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文档简介

1、MKMLB培养基怎样配制LB一般被解释为Luria-Bertani ，然而根据其发明人贝尔塔尼（Giuseppe Bertani）的说法，这个名字来源于英语lysogeny broth ，即溶菌肉汤。LB培养 基是近年来用于培养基因工程受体菌（大肠杆菌）的常用培养基之一。LB培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基，有时又称普通培 养基，含有酵母提取物、胰化蛋白胨和 NaCI。酵母提取物：酵母经破壁后将其中蛋白质、核酸、维生素等抽提，再经生物 酶解的富含小分子的氨基酸、肽、核苷酸、维生素等天然活性成分的淡黄色粉末， 其中氨基酸含量30沖上，总蛋白50沖上，核苷酸10沖上，广泛用作生物培

2、养基和食品调味品制造原料。胰化蛋白胨：一种优质蛋白胨，是以新鲜牛肉和牛骨经胰酶消化，浓缩干燥 而成的白色粉末，含有丰富的氮源、氨基酸等。酵母提取物为微生物提供碳源、能源、磷酸盐、生长因子、维生素等；蛋白胨主要提供氮源;NaCl主要提供微生物生长环境（如渗透压），其次是提供无机 盐。在配制固体培养基时还要加入一定量琼脂作凝固剂。琼脂在常用浓度下 96C时溶化，一般实际应用时在沸水浴中或垫以石棉网直接煮沸溶化。琼脂在 40C时凝固，理常不被微生物分解利用。固体培养基中琼脂的含量根据琼脂的质 量和气温的不同而有所不同。由于这种培养基多用于培养细菌，因此，要用稀酸或稀碱将其pH调至中性或微碱性，以利于

3、细菌的生长繁殖。LB培养基配方（每升）酵母提取物5g胰化蛋白胨10g氯化钠10gNaOHM pH至 7.0，121C、20min 高压灭菌。LB固体培养基LB培养基1L财km®琼脂粉15gNaOH调 pH至 7.0 , 121C、20min 高压灭菌。有时需在培养基中添加抗生素，琼脂凝固点为 40C，所以添加抗生素最好 在5055C。LB培养基用途：用于一般细菌培养，特别用于分子生物学试验中大肠杆菌的保存和培养。LB培养基使用原理：蛋白胨、酵母膏粉提供氮源、维生素和生长因子；氯化钠维持均衡的渗透压； 葡萄糖提供碳源；琼脂是培养基的凝固剂。LB培养基配制方法配制每升培养基，应该在950

4、 ml去液态lb培养基离子水中加入：胰化蛋白 胨10g酵母提取物5g NaCl 10g摇动容器直至溶质溶解。用5mol/LNaOH调pH 至7.0。用去离子水定容至1L。在15psi高压下蒸汽灭菌20min。1丄B固体培养基1L和液体一样，加15g琼脂粉，一定要在温度降下之前加 好抗固态LB培养基生素，并且倒好板。LB固体培养基倒板1。配制：100mlLB 培养基加入1.5g琼脂粉2. 抗生素的加入：高压灭菌后，将融化的LB固体培养基置与55C的水浴中， 待培养基温度降到55C时（手可触摸）加入抗生素，以免温度过高导致抗生素失 效，并充分摇匀。3. 倒板：一般10ml倒1个板子。培养基倒入培养皿后，打开盖子，在紫外 下照10-15分钟。

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