遗传毒性试验PPT学习教案

1、会计学1第1页/共39页第2页/共39页体外遗传毒性哺乳动物细胞畸变哺乳动物细胞基因突变哺乳动物细胞染色体畸变细菌基因突变Ames试验第3页/共39页Ames试验和小鼠精子细胞染色体畸变试验体外与体内原核与真核常染色体与性染色体第4页/共39页第5页/共39页自发回复菌落空白对照无组氨酸突变菌落阳性无组氨酸 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

2、 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

3、 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

4、 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

5、 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

6、 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 第6页/共39页第7页/共39页第8页/共39页第9页/共39页第10页/共39页菌株购买，投入使用前准备冻存菌株时对诱变剂丧失敏感时自发图变数不在正常范围时第11页/共39页组氨酸缺陷型鉴定脂多糖屏障缺失鉴定R因子鉴定四环素鉴定紫外线照射修复鉴定自发回复突变鉴定第12页/共39页 TA97 TA98 TA100 TA102

7、TA97 TA98 TA100 TA102无组氨酸有组氨酸第13页/共39页 TA97 TA98 TA100 TA102结晶紫染色沾有结晶紫的滤纸片沾有结晶紫的滤纸片第14页/共39页 TA97 TA98 TA100 TA102青霉素沾有青霉素滤纸片沾有青霉素滤纸片第15页/共39页 TA98 TA102 四环素沾有四环素滤纸片沾有四环素滤纸片第16页/共39页 TA97 TA98 TA100 TA102紫外线照射紫外线照射8s33cm第17页/共39页底层培养基顶层培养基+菌液每个菌株做两个平行皿第18页/共39页菌株菌株自发回复图变数自发回复图变数TA9790180TA983050TA10

8、0100200YA102240320第19页/共39页配试剂高压烘干倒平板接种菌株，摇菌试验前准备第20页/共39页0.2g/ml0.1g/ml0.05g/ml0.025g/ml0.0125g/ml第21页/共39页阴性阴性阴性阴性阳性阳性阳性阳性样品样品样品样品TA97TA98TA100TA102第22页/共39页阴性阳性样品TA97TA97 S9阴性TA97 +S9阴性TA97 S9阴性TA97 +S9阴性TA97 S9阳性TA97 +S9阳性TA97 S9阳性TA97 +S9阳性TA97 S9样品高剂量TA97 +S9样品高剂量TA97 S9样品高剂量TA97 +S9样品高剂量第23页/共39页底层培养基样品液0.1ml菌液0.1ml活化组加S9溶液0.5ml每支试管第24页/共39页第25页/共39页第26页/共39页第27页/共39页传代细胞到六孔板染毒换液，继续培养秋水仙素处理，收细胞，制片第28页/共39页第29页/共39页阴性 S1阴性 S1 S2 S2 S3 S3 阳性 阳性 -S9&+S9-S9阳性对照为甲磺酸甲酯+S9阳性对照为环磷酰胺第30页/共39页第31页/共39页秋水仙素处理4h消化细胞，1200rpm离心7min0.075mmol/L氯化钾低渗处理7