血清(浆)脂类及脂蛋白测定说课材料

1、血清(浆)脂类及脂蛋白测定血脂的运输形式脂蛋白脂蛋白1 1、定义：、定义： 指指血浆脂质与载脂蛋白组成的可溶性的生物大分子。磷脂胆固醇载脂蛋白甘油三酯胆固醇酯2 2、结构：、结构：脂蛋白微粒表面核心3 3、分类、分类 (1)按密度不同HDLLDLIDLVLDLCM(2)按电泳时区带的泳动位置不同 CMHDLVLDLLDLCM-LP前前-LP -LP -LP前前-LP-LPCM临床血脂测定的常见项目：实验实验51： 磷钨酸磷钨酸-镁沉淀法测定高密度脂镁沉淀法测定高密度脂蛋白胆固醇（蛋白胆固醇（HDL-C）提取HDL 测定胆固醇 实验原理： 超速离心法 层析法 电泳法沉淀法提取HDL的方法：沉淀法

2、原理： ApoB + 多阴离子化合物 沉淀硫酸葡聚糖-Mg2+肝素-Mn2+磷钨酸-Mg2+多阴离子（polyanion）化合物 过氧化物酶胆固醇 + O2 胆甾烯酮 + H2O2H2O2 + 酚 + 4-氨基安替比林 亚胺醌亚胺醌 + H2O胆固醇测定（酶法）：试剂：沉淀剂酶试剂参考血清（TC测定用的定值血清）操作步骤： 取血清和沉淀剂各200l，充分混匀，置室温放置10min后，2500r/min，15min，吸取上清液按表进行操作。 1、提取HDL加入物(l)空白管标准管测定管上清液50参考血清50蒸馏水50酶试剂200020002000混匀，37水浴15min；空白管调零，0.5cm比

3、色杯，500nm比色。 2、测定胆固醇计算：参考值：HDL-C (mmol/L)测定管吸光度标准管吸光度 =定值血清胆固醇浓度5.170.92.0mmol/L2注意事项：1、血清标本要及时测定（在室温条件下，各型脂蛋白之间会发生脂质交换）；（游离的胆固醇会不断酯化）。2、离心过程中防止温度过高（室温1525），离心后放置时间不能过长。（温度过高使沉淀不完全）。临床意义： 具有抗动脉粥样硬化作用，是冠心病的保护因素。磷酸甘油氧化法测定血清甘磷酸甘油氧化法测定血清甘油三酯（油三酯（TG）实验实验49： 甘油三酯(TG)的结构： 甘油三酯测定的方法： 化学法酶法 化学法（KOH） （过碘酸）皂化氧化

4、抽提 甘油 甲醛 显色甘油三酯甘油甲醛变色酸紫红色紫红色甘油三酯3-磷酸甘油 + ADP+ ATPO2 、H2O + 磷酸二羟丙酮 + H2O2甘油 + 脂肪酸+酚、4-氨基安替比亚胺醌亚胺醌 + H2OLPLGKGPOPOD酶法（磷酸甘油氧化酶法）试剂：酶试剂 2.26mmol/L的三油酸甘油酯标准液 操作：加入物(l) 空白管标准管(2)测定管(2)上清液20参考血清20酶试剂20002000200037水浴10min；空白管调零，0.5cm比色杯，500nm比色。 计算：TG (mmol/L)测定管吸光度标准管吸光度 =标准液浓度参考值：0.561.70mmol/L2.26mmol/L临床意义：增高: 与动脉粥样硬化关系密切、家族性的脂代谢紊乱、糖尿病等。降低: 营养不良、消化吸收综合征、消耗性疾病等。注意事项：标本： 标本要求是餐后12-14h的空腹血液（血清TG易受饮食影响）。 标本存放不宜超过3天（避免TG水解而释放出甘油）。试剂： 酶试剂应4避光保存，出现红色不可再用 。 免疫透射比浊法测定血清载脂蛋白A1和载脂蛋白B 实验实验53： 抗原抗原抗体复合物抗体+ApoA1 ApoB ApoA1抗体ApoB抗体比色原理：ApoA1 与高脂血症、冠心病呈负相关；ApoB 与高脂血症、冠心病呈正相关。临