口腔鳞状细胞癌中Mcl-1的表达与生存预后的相关性分析

1、    口腔鳞状细胞癌中mcl-1的表达与生存预后的相关性分析    杨美静王利山李新颖李彬庄伟杰魏立梅摘           要  目的：检测mcl-1在正常口腔黏膜和口腔鳞癌组织中的表达情况与患者预后生存之间的相关性。方法：应用免疫组化方法检测mcl-1在46例口腔鳞癌组织和11例正常口腔黏膜中的表达。运用spss17.0软件分析mcl-1在口腔鳞癌组织和在正常口腔黏膜中表达有无差异性，运用kaplan-meier分析mcl-1与口腔鳞癌的生存预后有无无明显相关性;结果：mcl-1

2、在口腔鳞癌组织和在正常口腔黏膜组织的表达具有差异性（p0.05）; 结论：mcl-1在口腔鳞癌中呈高表达，与病人的预后生存无明显相关性。关    键   词  口腔鳞状细胞癌;mcl-1;免疫组化;生存分析  r739.85                   文献标志码  a                     

3、 2096-0603（2019）09-0162-02恶性肿瘤严重威胁着人类的健康，治愈肿瘤已成为全世界范围内的难题之一。mcl-1是近年来发现的凋亡调控蛋白，在多种肿瘤中呈现高表达1-3。目前有关mcl-1在口腔鳞癌中的表达国内鲜有报道。本研究选取mcl-1作为研究对象，探讨其在口腔鳞癌中的表达情况并对mcl-1的表达与口腔鳞癌患者预后生存的关系进行分析，探讨mcl-1在口腔鳞状细胞癌发生发展中的作用，为口腔鳞状细胞癌的mcl-1分子靶向治疗提供依据。一、材料和方法（一）标本及临床资料口腔鳞癌组织均来自于潍坊市益都中心医院病理科的存档蜡块，共46例，来源均为在2008年12月至2014年12月

4、期间在该院接受外科手术治疗的患者切除的肿瘤标本。所有病例都已经过明确确诊。同时收集正常口腔唇黏膜组织11例，来源于在该院行唇腭裂手術患者切除的多余组织。（二）免疫组织化学染色结果评判标准参照文献关于mcl-1免疫组化染色的评判标准3，细胞中出现棕黄色染色的颗粒即视为阳性。对染色情况进行评分：在高倍镜（×400）视野下，随机选取每张切片的10个视野，每个视野中选取100个细胞，基数阳性细胞的个数进行评定：阳性细胞为0个用（-）表示，计分为0;阳性细胞的个数25%用（+）表示，计分为1;阳性细胞的个数为25%-50%用（+）表示，计分为2;阳性细胞的个数50%用（+）表示，计分为3。组织

5、染色阴性认定标准：计分为0或1的切片，组织染色阳性认定标准：计分为2或3的切片。（三）统计方法应用spss17.0统计学软件进行统计学分析，应用卡方检验进行两组之间的比较，以p<0.05为标准设定在统计学上具有显著的相关性。采用kaplan-meier进行单因素生存分析，运用cox-regression分析影响口腔鳞癌的病理因素。二、实验结果（一）mcl-1在正常口腔黏膜和口腔鳞癌中的表达mcl-1表达定位于细胞浆，呈棕褐色，见图1。46例鳞癌组织中mcl-1阳性的为26例，阴性为20例。阳性表达率为56.5%;11例正常黏膜组织中阴性为8例，阳性为3例，阳性表达率为27.3%。经卡方检

6、验分析，p<0.05，差异有显著性意义，说明mcl-1在口腔鳞癌中的表达与正常口腔黏膜中的表达存在差异。（二）mcl-1的表达与患者生存预后的关系截止到随访日期2018年10月4日，46例鳞癌患者中共死亡19例，生存26例，失访1例。运用kaplan-meier分析，实验数据表明，mcl-1与口腔鳞癌的生存预后无明显相关性（p>0.05），见图2。根据mcl-1的表达和各临床病理参数关系，运用cox-regression分析与口腔鳞癌生存预后相关的因素，结果表明淋巴转移与口腔鳞癌患者的预后和生存有相关性（p<0.05）。（详见表1和表2）三、讨论mcl-1是较新发现的凋亡调控

7、蛋白，近年来才被纳入研究。mallick，s4等比较了正常口腔黏膜、癌前状态及口腔鳞癌内mcl-1的表达。他们选取口腔白斑和口腔黏膜下纤维化作为癌前状态研究组。免疫组化染色结果显示mcl-1在口腔鳞癌、口腔白斑和口腔黏膜下纤维化组织内的表达明显要高于在正常黏膜的表达，但是没有发现在前三者中表达存在明显差异且在检测病理参数与该蛋白表达时也没有发现相关性。为了进一步检测mcl-1是否在口腔鳞癌细胞生长过程中发挥作用，mallick，s等人还利用sirna方法将口腔鳞癌细胞和成纤维细胞中mcl-1的水平下调后，进一步检测两种细胞的生长情况。结果显示被检测的两个口腔鳞癌细胞系中细胞的生长都受到抑制。相

8、反，成纤维细胞的生长却没有受到明显影响，以上结果都显示，mcl-1与口腔鳞癌的发生相关。mateo，y5通过对127例胃癌患者进行mcl-1与预后生存关系的分析，结果数据说明mcl-1阳性表达的病例患者的预后要明显比mcl-1阴性表达的患者预后差，多变量分析结果显示mcl-1的表达强度可以作为预测胃癌患者预后是否良好的一个指标。wuilleme-toumi，s.6等对mcl-1在多发性骨髓瘤中的表达进行研究发现mcl-1表达阳性的患者术后复发率较表达阴性者高，同时短时间生存率也比表达阴性者低。shigemasa，k.7对卵巢癌的研究中同样得出mcl-1高表达者预后差。限于本实验样本量比较小、有

9、可能不能很好地反映总体的情况，致使结果与国外文献报道有差异。后续实验还应进行较大样本量的检测，便于排除偶然情况，更好地反映总体特点。參考文献：1wuilleme-toumi， s.， et al.， mcl-1 is overexpressed in multiple myeloma and associated with relapse and shorter survivalj. leukemia， 2005. 19（7）：1248-1252.2schulze-bergkamen， h.， et al.， suppression of mcl-1 via rna interference

10、sensitizes human hepatocellular carcinoma cells towards apoptosis inductionj. bmc cancer， 2006，6（1）： 232.3song， l.， et al.， research paper mcl-1 regulates survival and sensitivity to diverse apoptotic stimuli in human non-small cell lung cancer cellsj. cancer biology & therapy， 2005，4（3）： 267-27

11、6.4mallick， s.， et al.， human oral cancers have altered expression of bcl-2 family members and increased expression of the anti-apoptotic splice variant of mcl-1j. j pathol， 2009，217（3）： 398-407.5maeta， y.， et al.， expression of mcl-1 and p53 proteins predicts the survival of patients with t3 gastric carcinomaj. gastric cancer， 2004，7（2）： 78-84.6wuilleme-toumi， s.， et al.， mcl-1 is overexpressed in multiple myeloma and associated with relapse and shorter survivalj. leukemi