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文档简介

1、血清葡萄橹测定1 .实验原理在己糖激酶(HK)催化下,葡萄糖和ATP发生磷 酸化反应,生成葡萄糖-6-磷酸(G6P)与ADPo前者 在葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)催化下脱氢,生成 6-磷酸葡萄糖酸(6PG),同时使NADP还原成NADPH。 NADPH的生成速率与葡萄糖浓度呈正比。NADPH在波长 340nm有吸收峰,可监测吸光度升高速率,计算血清 中葡萄糖浓度。2 .标本:2. 1病人准备:12小时禁食。2.2类型:血清或血浆(EDTA,肝素或氟化钠),标本 最好不要溶血。迅速分离血清或血浆,减少红细胞糖 酵解时葡萄糖的损失。随机收集尿样。3.标本存放:血清、血浆应在血液采集1小时内,

2、 尽早分离。加入糖分解抑制剂(NaF, KF)后的稳定性: 1525保存可稳定1天,48保存可稳定7天。血 清中的葡萄糖,无溶血,无细菌污染,没有添加的防 腐剂,在25c下可稳定8个小时,在4c下可稳定72 小时。尿样应保存在28下并尽快进行分析。脑脊 髓液如果避免蒸发可在28c下稳定至少5天,5天内不检验的标本应在收集后立即储存在-20C的条件 下。4.标本运输:常温条件下保存运输。标本拒收标准:细菌污染、超时送检的的标本。5 .6 .试验材料:6. 1欧泰克血糖测定试剂盒, 氏质控品I、Ho6. 1. 1试剂组成:磷酸缓冲液,PH7. 6三磷酸腺甘(ATP)醋酸镁NAD'己糖激酶(

3、HK)罗氏复合定标液,罗100 mmol/L4 mmol/L10 mmol/L3 mmol/L2 25 KU/L2 75 KU/L葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)6. 1. 2试剂准备: 6. 1. 3试剂稳定性与贮存:试剂避光保存于225,若无污染,可稳定至失效期。试剂有效期为24个月。试剂不可冰冻。开盖后应避免污染。6. 1.4变质指示:当试剂有浊度时,表明有细菌污染, 不能继续使用。6. 1.5注意事项:避免试剂与皮肤及粘膜接触。6.2校准品:参见生化检验校准品和质控品.SOP文件6 . 3质控品:参见生化检验校准品和质控品.SOP文件7 .仪器:日立7060全自动生化分析仪8 .操作

4、步8. 1项目基本参数:参见7060生化分析仪项目测定参数.SOP文件8 . 2仪器操作步骤:参见7060生化分析仪操作规程.SOP文件9 .检验结果的判断与分析10 .质量控制:在每一批标本中都应把非定值血清水平I与H质控做为未知标本进行分析,以2s为质控警告限,3s为失控限,绘制质控图,判断是否在控。 质控规则参见室内质控操作规程.SOP文件。11.计算方法:以用罗氏复合定标物校准仪器后,在病人结果可报告范围内,仪器直接报告可靠的检测结 果,以mmol/L报告o12 .参考值范围:(mmol/L)血清:3.9 6.1 mmol/L尿液: 24h 尿样 <2.8mmol/day*脑脊液

5、: 成人:2. 5 4. 5 mmol/L儿童:2. 84. 5 mmol/L13 .临床意义:检测血清或血浆中葡萄糖主要用于糖 尿病的诊断和治疗监视,还可用于检出新生儿低血糖 症、排除胰岛细胞癌以及评估各种疾病碳水化合物代 谢状况。血清葡萄糖水平可能会异常高(高血糖)或 异常低(低血糖)。葡萄糖测量用于诊断和治疗碳水化 合物代谢紊乱,包括糖尿病,新生儿低血糖,自发性 低血糖,郎格罕氏岛细胞癌等。葡糖尿(存在葡萄糖化尿)在健康,怀孕的妇女 中很常见。妊娠葡糖尿的最主要的特征就是每天之间 或一天之中有一个显著的变化。脑脊髓液(CSF)葡萄糖的测定帮助区别病毒性脑 膜炎与细菌性脑膜炎;细菌性脑膜炎

6、和结核性脑膜炎 中的葡萄糖值通常很低(不到的40%至50%血清葡萄 糖),病毒性脑膜炎中的葡萄糖值通常是正常的。癌性 脑膜炎(肿瘤细胞在脑膜中广泛渗透)也使CSF葡萄 糖值在正常值以下。14 .线性范围:血清1. 00-38. 9 mmol/L;尿液、脑 脊液 1. 11 36. 08 mmol/Lo14. 2精密度:在日立7060生化仪上用质控液来测精 密度。结果反映了该方法的精密度。当仪器维护,周 围环境,干片处理和保存,质控液的复溶以及样品处 理等方面发生变化都会影响结果的重复性。14. 3方法学比较:14. 4灵敏度:本试剂的检测限为L 11 mmol/Lo14. 5特异性:14. 6病人结果可报告范围:1.11-38.9 mmol/L15.超出范结果处理:本法线性上限为38. 9mmol/Lo如果样品中GLU浓度超出系统的测试线 性范围,请按下列步骤进行稀释:血清、血浆或尿液 用生理盐水稀释,重新测试。将测试结果乘以稀释倍 数,就得到原始样品中GLU的浓度。16.病危报警值的处理:女性及婴儿的血糖测定值<2. 2mmo/L或者>22. 2mmol/L;男性的血糖测定值<2. 7mmo/L或>

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