QC微生物实验室洁净区管理程序 (备用版SOP)

1、标准操作规程Standard Operating Procedure编号No.版本号Version QC微生物实验室洁净区管理程序Management Procedure of Clean Room in QC Microbiology Lab页码Page11 of 11QC微生物实验室洁净区管理程序 Management Procedure of Clean Room in QC Microbiology Lab部门：Department签字/日期：Signature/Date起草人：Prepared by 审核人：Reviewed by 审核人：Reviewed by 审核人：Review

2、ed by 批准人：Approved by 颁发部门Issued by执行日期Effective Date替换文件Replaced For复审日期Review Date分发部门Distributed to1 目的建立洁净室的消毒、日常使用和维护管理程序，以保证*药业QC微生物实验室洁净区的微生物指标符合洁净区微生物的要求，消除灭菌器具及供试品被污染的可能性，确保检测结果的准确性和可靠性。2 适用范围*药业QC微生物实验室（API QC洁净区位于外沙大楼三楼东边北面区域包括D级、C级、A级）的管理3 定义和术语洁净室(Clean Room)或洁净区（Clean Area）： 是指对尘粒和微生物污

3、染需进行环境控制的房间和区域，其建筑结构装备及其使用均具有减少对该区域内污染源的介入、产生和滞留的功能。4 责任4.1 API QC微生物实验人员依据本SOP规定进行洁净室的消毒、日常使用和维护管理5 EHS要求N/A6 程序6.1 洁净室人员进出程序6.1.1 进入洁净区的路线及程序² 先在微生物洁净室外实验室洗手。图1² 在更鞋室门口，脱掉鞋子，推开更鞋室的门，穿上更鞋室的拖鞋。 图2² 脱外衣室（手消毒） ：打开脱外衣室的门，进入脱外衣室，脱掉白大褂，用酒精胶消毒手部。 图3² 进入穿无菌内衣室，先戴上帽子，再穿无菌内衣、裤子，接着穿上右脚内鞋套，

4、踩在穿无菌外衣室的地面，然后穿上另一只内鞋套。图4图5 图6图7 图8² 进入穿无菌外衣室后，先用酒精胶消毒手部，穿上无菌外衣，戴口罩，再穿外鞋套，戴上无菌手套后，手再次消毒才可进入洁净室；对着装进行自检或互检，以保证着装的规范。图9 图10 图11 图126.1.2 操作完毕后洁净室人员沿原路线退出，程序如下：² 在穿无菌外衣室脱掉无菌外衣、外鞋套，口罩、无菌手套。² 进入内衣室脱掉无菌内衣，内鞋套，帽子。 ² 进入脱外衣室，穿外衣。² 进入更鞋室，换鞋子，退出洁净室。6.2 洁净室日常消毒程序6.2.1 消毒剂配制方法² 0.2%

5、新洁尔灭：根据实际所需的配制用量（V配制量），计算出5%新洁尔灭的用量（V5%新洁尔灭），然后用量筒准确量取计算量，倒入指定的配制容器，再加入注射用水（或纯化水）稀释至配制量（V配制量），搅拌均匀经0.22mm的滤膜过滤，然后加塞包扎备用。当天配制当天使用。计算公式如下：V5%新洁尔灭=图10.2%×V配制量5%² 2%的甲酚（来苏尔）：根据实际所需的配制量（V配制量），计算出50%甲酚（来苏尔）用量（V50%甲酚（来苏尔），然后用量筒准确量取计算量，倒入指定的配制容器，再加入注射用水（或纯水）稀释至配制量（V配制量），搅拌均匀经0.22mm的滤膜过滤，然后加塞包扎备用。当

6、天配制当天使用。计算公式如下：V50%甲酚（来苏尔）=2%×V配制量50%² 75%乙醇：根据实际所需的配制量（V配制量），计算出无水乙醇用量（V75%乙醇），然后用量筒准确量取计算量，倒入指定的配制容器，再加入注射用水（或纯水）稀释至配制量（V配制量），搅拌均匀经0.22mm的滤膜过滤，然后加塞包扎备用。应在48小时内使用。V75%乙醇=75%×V配制量100%² 消毒剂配制时填写配制记录H3-SOP-72013-R01“QC洁净室消毒剂配制记录”。6.2.2 消毒方法6.2.2.1 表面消毒² 按不同级别的洁净区清洁规程对墙壁、顶棚、地面、

7、设施表面、器具及设备外表面、操作台等进行清洁与消毒，具体方法如下：按从上到下、从里到外的顺序对墙壁、顶棚、地面、设施表面、器具及设备外表面、操作台等用经过消毒处理的洁净的拖把或抹布浸沾0.2%新洁尔灭或2%的甲酚（来苏尔）溶液进行擦拭。消毒的接触时间应不低于10分钟。上述两种消毒液0.2%新洁尔灭或2%的甲酚（来苏尔）溶液应每周交替使用。 注：若与产品直接接触的器具及设备内表面或操作台面只能用75%乙醇溶液消毒，且不必轮换。对于上述消毒部位的周期，不同的洁净级别有不同的要求，具体见下表：洁净级别消毒周期A级每天工作之前与工作之后均消毒一次C级每天消毒一次D级每周消毒一次6.2.2.2 空间消毒

8、 ² 臭氧消毒：每天使用前对洁净室进行臭氧消毒2小时，方法见下述使用程序。² 甲醛熏蒸（每月进行一次）ü 消毒前先用纯净水润湿的抹布将所有洁净室表面和设备表面擦洗干净。ü 计算甲醛用量：计算洁净室体积（无菌室和微生物实验室体积为约59m3，抗生素效价室和阳性接种室为56 m3），按10ml/m3的比例准备浓度为38%的甲醛溶液。ü 在不锈钢容器中加入甲醛溶液，点燃酒精灯，让甲醛气体扩散（约30min）；再启动空调让甲醛气体循环（约20min），关闭通风系统，房间熏蒸消毒，时间为8小时。房间排气，用新鲜空气置换，开启空调系统，用75%乙醇溶液喷洒

9、环境。6.2.2.3 日常消毒需填写记录H3-SOP-72013-R02“QC洁净室日常消毒记录 ”、 甲醛薰蒸消毒需填写记录H3-SOP-72013-R03“QC洁净室甲醛薰蒸消毒记录”。6.3 洁净室物品进出程序6.3.1 需灭菌物品的操作程序² 将准备灭菌的三角烧瓶和试管塞上硅胶塞，用牛皮纸双层包扎；平皿放在不锈钢筒中，一般在不锈钢筒表面封口贴上化学灭菌指示带(确保每一次灭菌至少要有一个化学灭菌指示带)；剪刀和镊子都用牛皮纸双层包扎放在不锈钢容器中；装有培养基的三角烧瓶需用牛皮纸双层包扎，蓝盖瓶可直接放置。将包扎好的待灭菌物品放入灭菌专用金属筐中，注意有培养基的容器不能倒置，防

10、止培养基溢出。 ² 将金属筐上面盖牛皮纸，放在手推车上由灭菌人员转移至QC二楼灭菌室（210房间）。² 灭菌人员检查待灭菌物品是否包扎完好，装有平皿的不锈钢筒透气是否孔打开，将放置有灭菌物品的金属筐放入灭菌柜中。² 关上灭菌柜门，按具体的要求经验证的灭菌程序灭菌并做好记录（H3-SOP-72013-R07“灭菌操作记录”）。使用压力蒸汽灭菌锅进行热压灭菌操作。灭菌时间及温度参照需灭菌物品或经验证的条件。² 灭菌完成至少30分钟后，将金属筐取出，检查灭菌物品是否包扎完好，将不锈钢筒透气口关闭，再转入密封容器中，对此容器贴已灭菌标识及注明灭菌时间。转移待用。

11、² 已灭菌的器材放置超过2天后需重新灭菌。6.3.2 阳性菌及培养废弃物的灭菌操作6.3.2.1 阳性菌销毁：阳性菌必须进行121，30min湿热灭菌后方可弃去。阳性菌废弃物放入生物废弃袋中包扎好，放入不锈钢筒中灭菌。6.3.2.2 培养后平皿：培养后平皿放入不锈钢筒中灭菌。6.3.3 实验器具及供试品进入洁净室的程序² 将灭菌后的器具及培养基放在金属筐中，再放入密封容器中，转移至物流通道（待试验的样品的外包装进入传递窗之前先用0.2%新洁尔灭溶液或75%乙醇溶液将供试品外包装消毒，转移至传递窗）。² 物品按下述洁净室传递窗使用程序进入洁净室ü 打开传递

12、窗电源开关，按传递窗按钮使门打开，把灭菌器具或经消毒液擦拭过的供试品移入传递窗，关上门后开启红色紫外灯按钮，绿色风机按钮；ü 待风机开启后约2分钟，关掉紫外灯、风机按钮，传递窗对面的操作员工可通过传递窗外面的操作人员的动作提示或根据紫外灯的关闭判断消毒是否完毕，然后开启传递窗另一面的门将物品取出。6.3.3.1 实验器具及供试品退出洁净室的程序² 实验完毕后，需要带出洁净室的物品也需要按同样的程序从传递窗转移出洁净室，但不需要进行消毒操作。6.3.3.2 每次使用传递窗都需要做使用记录H3-SOP-72013-R04“QC洁净室传递窗使用记录”。6.4 洁净室的使用程序&#

13、178; 洁净室人员按空调系统停机按钮，红灯亮，隔30秒后再按消毒开机按钮，绿灯亮，设置消毒时间2小时。² 洁净室进行臭氧消毒2小时后，再次按停机按钮，隔30秒后再按工作开机按钮，空调进入工作状态。² 空调工作1小时后洁净室人员按上述进出洁净室程序进入洁净室，将传递窗里的灭菌器具及供试品置净化操作台上，开启净化操作台风机及紫外灯，并记录各洁净室间压差数据（每工作日记一次H3-SOP-72013-R05“QC洁净室压差记录”），洁净室人员按原路线退出洁净室。² 净化操作台风机及紫外灯开启1小时后，洁净室人员方可进入洁净室进行无菌操作。在阳性接种室或抗生素室工作的同时

14、，开启排风机组的臭氧发生器开关，进行排风消毒。² 操作完毕操作人员将所有物品放入传递窗，操作者按上述物品进出程序，按原路线退出洁净室。² 按空调系统停机按钮，隔30秒后再按值班开机按钮，空调系统风机进入值班状态。² 非无菌操作人员和未经允许的外来人员不得进入洁净室，特殊情况下需要进入洁净室的，必须经QC领导批准后方可进入，进入的程序与洁净室人员相同，同时必须做好登记记录H3-SOP-72013-R06 “外来人员进出QC洁净室记录”。6.5 洁净区异常情况调查6.5.1 洁净室温湿度出现异常情况需参考H3-SOP-72009 QC实验室温湿度监测管理程序，进行调查

15、。6.5.2 灭菌后的物品，在转移或存放过程中出现瓶塞脱落或其它密闭性问题，该物品应得新灭菌（针对工器具）或废弃（针对培养基）6.5.3 阳性菌或含菌废弃物若在转移过程中，出现泄露，应根据其对环境影响程度来决定是否需要进行偏差调查。6.5.4 压差异常，首先检查是否为显而易见的原因（比如门未关紧，物品存放干扰压差结果，压差计损坏等）若是，则记录异常值，并注明原因，作为实验室异常事件来处理。若否，则需由维修人员协助查找原因（风机故障，过滤器故障等）并解决。该类情况需要按偏差调查。若洁净区在维修过程中受到污染，需要按照空间消毒。6.5.5 洁净区所有异常情况若为偏差，参考H3-SOP-71002“

16、偏差管理程序”进行调查。6.5.6 灭菌柜若出现故障，暂时无法修理，可借用其它，经过验证的灭菌柜进行灭菌。需灭菌的物品在转移过程均要使用密封容器。6.5.7 若洁净区出现异常，暂无法恢复，可用其它同等条件的洁净区进行检验。7 参考或引用文件N/A8 附件8.1 H3-SOP -72013-R01 QC洁净室消毒剂配制记录8.2 H3-SOP-72013-R02 QC洁净室日常消毒记录8.3 H3-SOP-72013-R03 QC洁净室甲醛薰蒸消毒记录8.4 H3-SOP-72013-R04 QC洁净室传递窗使用记录8.5 H3-SOP-72013-R05 QC洁净室压差记录8.6 H3-SOP-72013-R06 外来人员进出QC洁净室记录8.7 H3-SOP-72013-R07 灭菌操作记录8.8 H3-SOP-7