实验1大肠杆菌的培养和分离

1、目录目录 实验实验1 大肠杆菌的培养和分离大肠杆菌的培养和分离 实验实验2 分离以尿素为氮源的微生物分离以尿素为氮源的微生物 实验实验4 果汁中的果胶和果胶酶果汁中的果胶和果胶酶 实验实验6 -淀粉酶的固定化及淀粉水解淀粉酶的固定化及淀粉水解 作用的检测作用的检测 实验实验8 果酒及果醋的制作果酒及果醋的制作 实验实验10 泡菜的腌制和亚硝酸盐的测定泡菜的腌制和亚硝酸盐的测定微生物微生物无细胞结构：病毒无细胞结构：病毒有细胞结构有细胞结构原核生物原核生物真核生物真核生物细菌细菌放线菌放线菌蓝藻蓝藻支原体支原体真菌真菌原生生物原生生物微生物：微生物：一切肉眼看不见或看不清楚的微一切肉眼看不见或看

2、不清楚的微小生物的总称小生物的总称所有的细菌所共有的基本结构有哪些？所有的细菌所共有的基本结构有哪些？某些细菌所具有的特殊结构有哪些？某些细菌所具有的特殊结构有哪些？（拟核）（拟核）基本结构基本结构特殊结构特殊结构细胞壁细胞壁细胞壁有哪些功能？细胞壁有哪些功能？ 伤伤寒寒杆杆菌菌细细胞胞壁壁中中含含毒毒素素细胞壁的成分？细胞壁的成分？肽聚糖肽聚糖结构结构化学本质化学本质功能或应用功能或应用细胞壁细胞壁细胞膜细胞膜细细胞胞质质基质基质核糖体核糖体质粒质粒贮藏性贮藏性颗粒颗粒拟核拟核主要是肽聚糖主要是肽聚糖 保护和维持细胞形状等保护和维持细胞形状等同真核生物同真核生物同真核生物同真核生物多种成分多

3、种成分新陈代谢的主要场所新陈代谢的主要场所小型小型DNA分子分子同真核生物同真核生物同真核生物同真核生物控制细菌的抗药性、控制细菌的抗药性、固氮、抗生素生成固氮、抗生素生成多种成分多种成分贮藏营养物质或代谢废贮藏营养物质或代谢废物，如淀粉粒、硫粒物，如淀粉粒、硫粒大型环型大型环型DNA 控制细菌主要遗传性状控制细菌主要遗传性状基本的结构基本的结构 有些细菌在一定的条件下，细胞里面形成一个椭圆形的休眠有些细菌在一定的条件下，细胞里面形成一个椭圆形的休眠体，叫做体，叫做芽孢芽孢。芽孢的壁很厚，对。芽孢的壁很厚，对干旱、低温、高温干旱、低温、高温等恶劣的环等恶劣的环境有很强的抵抗力。例如，有的细菌的

4、芽孢，煮沸境有很强的抵抗力。例如，有的细菌的芽孢，煮沸3 3小时以后才小时以后才死亡。芽孢又小又轻，可以随风飘散。当环境适宜（如温度、水死亡。芽孢又小又轻，可以随风飘散。当环境适宜（如温度、水分适宜）的时候，芽孢又可以萌发，形成一个细菌分适宜）的时候，芽孢又可以萌发，形成一个细菌. .细菌的外形与大小细菌的外形与大小细菌：细菌：单细胞不分枝的原核微生物单细胞不分枝的原核微生物。细胞。细胞，通常用适当染料通常用适当染料后显微镜观察后显微镜观察常见的三种细菌典型形态常见的三种细菌典型形态球菌球菌 杆菌杆菌 弧菌弧菌细菌的革兰氏染色细菌的革兰氏染色 革兰氏染色法是一种用于细菌的染色法。此革兰氏染色法

5、是一种用于细菌的染色法。此法将细菌分为两类，即法将细菌分为两类，即革兰氏阳性菌和革兰氏革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌阴性菌。所谓革兰氏阳性菌就是用革兰氏染液。所谓革兰氏阳性菌就是用革兰氏染液染色后，再用脱色液处理，细菌仍保留染色液染色后，再用脱色液处理，细菌仍保留染色液的颜色；革兰氏阴性菌则相反。这两种菌的的颜色；革兰氏阴性菌则相反。这两种菌的差差别在于细胞壁的成分不同别在于细胞壁的成分不同。革兰氏阳性菌革兰氏阳性菌革兰氏阴性菌革兰氏阴性菌需氧型：需氧型：好氧性细菌。如：枯草杆菌、硝化细菌、铁好氧性细菌。如：枯草杆菌、硝化细菌、铁细菌、根细菌、根 瘤菌等瘤菌等。厌氧型：厌氧型：厌氧性细菌。如：破伤

6、风杆菌，大肠杆菌，厌氧性细菌。如：破伤风杆菌，大肠杆菌，乳酸菌等。乳酸菌等。 异养需氧型异养需氧型 异养厌氧型异养厌氧型 自养需氧型自养需氧型 自养厌氧型自养厌氧型问问 ： 细菌的代谢类型属于什么方式细菌的代谢类型属于什么方式? 在生态系统中处于什么地位在生态系统中处于什么地位?分解者或消费者分解者或消费者生产者生产者自养自养硝化细菌、铁细菌、硫细菌等硝化细菌、铁细菌、硫细菌等。异养异养大肠杆菌、乳酸菌、枯草杆菌等。大肠杆菌、乳酸菌、枯草杆菌等。2020分钟分钟3030分钟，分裂一次分钟，分裂一次二分裂是细菌最普遍、最二分裂是细菌最普遍、最主要的繁殖方式。主要的繁殖方式。n延长菌体，延长菌体，

7、DNA复制复制n细胞赤道附近的细胞质膜细胞赤道附近的细胞质膜凹陷生长凹陷生长形成横隔膜，形成横隔膜，同时形成横隔壁同时形成横隔壁产生两产生两个子细胞。个子细胞。n垂直于长轴分裂垂直于长轴分裂 二分裂二分裂 无鞭毛的球菌：无鞭毛的球菌：菌落较小较厚、边菌落较小较厚、边缘整齐缘整齐. . 有鞭毛的细菌：有鞭毛的细菌：菌落大而扁平、边菌落大而扁平、边缘波状或锯齿状缘波状或锯齿状. .问：菌落在生态学问：菌落在生态学上属于什么单位？上属于什么单位？菌菌 落落菌落可以作为菌种菌落可以作为菌种鉴定的重要依据。鉴定的重要依据。大肠杆菌大肠杆菌酵母菌酵母菌放线菌放线菌 霉菌霉菌白色或乳白色，光白色或乳白色，光

8、滑滑大肠杆菌菌落：大肠杆菌菌落：影响影响微生物生长的环境因素微生物生长的环境因素 微生物的生长速率随温度的上升而加快微生物的生长速率随温度的上升而加快细胞内的蛋白质和核酸等发生了不可逆的破坏。细胞内的蛋白质和核酸等发生了不可逆的破坏。微生物的生长速率会急剧下降微生物的生长速率会急剧下降n1、温温 度度 n微生物生长微生物生长最旺盛最旺盛时的温度叫时的温度叫最适生长温度最适生长温度n在最适生长温度范围内在最适生长温度范围内n超过最适生长温度以后超过最适生长温度以后多数细菌：多数细菌：6.57.5；真菌：；真菌：5.06.0； 放线菌：放线菌：7.5-8.5。影响酶的活性，细胞膜的稳定性等影响酶的

9、活性，细胞膜的稳定性等影响微生物对营养物质的吸收等。影响微生物对营养物质的吸收等。n2、pHpHn每种微生物的最适每种微生物的最适pH不同不同n超过最适超过最适pH范围以后范围以后 3、氧、氧根据微生物对于氧的需要可以将微生物分为：根据微生物对于氧的需要可以将微生物分为：好氧型微生物好氧型微生物兼氧型微生物兼氧型微生物厌氧型微生物厌氧型微生物（多数细菌和大多数真菌）（多数细菌和大多数真菌）（如：酵母菌）（如：酵母菌）（如：某些链球菌、甲烷杆菌）（如：某些链球菌、甲烷杆菌）环境中氧含量的状况，对不同代谢类型的微生物环境中氧含量的状况，对不同代谢类型的微生物群体的生长具有不同的影响。群体的生长具有

10、不同的影响。 碳源碳源 氮源氮源 生长因子生长因子 无机盐无机盐 水水微生物需要的五大类营养要素物质微生物需要的五大类营养要素物质微生物微生物需要的营养物质需要的营养物质概念概念来源来源作用作用碳源凡是能为微凡是能为微生物提供所生物提供所需碳元素的需碳元素的营养物质营养物质无机碳源无机碳源 COCO2 2 NaHCO NaHCO3 3等等有机碳源有机碳源 糖类糖类 脂肪酸脂肪酸 花生粉饼花生粉饼 石油石油 等等构成细胞构成细胞物质和一些物质和一些代谢产物代谢产物异养微生异养微生物的能源物的能源1、微生物的碳源、微生物的碳源概念概念来源来源作用作用氮氮源源无机氮源无机氮源 N N2 2、NHNH

11、4 4+ +、 NO NO3 3- -、NHNH3 3等等有机氮源有机氮源 尿素、牛肉膏、尿素、牛肉膏、 蛋白胨、蛋白胨、 氨基酸等氨基酸等凡是能够凡是能够为微生物为微生物提供提供N N元元素的营养素的营养物质物质主要用于合成主要用于合成蛋白质、核酸蛋白质、核酸及含及含N N的代谢的代谢产物产物2、微生物的氮源、微生物的氮源 哪些微生物能够利用分子态氮？哪些微生物能够利用分子态氮？氮源能否为微生物提供能量？氮源能否为微生物提供能量？思考思考 概念概念 成分成分 作用作用 为什么不可缺少？为什么不可缺少？ 常见的生长因子常见的生长因子微生物生长不可缺少的微量有机物微生物生长不可缺少的微量有机物有

12、机物有机物酶和核酸的组成成分酶和核酸的组成成分缺乏合成这些物质所需酶或合成能力有限缺乏合成这些物质所需酶或合成能力有限维生素、氨基酸、嘌呤、嘧啶等维生素、氨基酸、嘌呤、嘧啶等3 3、生长因子、生长因子 设计一个实验证明胱氨酸是肠膜状乳杆菌所需设计一个实验证明胱氨酸是肠膜状乳杆菌所需的生长因子。的生长因子。培养基培养基不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方2 2、培养基的种类、培养基的种类1 1、成分、成分水、碳源、氮源、水、碳源、氮源、 无机盐、生长因子无机盐、生长因子同时还要达到同时还要达到pHpH值、渗透压、氧气等要求值、渗透压、氧气等要求（1 1

13、）按物理状态可分为）按物理状态可分为固体培养基、半固体培养基固体培养基、半固体培养基和和液体培养基液体培养基。（2 2）按功能来分，可分为）按功能来分，可分为选择培养基选择培养基和和鉴别培养基鉴别培养基。（3 3）按成分来分，可分为）按成分来分，可分为天然培养基天然培养基和和合成培养基合成培养基。培养基（培养液）是由人工方法配制而成的，专供微生培养基（培养液）是由人工方法配制而成的，专供微生物生长繁殖使用的混合营养液。物生长繁殖使用的混合营养液。 液体培养基：增菌液体培养基：增菌 固体培养基：纯化，增菌固体培养基：纯化，增菌 半固体培养基：动力检测，保种半固体培养基：动力检测，保种选择培养基选

14、择培养基加入青霉素的培养基加入青霉素的培养基: : 分离酵母菌、霉菌等真菌分离酵母菌、霉菌等真菌加入高浓度食盐的培养基加入高浓度食盐的培养基: : 分离金黄色葡萄球菌分离金黄色葡萄球菌不加氮源的无氮培养基不加氮源的无氮培养基: : 分离固氮菌分离固氮菌不加含碳有机物的无碳培养基不加含碳有机物的无碳培养基: : 分离自养型微生物分离自养型微生物鉴别培养基鉴别培养基EMB培养基培养基 鉴别大肠杆菌鉴别大肠杆菌 根据细胞生存所需物质的种类和数量，用人工方根据细胞生存所需物质的种类和数量，用人工方法模拟合成的。主要成分是氨基酸、维生素、碳水化法模拟合成的。主要成分是氨基酸、维生素、碳水化合物、无机盐和

15、其它一些辅助物质。合物、无机盐和其它一些辅助物质。优点：优点：标准化生产，组分和含量相对固定标准化生产，组分和含量相对固定; ;成本低成本低 缺点：缺点： 缺少某些成分，不能完全满足体外细胞生长缺少某些成分，不能完全满足体外细胞生长需要。需要。 合成培养基合成培养基: :天然培养基：天然培养基： 天然培养基有血清、血浆、和组织提取液（如鸡胚天然培养基有血清、血浆、和组织提取液（如鸡胚和牛胚浸液）。和牛胚浸液）。 优点：优点：营养成分丰富，培养效果好营养成分丰富，培养效果好 缺点：缺点：来源受限来源受限; ;成分复杂，影响对某些实验产物的成分复杂，影响对某些实验产物的提取和实验结果的分析，易发生

16、支原体污染。提取和实验结果的分析，易发生支原体污染。1.1.无菌操作的概念无菌操作的概念 无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所有无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所有防止防止_污染的方法。污染的方法。无菌操作无菌操作_必须无菌、必须无菌、_也必须要无菌、也必须要无菌、_时不能带入其他杂菌时不能带入其他杂菌主要包括：主要包括：杂菌杂菌2.2.消毒与灭菌消毒与灭菌的概念及两者的区别的概念及两者的区别 消毒：消毒：使用使用较温和理化因素较温和理化因素，仅杀死物体表面或内，仅杀死物体表面或内部的部的一部分一部分对人体有害的微生物的过程。对人体有害的微生物的过程。不能杀死不能杀死芽孢和孢子。芽孢和孢子。

17、灭菌：灭菌：使用使用强烈的理化因素强烈的理化因素消灭物体内外消灭物体内外所有所有微生微生物，包括芽孢和孢子。物，包括芽孢和孢子。各种器具各种器具培养基培养基转移菌种转移菌种高压蒸汽灭菌高压蒸汽灭菌洒精灯灼烧灭菌洒精灯灼烧灭菌干热灭菌干热灭菌灭菌方法：灭菌方法：煮沸消毒法煮沸消毒法巴氏消毒法巴氏消毒法化学药剂消毒法（酒精、氯气等）化学药剂消毒法（酒精、氯气等）紫外线消毒法紫外线消毒法消毒方法：消毒方法：3 3、常用的灭菌和消毒的方法、常用的灭菌和消毒的方法培养基、无菌水、培养基、无菌水、各种耐高温的玻璃金属器具各种耐高温的玻璃金属器具需要保持干燥需要保持干燥耐高温的玻璃金属器皿耐高温的玻璃金属器

18、皿接种环等金属器具接种环等金属器具手提式灭菌锅手提式灭菌锅1kg/cm1kg/cm2 2 、121121下维持下维持15min.15min.请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要，请选择合适的方法。如果需要，请选择合适的方法。（1 1） 培养细菌用的培养基与培养皿培养细菌用的培养基与培养皿（2 2） 玻棒、试管、烧瓶和吸管玻棒、试管、烧瓶和吸管（3 3） 实验操作者的双手实验操作者的双手答：（答：（1 1）、（）、（2 2）需要灭菌；（）需要灭菌；（3 3）需要消毒。）需要消毒。分布：人和哺乳动物肠道，此外还广泛分布于水、分布：人和哺乳动物

19、肠道，此外还广泛分布于水、 污水、土壤、谷类、乳制品等当中。污水、土壤、谷类、乳制品等当中。大肠杆菌在人体的大肠杆菌在人体的_中一般对人体无害，但任何中一般对人体无害，但任何大肠杆菌如果进入大肠杆菌如果进入_都会对人体产生危害。都会对人体产生危害。大肠杆菌是大肠杆菌是_工程中被广泛采用的工具。工程中被广泛采用的工具。肠道肠道泌尿系统泌尿系统基因基因革兰氏阴性菌革兰氏阴性菌代谢类型：代谢类型：异养，兼性厌氧型异养，兼性厌氧型生长适宜温度：生长适宜温度：3737左右左右实验一实验一 大肠杆菌的培养和分离大肠杆菌的培养和分离 实验目的实验目的1、进行大肠杆菌的、进行大肠杆菌的扩增扩增，利用液体培养基

20、进行，利用液体培养基进行细菌培养的操作细菌培养的操作2、进行大肠杆菌的、进行大肠杆菌的分离分离，用固体平面培养基进，用固体平面培养基进行细菌的划线培养行细菌的划线培养3、说明大肠杆菌培养的条件和操作要求的原理、说明大肠杆菌培养的条件和操作要求的原理 了解有关培养基的基础知识，进行无了解有关培养基的基础知识，进行无菌技术的操作，进行微生物的培养。菌技术的操作，进行微生物的培养。 一、实验目标：一、实验目标： 掌握掌握培养基的制备培养基的制备、高压蒸气灭菌高压蒸气灭菌和和平板划线法平板划线法等基本操作技术，熟练、规范等基本操作技术，熟练、规范地进行无菌操作，成功地培养微生物。地进行无菌操作，成功地

21、培养微生物。无菌技术的操作。无菌技术的操作。二、实验重点和难点：二、实验重点和难点：三、技能目标：三、技能目标： （一）培养基的配置与灭菌（一）培养基的配置与灭菌 取取2个个250ml的三角瓶中分别装入的三角瓶中分别装入50mlLB液体培养液体培养基和基和50mlLB固体培养基（刚配好，尚未凝固），加上固体培养基（刚配好，尚未凝固），加上封口膜，牛皮纸包装后高压锅灭菌封口膜，牛皮纸包装后高压锅灭菌15min。LB液体培养基液体培养基细菌的扩大培养细菌的扩大培养LB固体培养基固体培养基细菌的划线分离细菌的划线分离封口膜：既通气封口膜：既通气又不使菌进入又不使菌进入 （二）倒平板（二）倒平板 灭菌

22、后的培养基在灭菌后的培养基在无菌操作台无菌操作台上倒入上倒入4个培养皿个培养皿中，倒后立即置于中，倒后立即置于水平水平位置上，轻轻晃动，使培位置上，轻轻晃动，使培养基铺满平皿底部，待凝，使之形成平面。养基铺满平皿底部，待凝，使之形成平面。倒倒平平板板操操作作注意事项：注意事项：1.培养基灭菌后，需要冷却到培养基灭菌后，需要冷却到60 左右时，才能用左右时，才能用来倒平板来倒平板2.灭菌及消毒：无菌操作台用超净紫外灯和过滤风灭菌及消毒：无菌操作台用超净紫外灯和过滤风灭菌；桌面及人手用酒精棉球消毒灭菌；桌面及人手用酒精棉球消毒 3.操作时右手无名指和小指操作时右手无名指和小指夹住封口膜夹住封口膜,

23、另外三指持另外三指持三角瓶三角瓶,左手拿培养皿并打开上盖的一边左手拿培养皿并打开上盖的一边,在在酒精灯火酒精灯火焰旁焰旁操作操作.4.需要使锥形瓶的瓶口通过火焰，需要使锥形瓶的瓶口通过火焰，灼烧灭菌灼烧灭菌5.平板冷凝后，要将平板冷凝后，要将平板倒置平板倒置,既可以使培养基表面既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染培养基，造成污染. （三）大肠杆菌的扩大培养（三）大肠杆菌的扩大培养 将斜面上培养的大肠杆菌菌种接种到将斜面上培养的大肠杆菌菌种接种到灭菌后的灭菌后的液体培养基液体培养基中中,使其在使其在37摇床培养

24、摇床培养12小时。小时。注意事项注意事项:1.火焰旁火焰旁从斜面上用接种环取菌从斜面上用接种环取菌;2.取菌前取菌前接种环要接种环要用酒精灯用酒精灯灼烧灼烧灭菌灭菌,冷却后方能取菌冷却后方能取菌;3.取菌后封口膜和棉塞复原取菌后封口膜和棉塞复原.接种方法接种方法（四四）大肠杆菌的划线分离）大肠杆菌的划线分离划线分离法划线分离法和和涂布分离法涂布分离法划线分离：划线分离：方法简单，但单菌落较难分开。方法简单，但单菌落较难分开。涂布分离：涂布分离：单菌落更易分开，但操作复杂。单菌落更易分开，但操作复杂。注意事项注意事项:1.接种环接种环只蘸一次菌液只蘸一次菌液,但要在培养基不同位置但要在培养基不同

25、位置连续连续划线多次划线多次.2.划线划线首尾不能相接首尾不能相接3.划线后划线后,培养皿培养皿倒置培养倒置培养1224h 1.1.为什么在操作的第一步以及每次划线之前为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？要灼烧接种环吗？为什么？ 答：操作的第一步灼烧接种环是为了答：操作的第一步灼烧接种环是为了避免接避免接种环上可能存在的微生物污染培养物；种环上可能存在的微生物污染培养物；每次划每次划线前灼烧接种环是为了线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种接种环上残留

26、的菌种，使下一次划线时，接种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到菌落。目逐渐减少，以便得到菌落。划线结束后灼烧划线结束后灼烧接种环，能及时接种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，避杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。免细菌污染环境和感染操作者。 2. 2.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？再进行划线？答：以免接种环温度太高，杀死菌种。答：以免接种环温度太高，杀死菌种

27、。 3. 3.在作第二次以及其后的划线操作时，为在作第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？什么总是从上一次划线的末端开始划线？ 答：答：划线后，线条末端细菌的数目比线条划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。2、涂布分离法、涂布分离法:是指将培养的菌液稀释一定的倍数是指将培养的菌液稀释一定的倍数,然后然后取一定量稀释液加在固体培养基上取一

28、定量稀释液加在固体培养基上,用玻璃刮刀涂布在用玻璃刮刀涂布在培养基平面上培养基平面上.【典例解析典例解析】 例例1 1关微生物营养物质的叙述中，正确的是关微生物营养物质的叙述中，正确的是A.A.是碳源的物质不可能同时是氮源是碳源的物质不可能同时是氮源 B.B.凡碳源都提供能量凡碳源都提供能量C.C.除水以外的无机物只提供无机盐除水以外的无机物只提供无机盐 D.D.无机氮源也能提供能量无机氮源也能提供能量 解析：解析：不同的微生物，所需营养物质有较大差别，要不同的微生物，所需营养物质有较大差别，要针对微生物的具体情况分析。对于针对微生物的具体情况分析。对于A A、B B选项，它的表达是选项，它的

29、表达是不完整的。有的碳源只能是碳源，如二氧化碳；有的碳源可不完整的。有的碳源只能是碳源，如二氧化碳；有的碳源可同时是氮源，如同时是氮源，如NHNH4 4HCOHCO3 3；有的碳源同时是能源，如葡萄；有的碳源同时是能源，如葡萄糖；有的碳源同时是氮源，也是能源，如蛋白胨。对于糖；有的碳源同时是氮源，也是能源，如蛋白胨。对于C C选选项，除水以外的无机物种类繁多，功能也多样。如二氧化碳，项，除水以外的无机物种类繁多，功能也多样。如二氧化碳，可作为自养型微生物的碳源；可作为自养型微生物的碳源；NaHCONaHCO3 3，可作为自养型微，可作为自养型微生物的碳源和无机盐；而生物的碳源和无机盐；而NaC

30、lNaCl则只能提供无机盐。对于则只能提供无机盐。对于DD选项，无机氮源提供能量的情况还是存在的，如选项，无机氮源提供能量的情况还是存在的，如NHNH3 3可为硝可为硝化细菌提供能量和氮源。化细菌提供能量和氮源。答案：答案：D例例2 2下面对发酵工程中灭菌的理解下面对发酵工程中灭菌的理解的是的是A.A.防止杂菌污染防止杂菌污染 B.B.消灭杂菌消灭杂菌C.C.培养基和发酵设备都必须灭菌培养基和发酵设备都必须灭菌 D.D.灭菌必须在接种前灭菌必须在接种前答案：答案：B 解析：灭菌是微生物发酵过程的一个重要环节。解析：灭菌是微生物发酵过程的一个重要环节。A A说的是灭菌的目的，因为发酵所用的菌种大多是单一说的是灭菌的目的，因为发酵所用的菌种大多是单一的纯种，整个发酵过程不能混入其他微生物（杂菌），的纯种，整个发酵过程不能混入其他微生物（杂菌），所以是正确的；所以是正确的；B B是错误的，因为灭菌的目的是防止杂是错误的，因为灭菌的目的是防止杂菌污染，但实际操作中不可能只