育。 由于不同微生物在土壤中含量不同,其目由于不同微生物在土壤中含量不同,其目的是保证获得菌落数在的是保证获得菌落数在30300之间。之间。 不同。不同。为了结果接近真实值,可将同一稀释度菌液涂为了结果接近真实值,可将同一稀释度菌液涂布到布到3个或个或3个以上的平板上,经培育,计算出个以上的平板上,经培育,计算出菌落的平均数。菌落的平均数。计算公式:计算公式:每克样品中的菌株数每克样品中的菌株数 =CVM计算公式:计算公式:每克样品中的菌株数每克样品中的菌株数 =
8、CVM某同窗在稀释倍数为106 的培育基中测得平板上菌落数的平均数为234,那么每克样品中的菌落数是涂布平板时所用稀释液的体积为0.1ml ( )A. 2.34108B. 2.34109C. 234D. 23.4 某同窗在稀释倍数为106 的培育基中测得平板上菌落数的平均数为234,那么每克样品中的菌落数是涂布平板时所用稀释液的体积为0.1ml ( )A. 2.34108B. 2.34109C. 234D. 23.4 B B计算公式:计算公式:每克样品中的菌株数每克样品中的菌株数 =CVM二 实验设计2. 实验流程:实验流程:3微生物的培育与察看二 实验设计2. 实验流程:实验流程:3微生物的
9、培育与察看培育皿编号:104、105、106各编号三个培育皿。二 实验设计2. 实验流程:实验流程:3微生物的培育与察看培育皿编号:104、105、106各编号三个培育皿。每个培育皿参与牛肉膏蛋白胨琼脂培育基15ml。二 实验设计2. 实验流程:实验流程:3微生物的培育与察看培育皿编号:104、105、106各编号三个培育皿。每个培育皿参与牛肉膏蛋白胨琼脂培育基15ml。用移液管按照编号分别参与不同浓度土壤稀释液各0. 1ml,转动培育皿,使土壤稀释液与培育基混合均匀。二 实验设计2. 实验流程:实验流程:3微生物的培育与察看培育皿编号:104、105、106各编号三个培育皿。每个培育皿参与牛
10、肉膏蛋白胨琼脂培育基15ml。用移液管按照编号分别参与不同浓度土壤稀释液各0. 1ml,转动培育皿,使土壤稀释液与培育基混合均匀。冷却倒置放入3037摄氏度的恒温培育箱中培育。察看纪录。三 操作提示三 操作提示1. 无菌操作无菌操作2. 做好标志做好标志3. 规划时间规划时间四 操作提示三 操作提示1. 无菌操作无菌操作2. 做好标志做好标志3. 规划时间规划时间四 结果分析与评价五 课题延伸五 课题延伸 怎样对分别的菌种作进一步的鉴定怎样对分别的菌种作进一步的鉴定?2. 怎样判别细菌分解尿素的化学反响能否发生?怎样判别细菌分解尿素的化学反响能否发生?3. 怎样鉴定某细菌可以分解尿素?怎样鉴定
11、某细菌可以分解尿素?五 课题延伸 怎样对分别的菌种作进一步的鉴定怎样对分别的菌种作进一步的鉴定?2. 怎样判别细菌分解尿素的化学反响能否发生?怎样判别细菌分解尿素的化学反响能否发生?3. 怎样鉴定某细菌可以分解尿素?怎样鉴定某细菌可以分解尿素?借助生物化学的方法借助生物化学的方法五 课题延伸 怎样对分别的菌种作进一步的鉴定怎样对分别的菌种作进一步的鉴定?借助生物化学的方法借助生物化学的方法CONH22 + H2OCO2+2NH3脲酶2. 怎样判别细菌分解尿素的化学反响能否发生?怎样判别细菌分解尿素的化学反响能否发生?五 课题延伸 怎样对分别的菌种作进一步的鉴定怎样对分别的菌种作进一步的鉴定?借
12、助生物化学的方法借助生物化学的方法CONH22 + H2OCO2+2NH3脲酶经过检测培育基经过检测培育基pH变化来判别变化来判别2. 怎样判别细菌分解尿素的化学反响能否发生?怎样判别细菌分解尿素的化学反响能否发生?五 课题延伸 怎样对分别的菌种作进一步的鉴定怎样对分别的菌种作进一步的鉴定?2. 怎样判别细菌分解尿素的化学反响能否发生?怎样判别细菌分解尿素的化学反响能否发生?3. 怎样鉴定某细菌可以分解尿素?怎样鉴定某细菌可以分解尿素?借助生物化学的方法借助生物化学的方法经过检测培育基经过检测培育基pH变化来判别变化来判别五 课题延伸 怎样对分别的菌种作进一步的鉴定怎样对分别的菌种作进一步的鉴
13、定?2. 怎样判别细菌分解尿素的化学反响能否发生?怎样判别细菌分解尿素的化学反响能否发生?3. 怎样鉴定某细菌可以分解尿素?怎样鉴定某细菌可以分解尿素?借助生物化学的方法借助生物化学的方法经过检测培育基经过检测培育基pH变化来判别变化来判别 在以尿素为独一氮源的培育基中参与酚红在以尿素为独一氮源的培育基中参与酚红指示剂。培育某种细菌后,假设指示剂。培育某种细菌后,假设pH升高,指升高,指示剂将变红示剂将变红 ,阐明该细菌可以分解尿素。,阐明该细菌可以分解尿素。请根据以上配方,回答以下问题:请根据以上配方,回答以下问题:(1)(1)该培育基含有微生物所需求的该培育基含有微生物所需求的_类营养类营
14、养物质。其中最主要的碳源是物质。其中最主要的碳源是_,氮源是,氮源是_。(2)(2)该培育基按物理性质划分是该培育基按物理性质划分是_培育基;培育基;按培育基的作用划分是按培育基的作用划分是_培育基。培育基。例:下面是分别分解尿素的细菌所用的培育基配方例:下面是分别分解尿素的细菌所用的培育基配方请根据以上配方,回答以下问题:请根据以上配方,回答以下问题:(1)(1)该培育基含有微生物所需求的该培育基含有微生物所需求的_类营养类营养物质。其中最主要的碳源是物质。其中最主要的碳源是_,氮源是,氮源是_。(2)(2)该培育基按物理性质划分是该培育基按物理性质划分是_培育基;培育基;按培育基的作用划分
15、是按培育基的作用划分是_培育基。培育基。4 4例:下面是分别分解尿素的细菌所用的培育基配方例:下面是分别分解尿素的细菌所用的培育基配方请根据以上配方,回答以下问题:请根据以上配方,回答以下问题:(1)(1)该培育基含有微生物所需求的该培育基含有微生物所需求的_类营养类营养物质。其中最主要的碳源是物质。其中最主要的碳源是_,氮源是,氮源是_。(2)(2)该培育基按物理性质划分是该培育基按物理性质划分是_培育基;培育基;按培育基的作用划分是按培育基的作用划分是_培育基。培育基。4 4葡萄糖葡萄糖例:下面是分别分解尿素的细菌所用的培育基配方例:下面是分别分解尿素的细菌所用的培育基配方请根据以上配方,
16、回答以下问题:请根据以上配方,回答以下问题:(1)(1)该培育基含有微生物所需求的该培育基含有微生物所需求的_类营养类营养物质。其中最主要的碳源是物质。其中最主要的碳源是_,氮源是,氮源是_。(2)(2)该培育基按物理性质划分是该培育基按物理性质划分是_培育基;培育基;按培育基的作用划分是按培育基的作用划分是_培育基。培育基。4 4葡萄糖葡萄糖尿素尿素例:下面是分别分解尿素的细菌所用的培育基配方例:下面是分别分解尿素的细菌所用的培育基配方请根据以上配方,回答以下问题:请根据以上配方,回答以下问题:(1)(1)该培育基含有微生物所需求的该培育基含有微生物所需求的_类营养类营养物质。其中最主要的碳
17、源是物质。其中最主要的碳源是_,氮源是,氮源是_。(2)(2)该培育基按物理性质划分是该培育基按物理性质划分是_培育基;培育基;按培育基的作用划分是按培育基的作用划分是_培育基。培育基。4 4葡萄糖葡萄糖尿素尿素固体固体例:下面是分别分解尿素的细菌所用的培育基配方例:下面是分别分解尿素的细菌所用的培育基配方请根据以上配方,回答以下问题:请根据以上配方,回答以下问题:(1)(1)该培育基含有微生物所需求的该培育基含有微生物所需求的_类营养类营养物质。其中最主要的碳源是物质。其中最主要的碳源是_,氮源是,氮源是_。(2)(2)该培育基按物理性质划分是该培育基按物理性质划分是_培育基;培育基;按培育
18、基的作用划分是按培育基的作用划分是_培育基。培育基。4 4葡萄糖葡萄糖尿素尿素固体固体选择选择例:下面是分别分解尿素的细菌所用的培育基配方例:下面是分别分解尿素的细菌所用的培育基配方(3)(3)该培育基具有选择作用的缘由是该培育基具有选择作用的缘由是 。例:下面是分别分解尿素的细菌所用的培育基配方例:下面是分别分解尿素的细菌所用的培育基配方(3)(3)该培育基具有选择作用的缘由是该培育基具有选择作用的缘由是 。该培育基中,独一的氮源是尿素,只需能分解该培育基中,独一的氮源是尿素,只需能分解尿素的微生物才干在该培育基上生长和繁衍尿素的微生物才干在该培育基上生长和繁衍例:下面是分别分解尿素的细菌所用的培育基配方例:下面是分别分解尿素的细菌所用的培育基配方(4)(4)该培育基中,可经过检测该培育基中,可经过检测pHpH的变化来判别的变化来判别尿素能否被分解,根据的原理是尿素能否被分解,根据的原理是 。例:下面是分别分解尿素的细菌所用的培育基配方例:下面是分别分解尿素的细菌所用的培育基配方(4)(4)该培育基中,可经过检测该培育基中,可经过检测pHp
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