药理学实验报告：磺胺药的药代动力学参数测定

1、磺胺药的药代动力学参数测定磺胺药的药代动力学参数测定2017.11.29背景知识1. 药代动力学p 药物在体内吸收、分布、代谢、排泄的过程及其动力学的药物在体内吸收、分布、代谢、排泄的过程及其动力学的规律规律DrugDrug in PlasmaDrug and /or metabolite(s) in urine, bileAbsorptionDistributionDrug in Tissues MetabolismMetabolites in TissueEliminationLiver Metabolism背景知识p 时量曲线（时量曲线（Time-concentration CurveT

2、ime-concentration Curve）：药物）：药物在血浆的浓度随时间推在血浆的浓度随时间推移而发生的变化，这种变化以血药浓度为纵坐标，以时间为横坐标移而发生的变化，这种变化以血药浓度为纵坐标，以时间为横坐标作图。作图。p 单次血管给药后的时量曲线可以直观的反映药物在体内的动态变化过程和主要药代学参数背景知识2. 药物消除动力学K：消除速率常数K：消除速率常数一房室模型，血药浓度衰减速率一致，时量曲线为直线房室概念和房室模型二房室模型，药物的血药浓度衰减因分布代谢排泄方式的速率不同，呈现特殊的时量曲线：双曲线房室概念和房室模型背景知识3. 房室模型实验内容1. 实验目的：p 磺胺药代

3、动力学参数2. 实验原理:p 磺胺类药磺胺类药物苯环上氨基（物苯环上氨基（NHNH2 2）在酸性条件下生成铵类（）在酸性条件下生成铵类（-NH-NH3 3+ +）化合）化合物，与亚硝酸钠发生重氮化反应，生成物，与亚硝酸钠发生重氮化反应，生成重氮重氮盐盐（-N=N-N=N+ +- -）。这种化合）。这种化合物在物在525nm525nm波长下比色，其光密度与磺胺类药物的浓度呈正比波长下比色，其光密度与磺胺类药物的浓度呈正比。3. 3. 实验动物：实验动物：p 新西兰白兔新西兰白兔实验方法1麻醉，分离颈动脉。耳缘静脉注射肝素抗凝后，颈动脉插管，备取动脉血用。2取血：取空白血样0.4ml。家兔耳缘静脉

4、单次注射磺胺嘧啶（SD，0.3g/kg），然后分别于注射后0、3、5、15、30、45、60、90min时取动脉血，以上步骤准备室老师已做。3提前15预热分光光度仪4两套尖底和圆底试管各10个分别编号：空白、标准、0、3、5、15、30、45、60、90min；所有尖底管先加2.8ml7.5%三氯醋酸，再加入0.1ml相应的血样，空白和标准管加的是正常血样，其余的对着编号0分钟加入0分钟血样，依次类推。加的时候，多人配合操作，一人扶好血样杯子，以防把血样弄洒了（只有一份血样），一人拿好相对应编号的尖底管，另一人用吸管吸0.1ml血样，吸管头伸入管内，但不能接触到三氯醋酸液面，吸耳球吹出吸管内的

5、血液，因为血液一接触到三氯醋酸马上凝成块，会堵住吸管，另外一旦将血液吹入尖底管内，马上用手弹试管，马上拿到震荡器上震荡立即混匀。混匀是非常关键的一步。否则血凝成块，血中含的SD释放不出来，也影响血液中SD的测定。书上改错：第三步加蒸馏水这一步，标准管加的不是蒸馏水，应该是0.1ml标准品 0.05%SD实验方法5勿擅自使用离心机，使用前必须配平，否则会损坏离心机的轴，如何使用我到时会给大家演示，配平前先将黄色套筒倒掉里面可能前一组加入的水，放烧杯中间配平。配平加的水要加在黄色套筒内尖底离心管外，不要加在烧杯里。6离心后，小心取出离心管，此后的动作要轻，否则将离心的沉淀又悬起。两人协作，一人拿离

6、心管，另一人把吸管轻轻伸到离心管液面内较深处，但又不能接触到沉淀及不要把沉淀搅起，因为需要吸1.5ml上清到圆底管内，所以最好一次吸足量，如果反复吸容易把沉淀搅起来。注意显色顺序，一定先加亚硝酸钠后加麝香草酚，加的顺序错了的话，不会出现橙黄色，实验失败。勿擅自使用分光光度仪，必须老师讲解后再正确使用。测OD时，近身远端；空白低高浓度排列比色皿。装空白管液体的比色皿一直放在分光光度仪近身端，不要倒了，因为每次测量都要用它来调零。7.测定血药浓度：严格按照下表中的顺序加药：试管编试管编号号时间时间7.5%7.5%三三氯醋酸氯醋酸（mlml）血样血样（mlml） 蒸馏水蒸馏水（mlml）0.5%0.

7、5%亚亚硝酸钠硝酸钠(ml)(ml)，摇匀摇匀0.5%0.5%麝麝香 草 酚香 草 酚（mlml），），摇匀摇匀525nm525nm波波长 下 测长 下 测量 光 密量 光 密度度对照管对照管 给药前 2.80.1立即摇匀0.1充 分 摇匀，2000转/分 ， 离心5分钟；取 上 清液1.5ml，移 至 另一 相 应的 试 管中；0.51标准管标准管 给药前 2.80.1标准液0.10.51给药后给药后 02.80.10.10.5132.80.10.10.5152.80.10.10.51152.80.10.10.51302.80.10.10.51452.80.10.10.51602.80.10

8、.10.51902.80.10.10.51计算根据标准管的药物浓度及其光密度值，可计算出样品管内的药物浓度。公式如下：OD样/OD标 = C样/C标C样=（OD样/OD标）*500g/mlC标=1ml 0.05%SD=500g/ml拐点选择：分布相与清除相交点，即数据之间跳跃最大（除了0分和90分之外的时间点，拐点选频为5、15、和30即5、4、3。计算机进行曲线拟合：将所测得的血药浓度值与时间通过计算机进行曲线拟合，得到药时曲线，表达公式如下： Ct = Ae-t + Be-t其中，Ct：时间t后的血药浓度；A：分布开始时的血药浓度；：分布速率常数；B：消除开始时的血药浓度；：消除速率常数。

9、【实验结果】实验数据列表、时量曲线、药时曲线方程及药代动力学参数【实验结果】实验数据列表、时量曲线、药时曲线方程及药代动力学参数。作图：（作业）在半对数坐标纸上以时间（t）为横坐标，实测的光密度值换算而得的血药浓度的对数为纵坐标，绘制时量曲线图（可看电脑上画的时量曲线为曲线）。讨论：在实验报告讨论中填表：1）二室模型的药物，其体内过程有哪些特点？（列成表：概念、时量曲线、模型、表达式）2）药物消除动力学分为哪两类，各自的特点是什么？（列成表：概念、表达式、单次给药时量曲线、半衰期）3）根据所得到的药时曲线讨论SD的药代动力学特点。结论：磺胺类药物在体内以一级动力学消除，呈二房室模型。注意提问提

10、问：即刻的血药浓度和过了：即刻的血药浓度和过了9090分钟的血药浓度，哪一个血药浓度高？加取血分钟的血药浓度，哪一个血药浓度高？加取血样的吸量管为同一只，因此应先取空白血样，分别加到对照管和标准管中后，再样的吸量管为同一只，因此应先取空白血样，分别加到对照管和标准管中后，再从注射后从注射后90min90min时的血样开始取起，然后是注射后时的血样开始取起，然后是注射后6060、4545、3030、1515、5 5、3 3、0min0min的血样。的血样。不同吸管吸不同药品，做个标记或前后照应交代一下，别污染了。每每只试管内，先加三氯醋酸，再向此三氯醋酸内加入血样，加完血样后立即振只试管内，先加三氯醋酸，再向此三氯醋酸内加入血样，加完血样后立即振荡，否则会很快发生凝固，影响结果的准确性。荡，否则会很快发生凝固，影响结果的准确性。显色剂显色剂的顺序一定不能