低温诱导植物染色体数目的变化

1、1/ 3 低温诱导植物染色体数目的变化 低温诱导植物染色体数目的变化一、实验教学目标 1. 知识目标 :理解低温诱导植物细胞染色体数目变化的作用机制。 2. 能力目标 :学会低温诱导植物染色体数目变化的方法。 3. 情感态度价值观 :体会实验结果带来的成就感 ,感受团队合作的快乐。 二、实验原理 进行正常有丝分裂的植物分生组织细胞 ,在有丝分裂后期 ,染色体的着丝点分 裂,子染色体在纺锤丝的作用下 ,分别移向两极 ,最终被平均分配到两个子细胞中 去。 用低温处理植物分生组织细胞 ,能够抑制纺锤体的形成 ,以致影响染色体被拉 向两极 ,使细胞也不能分裂成两个子细胞。结果 ,植物细胞染色体数目发生

2、变化。 三、实验仪器材料 洋葱或大葱、蒜、培养皿、滤纸、纱布、烧杯、镊子、剪刀、显微镜、载 玻片、盖玻片、冰箱、卡诺氏液、改良苯酚品红染液、体积分数为 15%的盐酸 溶液、体积分数为 95%的酒精溶液。 四、实验方法 1.培养根尖 :将洋葱放在装满清水的广口瓶 ,让洋葱的底部接触水面。 2.低温诱导 :待洋葱长出 1cm 左右的不定根时 ,将整个装置放入冰箱的低温室 (4C)内,诱导培养 36 小时。 3固定细胞形态：剪去诱导处理的根尖约 0.5-25px 放入卡诺氏液中浸泡 0.5-1 小时,以固定细胞的形态 ,然后用体积分数约 95的酒精冲洗 2 次。 4. 制作装片 ：取固定好的根尖 ,

3、进行解离 ;漂洗;染色;制片 4 个步骤,具体操作方 法与“观察植物细胞的有丝分裂 ”实验相同。 5. 观察装片 :先用低倍镜寻找染色体形态较好的分裂相。视野中既有正常的 二倍2/ 3 体细胞 ,也有染色体数目发生改变的细胞 ,发生染色体数目变化的细胞中染色 体数目可能为正常细胞的两倍。确认某个细胞发生染色体数目变化后、再用高 倍镜观察。 6. 记录结果 :对看到的发生染色体数目加倍的细胞拍照记录。 试剂及用途 : (1) 卡诺氏液 :固定细胞形态。 (2) 95%酒精:冲洗附着在根尖表面的卡诺氏液。 (3) 解离液:(质量分数为 15%HCI 和体积分数为 95%酒精 1:1 混合)使组织中

4、的 细胞分离开。 (4) 清水:洗去解离液 ,防止解离过度 ,便于染色。 (5) 改良苯酚品红染液 :使染色体着色。 五、实验数据的采集分析 (一) 学生观察到的较好的实验结果后 ,由老师拍照记录。 (二) 造成看不到染色体数加倍细胞原因较多 ,常见原因有 :1.没有培养出分 生区或没有剪取到分生区 2.低温诱导时间不足 3.解离不充分或漂洗不干净造成 染色不足 4.染色时间控制不当 ,看不清染色体 5.没有低倍镜寻找过程六、实验总 结反思与修正 1 .针对新洋葱不容易生根的问题 ,解决方法为 :先将新洋葱放在干燥、通风、 阳光下晒 10 天左右，再放入冰箱中低温室内(4C左右均可)3-5 天

5、左右,可以解 除休眠 ,就很容易发根了。 2.针对剪取根尖时 ,很多根尖已经被上一个班级的同学剪掉 ,导致实验失败的 问题,解决方法为 :每次剪取根尖时先把根从基部剪掉 ,然后剪取上面的根尖 ,这样, 就可以避免以上问题的出现。 3针对调整解离时间和解离方式的问题。解决方法为 :解离时间少于 5 分钟 解离效果不太好 ,在制作装片时细胞分散效果不好。解离时将根尖放在培养皿的 边上,倾3/ 3 斜放置培养皿 ,滴加 1 毫升的解离液解离即可 ,这样用量少 ,既节约又更加 安全。或者在酒精灯火焰上稍微加热 ,可以节省解离的时间。 4.针对染色液的浓度和染色时间的问题 ,解决方法为 :将初始染液稀释 10 倍, 并且染色时间为 3 分钟 ,效果最好。如果染色液不稀释 ,就会把染色体染色太深 ,以 至于在显微镜下观察时 ,看到的是深蓝的一片 ,很难分辨一条条的染色体。将染液 稀释 10倍,并且染色时间减少为 3 分钟,染色清晰、而且时间长也不影响染色效 果