抗菌试验—抑菌圈法_第1页
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文档简介

1、抑菌圈实验说明抑菌圈法是衡量杀菌防霉剂效果的一种方式，主要用于测定杀菌防霉剂对细 菌、霉菌、酵母菌的抑菌作用，是定性或半定量的方法。通过杀菌防霉剂在琼脂 平板上的扩散能力来初步筛选更有效的杀菌防霉剂品种。用具和材料霉菌培养皿，无菌吸管（或针筒），圆片滤纸（直径2cm）,带玻璃珠的无菌水，带过滤漏 斗的三角牌，镶子，接种针（环），熔化状态的琼脂培养基（最好保温于45C左右水浴中），一定浓度的药剂，供试验用的菌种。试验过程1.用接种环挑取各试管斜面的菌种于带玻璃珠的无菌水中，用手振荡数分钟使弛子分散， 过滤后制成混合孑包子悬液。2.用无菌吸管（或针筒）向各培养皿中注入一定浓度的混合孑包子悬浮液0.

2、5mL。3.向各培养皿内注入15Ml20ml的熔化状琼脂培养基（约45C）,将菌液与培养基混合均 匀，待其冷却。4.用镶子将圆片滤纸在不同浓度的防霉剂中浸渍片刻，取出置于带菌培养基平板的中央，盖上盖子5.置适宜温度下，培养23d,观察滤纸片圆片周围抑菌圈的有无及大小。注意事项1.所有的操作用具和材料都要事先做灭菌处理，操作必须在无菌室（或无菌箱）内于火焰 旁进行。2.霉菌、细菌、酵母菌等各种微生物都必须分别配置混合菌液，即这里指的混合菌液是霉菌或酵母菌等诸种菌的分别混合液，并非霉菌、细菌和酵母菌的混合液。3.混合菌液的浓度一般为106108cfu/mL.4.倒入培养皿的琼脂培养基温度不能太高（一般为45C左右），否则会引起微生物死亡。也不能太低，因为琼脂会很快凝结，以致搅拌不均匀，影响试验结果。5.各种微生物的最适生长温度不同（例如霉菌一般为2530C，细菌一般为3237C等），恒温培养时宜分开放置。结果评判由于滤纸圆片所吸附的药液慢慢向四周扩散，因此在滤纸片的周围就出现清晰的抑菌圈（加入该防霉剂对供试菌有抑制效果）。抑菌圈的大小代表药剂抗菌力的高低。在一定的药剂浓

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