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1、-作者xxxx-日期xxxx观察DNA和RNA在细胞中分布的实验原理【精品文档】观察DNA和RNA在细胞中分布的实验原理: 1甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同,甲基绿使DNA呈现绿色,吡罗红使RNA呈现红色。利用甲基绿、吡罗红混合染色剂将细胞染色,可以显示DNA和RNA在细胞中的分布。 2盐酸能够改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞,同时使染色休中的DNA和蛋白质分离,有利于DNA与染色剂结合。;30水浴保温5min,作用为配合盐酸水解,盐酸浓度,水浴温度和保温时间都会影响水解效果,如水解度过低会影响后面染色效果,解度过高则会严重破坏细胞结构,干扰DNA和RNA观察;盐酸

2、水解的作用是"加速"和"有利于",该步骤可以省略,但会增加染色环节时间.水解当中,主要是质量分数为8%的盐酸起作用。 盐酸的作用:1.使染色体中的蛋白质和DNA分离,易于染色(主)。 2.使细胞膜的通透性改变,染色剂更易进入细胞,进而加快 染色速度。 烘干的作用:利于细胞贴在载玻片上,而不至于在水解和冲洗装片的过程 中滑入溶液中(杀死细胞并不是烘干的本质意图)。一、问题研究 1、原理与解析 (1)真核细胞的DNA主要分布在细胞核内,RNA主要分布在细胞质中。 (2)甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同,甲基绿对DNA亲和力强,使DNA显现

3、出绿色,而吡罗红对RNA的亲和力强,使RNA呈现出红色。用甲基绿、吡罗红的混合染色剂将细胞染色,可同时显示DNA和RNA在细胞中的分布。 (3)盐酸的作用 盐酸能改变细胞膜的通透性,加速染色剂的跨膜运输; 盐酸使染色体中的DNA与蛋白质分离,便于DNA与染色剂的结合。 注意事项 1.材料的选择 选用的实验材料既要容易获得,又要便于观察; 常用的观察材料由人的口腔上皮细胞、洋葱鳞片叶表皮细胞(为避免原有颜色的干扰,不可使用紫色表皮细胞) 2.取材要点 取口腔上皮细胞之前,应先漱口,以避免装片中出现太多的杂质; 取洋葱表皮细胞时,尽量避免材料上带有叶肉组织细胞。 3.冲洗载玻片时水的流速要尽量慢,

4、切忌直接用水龙头冲洗。 4.安全要点 用酒精灯烘烤载玻片时,不要只集中于材料处,而应将载玻片在火焰上来回移动,使载玻片均匀受热,以免破裂; 烘烤后的载玻片不要马上放入盛有稀盐酸的烧杯中,最好先自然冷却1分钟。 5.换用高倍镜观察材料时,只能用细准焦螺旋进行调焦,切不可动粗准焦螺旋。 主要步骤(以观察口腔上皮细胞为例) 1.取材 滴: 在洁净的载玻片上滴一滴质量分数为0.9%的NaCl溶液; 刮: 用消毒牙签在口腔内侧壁上轻轻地刮几下; 涂: 将牙签上的碎屑涂抹在载玻片的生理盐水中; 烘: 将涂有口腔上皮细胞的载玻片在酒精灯的火焰上烘干。 2.水解 解: 将烘干的载玻片放入装有30ml质量分数为8%的盐酸的小烧杯中,进行材料的水解; 保: 将小烧杯放入装有30温水的大烧杯中保温5分钟。 3.冲洗涂片 冲: 用缓缓的蒸馏水冲洗载玻片10秒钟; 吸: 用吸水纸吸去载玻片上的水分。 4.染色 染:用2滴吡罗红甲基绿混合染色剂滴在载玻片上,染色5分钟; 吸: 吸去多余染色剂; 盖: 盖上盖玻片。 5.观察 低: 在低倍物镜

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