a酵母菌的形态观察ppt课件

1、一 教学要求 学习并掌握形状察看及死活细胞的鉴别方法。二 实验原理 酵母菌是不运动的单细胞真核微生物，其大小通常比细菌大几十倍甚至十几倍。大多数以出芽方式进展无性繁衍，有的分裂繁衍；有性繁衍是经过接合产生子囊孢子。本实验是经过美蓝染液水浸片和水碘液水浸片来察看酵母的形状和出芽生殖方式。 美蓝是一种无毒的染料，它的氧化型呈蓝色，复原型无色。用美蓝对酵母的活细胞进展染色时，由于细胞的新陈代谢作用，细胞内具有较强的复原才干，使美蓝由蓝色的氧化型变为无色的复原型。因此，具有复原才干的酵母活细胞是无色的，而死细胞或代谢作用微弱的衰老细胞那么呈蓝色，借此即可对酵母菌的死活细胞进展鉴别。Scanning e

2、lectron micrograph of the common bakers and brewers yeast Saccharomyces cerevisiae. Note the budding division and previous bud scars.l菌种：斯达油脂酵母Lipomyces starkeyi2. 0.l 培育基和试剂：麦芽汗琼脂培育基，0.05 和0.1 吕氏碱性美蓝染色液，革兰氏染色用碘液.l显微镜，玻片等.四四 操作步骤操作步骤 1、菌种活化、菌种活化将酵母移种至新颖的麦芽汁琼脂斜面上，将酵母移种至新颖的麦芽汁琼脂斜面上，2528培育培育48 h左右备用。左右

3、备用。2、美蓝镜片的察看、美蓝镜片的察看1在载玻片中央加一滴在载玻片中央加一滴0.1%吕氏碱性美蓝染色掖，然吕氏碱性美蓝染色掖，然后按无菌操作用接种环挑取少量酵母菌苔放在染液中，混后按无菌操作用接种环挑取少量酵母菌苔放在染液中，混合均匀。合均匀。2用镊子取一块盖玻片，先将一边与菌液接触，然后用镊子取一块盖玻片，先将一边与菌液接触，然后渐渐将盖玻片放下使其盖在菌液上。渐渐将盖玻片放下使其盖在菌液上。3将制片放置约将制片放置约3min后镜检，先用低倍镜然后用高倍后镜检，先用低倍镜然后用高倍镜察看酵母的形状和出芽情况，并根据颜色来区别死活细镜察看酵母的形状和出芽情况，并根据颜色来区别死活细胞。胞。4

4、染色约染色约0.5h后再次进展察看，留意死活细胞数量能否后再次进展察看，留意死活细胞数量能否添加。添加。 5用0.05%吕氏碱性美蓝染液反复上述操作。3、水一碘液镜片的察看在载玻片中央加一小滴革兰氏染色用碘液，然后在其上加3小滴水，取少许酵母菌苔放在水一碘液中混匀，盖上盖玻片后镜检。 本卷须知1、加染液不宜过多或过少，否那么，在盖上盖玻片时，菌液会溢出或出现大量气泡而影响察看。2、盖玻片不宜平着放下，以免产生气泡影响察看。六 思索题1、吕氏碱性美蓝染液浓度和作用时间的不同，对酵母菌死细胞数量有何影响？试分析其缘由。2、在显微镜下，酵母菌有哪些突出的特征区别于普通细菌？ 一 教学要求 学习并掌握

5、酵母菌子囊孢子的察看方法。二、根本原理 子囊孢子是子囊菌类真菌有性生殖产生的有性孢子。在酵母菌中，能否构成子囊孢子及其形状是酵母菌分类鉴定的重要根据之一。酵母菌构成子囊孢子需求一定的条件，所以对不同种属的酵母要选择适宜构成子囊孢子的培育基。 lAscosporelFormed in a sac (ascus)l菌种：同前.l试剂：5孔雀绿水溶液，0.5番红水溶液，95乙醇.l显微镜，玻片等.四四 操作步骤操作步骤1、菌种活化、菌种活化将酵母移种至新颖的麦芽汁琼脂斜面上，将酵母移种至新颖的麦芽汁琼脂斜面上，2528培育培育24h左左右，然后再转种右，然后再转种23次。次。 2、产孢培育、产孢培育将经活化的菌种转接到麦氏琼脂斜面上，将经活化的菌种转接到麦氏琼脂斜面上，2528培育约培育约1周。周。 3、制片、制片取经产孢培育的酵母斜面培育物，在净洁载玻片上按常规涂取经产孢培育的酵母斜面培育物，在净洁载玻片上按常规涂片、枯燥、固定。片、枯燥、固定。 4、染色滴加5%孔雀绿染色1min。5、脱色用95%乙醇脱色30s，水洗。6、复染用0.5%番红复染30s，水洗，用吸水纸吸干。7、镜