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文档简介
1、各类鼻咽癌细胞株特性及来源CNE1 为鼻咽高分化鳞状细胞癌细胞系 ;CNE2、 HNE1 、HNE2 、HNE3、HONE1 为鼻 咽低分化鳞状细胞癌细胞系;5 一 8F为鼻咽低分化鳞状细胞癌,细胞系SUNE 1亚株,具有 高转移、高成瘤能力;6- 10B为鼻咽低分化鳞状细胞癌细胞系 SUNE-1亚株,具有高成瘤潜能, 不转移特性。C666-1为长期携带EB病毒基因的低分化鼻咽癌细胞株;HK-1为携带EB病毒 基因的高分化鼻咽癌细胞株 .NP69 为永生化鼻咽上皮细胞系,于 1XKsFM(keratinoeyte serum-free medium, KSFM)培养基 中,37C、5%CO2、
2、饱和湿度条件下培养,呈现鳞状上皮样、贴壁生长,具有正常鼻咽上皮的特 性。CNE11癌组织来源病人王某某, 女, 58 岁, , 籍贯吉林省 ,中国医学科学院日坛医院住院号: 2382248.1975 年8月1 3日患者因头痛 耳鸣、 鼻衄等症状来院就诊。临床检查鼻咽部有菜花样肿物 , 肿瘤 已侵犯颅底和颅神经(川,IV,区刘),双颈淋巴结转移,诊断为鼻咽癌。X光诊断为鼻咽 后壁软组织肿物符合鼻咽癌 , 颅底象见左侧翼状突外板可疑骨质破坏 ,鼻咽部肿物作活检 , 病理诊断为高分化鳞癌。培养过程在第12代时(培养后的 6个月),在上皮样细胞培养中发现有少量梭形细胞。在有的培养瓶中 , 梭形细胞逐渐
3、增加。 在接种少量细胞的培养瓶中 ,有的全为上皮样细胞 , 有的全为梭形 细胞。选择全为上皮样的细胞传代,称CNE细胞株;全为梭形的细胞传代,称CNF细胞株CNE细胞株容易形成空泡,不传代的老细胞,在显微镜下可见到有些细胞的胞浆突出,然后 脱落成死细胞,还有多核巨细胞。在这二株细胞,特别是CNF细胞的单层或多层细胞上有很 多圆形细胞 , 核大,浆少。在培养液中也有大量圆的脱落细胞。将培养液中的悬浮细胞接种 于培养瓶,细胞仍能贴瓶,生长出原来的上皮样细胞或梭形细胞。将CNE , CNF细胞和这二株 细胞的脱落细胞培养成单层后 , 不传代, 每周换液二次 , 继续培养7 个月,未能得到类淋巴 母细
4、胞株,在培养过程中未见到肿瘤组织培养中常见到的成纤维细胞生长。特性CNE-2谷淑燕,赵文平,曾毅,唐慰平赵明伦邓惠华,李昆.从低分化鼻咽癌病人建立鼻咽癌上皮细胞株J.癌症,1983,02:70-72+129-130.组织来源和培养方法组织取自鼻咽癌(W期)患者,林XX,63岁,男性,广东籍,活检组织病理检查为慢性鼻 咽炎,但同时负压吸引的鼻咽脱落细胞为低分化鳞状细胞癌 (图1).病人血清的E B病毒抗体和鼻咽脱落细胞的EBNA检测,病人血清的各种抗EB病毒抗 体的滴度分别为:VCA/IgG 1: 320 , EA IgG 1: 160, VCA/lgA 1: 40, EA/lgA<1 :
5、 5 ,抗EBNA 抗 体为1:160=鼻咽脱落细胞中发现成团的癌细胞呈 EBNA阳性细胞株的EB病毒抗原用抗补体免疫荧光试验检查CNE- 2细胞中各种EB病毒抗原。体外培养第3代细胞可见EB NA阳性,胞核呈颗粒状明亮的荧光,细胞传至第11代后进行多次检查,EBNA均呈阴性。经ludR或巴豆油、丁酸激活的细胞,检查EA、VCA也呈阴性。将细胞与类淋巴母细胞株HK-1 共同培养,观察EB病毒对上皮细胞的再感染,6天后上皮细胞的EBNA仍呈阴性。HNE1、HNE2,HNE3和 HONE1 人体鼻咽癌上皮样细胞株和梭形细胞株的建立 J.中国科学,1978,01:113-118+121-124. 2 祝和成,姚开泰,李桂源等,4株鼻咽癌上皮细胞株建立及其生物学特性.湖南医科大学学报.1992,06,17(2),103-107.组织细胞培养及建株肿瘤组织取自4倒男性鼻咽癌初诊患者,分别命名为HNE1、HNE2,HNE3和HONE1,其中HNE1和H0NE1为EBV阳性,HNE2和HNE3为EBV阴性。病理诊断均为低分化鳞癌。EBV抗原及EBV基因组分析EBNA检测结果发现.HNE i和HONE 1细胞30代以前均为EBNA阳性,HNE2和HNE 3则为阴性。晚代HNE1和HONE1细胞的EBNA也逐渐转为阴性,而从HONE1第5代细胞中克隆
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